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UHPLC-MS/MS法同时测定牛黄蛇胆川贝液中22个胆酸成分

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药物分析杂志 2023年第11期43卷 1847-1857页

作者：游菁菁林晨林诗铃林薏涵池文杰黄鸣清福建省食品药品质量检验研究院福州350000 福建中医药大学福州350122 福建医科大学福州350122

目的:建立同时测定牛黄蛇胆川贝液中22个胆酸成分(甘氨熊脱氧胆酸、甘氨猪胆酸、牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-二羟基胆烷酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、3α-羟基-7-酮基-5β... 详细信息

目的:建立同时测定牛黄蛇胆川贝液中22个胆酸成分(甘氨熊脱氧胆酸、甘氨猪胆酸、牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-二羟基胆烷酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、3α-羟基-7-酮基-5β-胆烷酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、12-酮脱氧胆酸、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸)的超高效液相色谱-串联质谱联用(UPLC-MS/MS)方法。方法:样品采用甲醇超声提取;以Thermo Fisher Scientfic Bremen HYPERSIL GOLD(100 mm×2.1 mm, 1.9μm)为色谱柱,0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量为2μL;质谱采用加热电喷雾离子源(HESI),负离子模式和平行反应监测(PRM)模式,喷雾电压为3.0 kV (-)。结果:所建方法在一定范围内均呈现良好线性关系(r≥0.999 4);精密度、重复性良好,供试样品在48 h内稳定性良好,加样回收率在94.9%~105.2%,RSD为0.50%~5.2%。含量测定结果表明牛黄蛇胆川贝液中牛磺胆酸、胆酸、猪胆酸、甘氨胆酸、猪去氧胆酸含量较高,且不同厂家之间含量存在较大差异,聚类分析可分为3类。统计发现,Ⅱ类中的牛磺胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、3α-羟基-7-酮基-5β-胆烷酸、12-酮脱氧胆酸、胆酸含量明显高于类别Ⅱ、Ⅲ,类别Ⅲ中猪胆酸含量明显高于类别Ⅰ和Ⅱ。结论:本方法便捷、高效、准确、灵敏,可用于牛黄蛇胆川贝液中22个胆酸成分的测定。

关键词：牛黄蛇胆川贝液胆酸超高效液相色谱串联质谱法含量测定中成药

基于UPLC-MS对牛黄解毒片中胆酸类成分定量测定及化学模式识别研究

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中草药 2023年第9期54卷 2750-2757页

作者：林诗铃林逸凡陈涛林思荣林晨郑燕芳黄鸣清福建中医药大学药学院福建福州350122 福建省食品药品质量检验研究院福建福州350001

目的建立超高效液相色谱串联四级杆-静电轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS/MS)同时测定牛黄解毒片(Niuhuang Jiedu Tablets,NJT)中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-... 详细信息

目的建立超高效液相色谱串联四级杆-静电轨道阱高分辨质谱技术(UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS/MS)同时测定牛黄解毒片(Niuhuang Jiedu Tablets,NJT)中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、熊去氧胆酸、7-酮基胆石酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、12-酮脱氧胆酸、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸21种胆酸类成分含量的方法,并对不同批次的NJT进行质量评价。方法采用Thermo Bremen Hypersil Gold色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以含0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱,体积流量0.2 mL/min,柱温为40℃;质谱采用加热型电喷雾离子源(HESI),在负离子平行反应监测模式下进行含量测定,采用SIGMA 14.0软件对定量结果进行化学计量学分析。结果21种胆酸成分在线性范围内呈良好的线性关系(r^(2)≥0.9989),其精密度、重复性、稳定性RSD均小于6.7%,平均回收率为95.1%~102.5%(RSD≤4.5%),在正交偏最小二乘-判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)与层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)中,样品在95%置信区间内被分为3类,变量重要性排序值(variable importance in projection values,VIP)显示猪胆酸、牛磺胆酸、7-酮基胆石酸、甘氨胆酸、胆酸为样品间的主要差异成分。结论所建立方法具有高效、灵敏的特点,能够快速实现对NJT中21种胆酸类成分的含量测定,可为其质量控制提供理论依据。

关键词：牛黄解毒片中成药 UPLC-Q Exactive-Orbitrap MS/MS 质量控制猪胆酸牛磺胆酸 7-酮基胆石酸甘氨胆酸胆酸

UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS法同时测定牛黄上清片中18种胆汁酸的含量

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中成药 2024年第4期46卷 1065-1072页

作者：林晨洪芳陈俊裕林诗铃郑燕芳黄鸣清福建省食品药品质量检验研究院福建福州350012 福建中医药大学福建福州350122

目的建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)法同时测定牛黄上清片中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛... 详细信息

目的建立超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)法同时测定牛黄上清片中牛磺胆酸、7-酮-3α,12-α-羟基胆烷酸、甘氨猪去氧胆酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-酮-7α,12α-二羟基-5β-胆烷酸、牛磺鹅去氧胆酸、3α-羟基-7-氧代-5β-胆烷酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、猪去氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸的含量。方法分析采用Thermo Fisher Scientfic Bremen HYPERSIL GOLD色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.9μm);流动相0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温40℃;加热电喷雾离子源;负离子扫描;平行反应监测模式。再进行化学模式识别。结果 18种胆汁酸在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 5),平均加样回收率96.73%~104.07%,RSD 2.10%~4.07%。不同厂家样品中各胆汁酸在种类和含量上存在一定差异。结论该方法灵敏可靠,专属性好,可用于牛黄上清片的质量控制。

关键词：牛黄上清片胆汁酸含量测定超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS) 化学模式识别

UPLC-MS/MS法结合化学计量学分析万氏牛黄清心丸中14种胆汁酸成分

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中药新药与临床药理 2023年第9期34卷 1271-1278页

作者：陈涛林诗铃林逸凡陈雪婷郑燕芳黄鸣清福建中医药大学药学院福建福州350122

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定万氏牛黄清心丸中14种胆汁酸成分(牛磺胆酸、7-酮脱氧胆酸、甘氨胆酸、3-氧代脱氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、... 详细信息

目的建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法同时测定万氏牛黄清心丸中14种胆汁酸成分(牛磺胆酸、7-酮脱氧胆酸、甘氨胆酸、3-氧代脱氧胆酸、牛磺鹅去氧胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、牛磺石胆酸钠、甘氨石胆酸、鹅去氧胆酸、去氧胆酸、石胆酸)的含量,并结合化学计量学考察不同批次万氏牛黄清心丸胆汁酸成分的差异。方法采用Hypersil GOLD色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.9μm);流动相为甲醇-0.1%甲酸水,梯度洗脱;流速:0.2 mL·min^(-1);柱温:40℃;进样量:2μL。采用加热电喷雾离子源(HESI)负离子模式,平行反应监测(PRM)模式。以聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)评价不同批次万氏牛黄清心丸的胆汁酸成分差异。结果万氏牛黄清心丸中14种胆汁酸成分在相应测定范围内线性关系良好(r>0.9993),平均加样回收率为95.6%~103.6%,RSD为0.52%~4.62%。牛磺胆酸、甘氨胆酸、去氧胆酸、胆酸可以作为差异性成分对不同批次万氏牛黄清心丸进行区分。结论该方法能够实现对万氏牛黄清心丸中14种胆汁酸成分的快速定量分析,并可客观反映不同批次万氏牛黄清心丸之间的胆汁酸类成分含量差异。

关键词：万氏牛黄清心丸超高效液相色谱-串联质谱胆汁酸化学计量学

UPLC-MS/MS法同时测定同仁牛黄清心丸中15个胆汁酸的含量

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中国药房 2023年第17期34卷 2074-2078页

作者：陈雪婷林诗铃陈涛林逸凡黄鸣清郑燕芳福建中医药大学药学院福州350122

目的建立同时测定同仁牛黄清心丸中15个胆汁酸成分含量的方法,并采用该法测定15批样品的含量。方法以脱氢胆酸为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术进行测定。色谱柱为Hypersil GOLD C_(18),以甲醇-0.1%甲酸溶液为流... 详细信息

目的建立同时测定同仁牛黄清心丸中15个胆汁酸成分含量的方法,并采用该法测定15批样品的含量。方法以脱氢胆酸为内标,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术进行测定。色谱柱为Hypersil GOLD C_(18),以甲醇-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.2 mL/min,柱温为40℃,进样量为2μL;采用加热型电喷雾离子源,在负离子模式下进行平行反应监测模式扫描。采用SPSS 24.0软件对含量测定结果进行化学模式识别分析。结果 15个胆汁酸成分在各自检测质量浓度范围内与峰面积线性关系良好(R^(2)均不小于0.998 9),精密度、重复性、稳定性均良好(RSD均不大于5.49%),平均加样回收率为93.8%~105.7%(RSD为0.5%~5.8%)。牛磺胆酸、7-酮-3α,12α-羟基胆烷酸、12-脱氢胆酸、甘氨胆酸、3-oxo-7α,12α-hydroxy-5β-cholanoic acid、牛磺鹅脱氧胆酸、3α-羟基-7-氧代-5β-胆烷酸、猪胆酸、牛磺脱氧胆酸钠、猪脱氧胆酸、胆酸、甘氨鹅脱氧胆酸、甘氨脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸的平均含量分别为670.56、25.97、10.54、280.12、4.04、29.81、182.98、813.55、120.95、220.31、797.37、18.37、68.59、30.13、59.82μg/g。聚类分析和主成分分析均将15批同仁牛黄清心丸分为2类,其中S1~S12为一类,S13~S15为另一类。结论所建方法准确、灵敏度高、专属性强,且测定胆汁酸种类较多,能快速实现对同仁牛黄清心丸中15个胆汁酸成分的定量分析,适用于该药的质量控制。

关键词：同仁牛黄清心丸超高效液相色谱-串联质谱法胆汁酸含量测定化学模式识别分析

超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法结合化学计量学分析牛黄清心丸(局方)中的胆酸类成分

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中华中医药杂志 2024年第8期39卷 4024-4032页

作者：林逸凡林诗铃陈涛林思荣林晨郑燕芳黄鸣清福建中医药大学药学院福州350100 福建省食品药品质量检定研究院福州350001

目的:建立超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱(UPLC-Q/Exactive MS)对牛黄清心丸(局方)中的胆汁酸成分进行定性定量分析,并对不同批次的牛黄清心丸进行质量评价。方法:采用Thermo HYPERSIL GOLD柱,以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相... 详细信息

目的:建立超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱(UPLC-Q/Exactive MS)对牛黄清心丸(局方)中的胆汁酸成分进行定性定量分析,并对不同批次的牛黄清心丸进行质量评价。方法:采用Thermo HYPERSIL GOLD柱,以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相进行梯度洗脱;质谱在负离子模式下分别进行全扫描/数据依赖二级扫描(Full MS/dd-MS2)和平行反应监测(PRM)。采用SPSS和SIMCA软件对含量测定结果进行化学计量学分析。结果:从牛黄清心丸中共鉴定出16个胆酸类成分,在定量分析中,16个胆酸在各自浓度范围内线性关系良好,其平均加样回收率为94.7%~104.8%。层次聚类分析(HCA)将13批样品分为2类,样品S1~S3、S6、S7为Ⅰ类,样品S4、S5、S8~S13为Ⅱ类,与主成分分析(PCA)结果一致;正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)显示胆酸、牛磺胆酸和甘氨胆酸的变量重要性投影值(VIP)均>1,是引起产品质量差异的关键成分。结论:所建方法能快速测定牛黄清心丸中的16个胆汁酸,并结合化学计量学筛选出3个影响产品质量的差异性成分,为牛黄清心丸的质量控制及评价提供科学依据。

关键词：牛黄清心丸超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱胆酸含量测定化学计量学质量控制

自我觉醒并向内深耕：专硕师范生专业跨越式成长的内在支持系统运作研究——基于马扎诺认知目标分类学视角

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教师教育研究 2025年第01期 69-76页

作者：江淑玲林诗慧浙江师范大学教育学院

基于马扎诺认知目标分类学，研究抓取典型个案，探究了一位专硕师范生实现专业跨越式成长的内在支持系统及其精进过程，揭示其高层次能力与表现达成的深层机理。研究发现，专硕师范生的专业能力提升依赖于全情投入的自我系统、觉醒的元... 详细信息

基于马扎诺认知目标分类学，研究抓取典型个案，探究了一位专硕师范生实现专业跨越式成长的内在支持系统及其精进过程，揭示其高层次能力与表现达成的深层机理。研究发现，专硕师范生的专业能力提升依赖于全情投入的自我系统、觉醒的元认知系统、进阶的认知系统与逐步完善的知识系统。四大系统的融合构建了强有力的内在支持体系，推动外在推力向内生动力转化，从而实现卓越成长。高质量专硕师范生培养的核心在于通过三位一体的培养模式及校内外导师联动机制，帮助师范生建立自我与元认知系统，发展多层次认知目标，提升专业素养，构建可持续发展的内在支持体系。

关键词：专硕研究生内在支持系统专业跨越式成长

基于网络药理学和分子对接探讨石斛合剂治疗糖尿病的作用机制

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福建中医药 2023年第1期54卷 42-47页

作者：陈涛朱铭星林诗铃陈剑钰张捷平施红黄鸣清郑燕芳福建中医药大学药学院福建福州350122 福建中医药大学中医学院福建福州350122 福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122

目的运用网络药理学方法探讨石斛合剂治疗糖尿病的作用机制。方法运用TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库及文献报道搜集石斛合剂中的化学成分,并以PharmMapper平台预测化学成分靶点;运用GeneCards、TTD、OMIM、DrugBank筛选糖尿病相关靶点... 详细信息

目的运用网络药理学方法探讨石斛合剂治疗糖尿病的作用机制。方法运用TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库及文献报道搜集石斛合剂中的化学成分,并以PharmMapper平台预测化学成分靶点;运用GeneCards、TTD、OMIM、DrugBank筛选糖尿病相关靶点,将获取的化学成分靶点与糖尿病相关靶点取交集得到石斛合剂与糖尿病的共同靶点;利用STRING平台对交集靶点进行PPI网络构建,筛选出核心靶点;利用DAVID数据库对交集靶点进行KEGG富集分析与GO富集分析,应用微生信平台绘图;应用Cytoscape 3.7.2软件构建石斛合剂治疗糖尿病的成分-靶点-通路网络关系图;最后利用AutoDock软件进行分子对接验证。结果从石斛合剂中筛选得到199种活性成分,对应291种潜在靶点。石斛合剂抗糖尿病的核心成分39个,包括表小檗碱、新隐丹参酮Ⅱ、小檗红碱等,核心靶点14个,包括ALB、Akt1、IGF1、EGFR、PPARG、ESR1等。GO富集分析得到179个生物过程(BP)、58个分子功能(MF)、16个细胞成分(CC),主要涉及凋亡过程的负调控、类固醇激素介导的信号通路、细胞对胰岛素的刺激反应等生物学进程;KEGG通路分析得到信号通路80条,包括FoxO信号通路、胰岛素信号通路、PI3K/Akt信号通路等。结论石斛合剂抗糖尿病具有多成分、多靶点、多通路的作用特点,其可能通过降低胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗,促进糖脂代谢等途径发挥治疗糖尿病的作用,同时可能对糖尿病脑病等并发症起到干预作用。

关键词：糖尿病石斛合剂网络药理学分子对接作用机制

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山地城市生态安全评价及多情景格局预测：以重庆市为例

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科学技术与工程 2025年第06期 2627-2636页

作者：沈祺林牟凤云朱诗柔朱智贤重庆交通大学智慧城市学院

土地生态安全是土地资源持续利用的核心，由人类活动造成的土地利用变化改变生态系统结构与功能，对区域生态安全系统产生严重影响。为探究近年来重庆市及2030年生态安全变化情况，以重庆市为研究对象，采用PLUS（patch-level land use ... 详细信息

土地生态安全是土地资源持续利用的核心，由人类活动造成的土地利用变化改变生态系统结构与功能，对区域生态安全系统产生严重影响。为探究近年来重庆市及2030年生态安全变化情况，以重庆市为研究对象，采用PLUS（patch-level land use simulation）模型模拟2030年自然发展、生态优先、发展优先情景下土地利用变化。基于生态学角度构建生态安全评价指标体系，并结合突变模型定量评价土地生态安全水平。结果表明重庆市土地利用类型空间分布差异较大，耕地面积减少3 995.14 km2,建设用地面积增加1 147.36 km2,实现城市快速发展；2000—2020年重庆市生态安全处于一般安全等级以上面积占比呈增加-降低-增加-减少趋势，总体呈上升趋势。同时三种情景下处于在相对安全及以上占64.53%、67.31%、55.97%;重庆市生态安全空间格局与人口密度、GDP等空间格局相反，与植被覆盖、坡度等自然数据空间格局相符。通过对往年及不同情景下的土地利用变化情况进行生态评定，为生态及经济高质量协同发展提供依据。

关键词：土地利用生态安全评价多情景模拟突变级数法