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p53转录调控靶基因 GGT6 对人结肠癌的影响

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基础医学与临床 2023年第6期43卷 953-959页

作者：柳子朝杜文静李莉中国医学科学院基础医学研究所、北京协和医学院基础学院细胞生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005 山西医科大学基础医学院细胞生理学教育部重点实验室山西太原030606

目的筛选出p53转录调控靶基因,并利用生物信息学分析该基因在结肠癌(COAD)中的作用。方法对p53蛋白稳定剂Nutlin处理的结肠癌细胞系HCT116的RNA-seq数据进行基因差异分析及GO、KEGG和GSEA富集分析;在HCT116及HCT8细胞中加入Nutlin稳定... 详细信息

目的筛选出p53转录调控靶基因,并利用生物信息学分析该基因在结肠癌(COAD)中的作用。方法对p53蛋白稳定剂Nutlin处理的结肠癌细胞系HCT116的RNA-seq数据进行基因差异分析及GO、KEGG和GSEA富集分析;在HCT116及HCT8细胞中加入Nutlin稳定或转染siRNA敲降p53的表达,利用实时荧光定量PCR检测候选靶基因的mRNA表达;双荧光素酶报告实验验证p53对靶基因的转录调控;利用TCGA数据库中的结肠癌数据分析靶基因在结肠癌组织中的表达及患者预后情况。结果Nutlin处理结肠癌细胞系HCT116后细胞周期、DNA复制及染色体分离等生物过程基因表达发生变化,同样p53信号通路也被激活。在HCT116及HCT8细胞中γ-谷氨酰转移酶(GGT6)的mRNA水平与p53蛋白表达呈正相关。双荧光素酶报告实验确定了GGT6是p53转录调控的靶基因。TCGA-COAD数据分析表明GGT6在结肠癌组织中表达高于癌旁组织(P<0.001),且GGT6高表达患者的总体生存时间较GGT6低表达患者更长(P<0.01),推测GGT6是结肠癌的抑癌因素。结论GGT6是一个p53正调控转录靶基因,在结肠癌中可能是一个抑癌因素。

关键词： p53 转录调控 γ-谷氨酰转移酶结肠癌

山西新绛木版年画的民俗文化内涵及表现手法研究

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山西新绛木版年画的民俗文化内涵及表现手法研究

作者：杜文静山西师范大学

学位级别：硕士

年画是中国传统的民间艺术，一般是由民间艺人创作，具有浓厚的乡土气息，其题材内容广泛，民俗文化内涵丰富，多寓吉祥之意，将民众自身对生活的美好愿望寄予其中。本文通过文献资料与田野调查相结合的方法对新绛木版年画的生态环境、... 详细信息

年画是中国传统的民间艺术，一般是由民间艺人创作，具有浓厚的乡土气息，其题材内容广泛，民俗文化内涵丰富，多寓吉祥之意，将民众自身对生活的美好愿望寄予其中。本文通过文献资料与田野调查相结合的方法对新绛木版年画的生态环境、演变、题材内容、形式及现状进行考察，运用民俗学、艺术学、文化人类学的相关理论，对新绛木版年画背后所蕴含的民俗文化进行分析。全文分为绪论、主题和结语三大部分。绪论部分主要包括本文的研究对象、选题的目的和意义、国内外的研究现状、资料的来源、研究的思路和方法。主题部分包括三章：第一章，年画的起源、发展及新绛木版年画的概况。首先对年画的发展历程进行概述，然后分别从静态和动态的角度对新绛木版年画所处的生态环境及演变进行了阐述。第二章，新绛木版年画的民俗文化内容。本章对新绛木版年画的题材内容进行分类分析，并对每幅年画背后的内容、传说、张贴习俗、故事渊源、民俗活动等进行解读，从而深入的分析了新绛木版年画背后的民俗意义。第三章，新绛木版年画的民俗文化形式。本章分别对新绛木版年画的颜色、造型、刀法、谐音、吉祥寓意的运用和落款等方面对新绛木版年画形式上的民俗意蕴进行了深入的分析。结语部分对新绛木版年画的现状及以后的发展趋势进行了概括。从而对这种根植于民间，凝结了民间艺人智慧和创作结晶的中国传统民间年画，如何才能更好的传承下去，如何才能更好的适应现代社会进行了深思。

关键词：新绛木版年画民俗文化内涵表现手法内容形式

雄黄的微生物浸出及其浸出液的抑菌、药效作用研究

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雄黄的微生物浸出及其浸出液的抑菌、药效作用研究

作者：杜文静兰州大学

学位级别：硕士

雄黄(Realgar)是常用的矿物药,雄黄和含雄黄中成药有多种疗效,在中药中具有举足轻重的地位。但是雄黄常以未溶解状态的粗糙矿物原粉入药,造成用量大、毒性严重超标,常有使用雄黄造成不良反应者。因而雄黄和含雄黄中成药在国际市场上受... 详细信息

雄黄(Realgar)是常用的矿物药,雄黄和含雄黄中成药有多种疗效,在中药中具有举足轻重的地位。但是雄黄常以未溶解状态的粗糙矿物原粉入药,造成用量大、毒性严重超标,常有使用雄黄造成不良反应者。因而雄黄和含雄黄中成药在国际市场上受到了限制。基于上述原因,本文利用本实验室分离鉴定的一株高活性的氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans,简称At.f)对矿物药雄黄进行浸出处理,比较普通氧化亚铁硫杆菌和经耐砷驯化后的氧化亚铁硫杆菌对雄黄的浸出效果。研究雄黄微生物浸出液的体外、体内抑菌作用。测定雄黄微生物浸出液的急性毒性,并初步研究了雄黄微生物浸出液的药效。通过摇瓶实验用氧化亚铁硫杆菌及经驯化后耐砷的氧化亚铁硫杆菌在OK培养基中处理干研后过200目筛的雄黄粉末,并测定摇瓶实验过程中体系内可溶性砷含量变化,得到结论:普通的氧化亚铁硫杆菌的浸出作用时间短,但对于高浓度雄黄浸出效果差;而经耐砷驯化后的氧化亚铁硫杆菌反应速度较慢,但对于高浓度雄黄的浸出效果好,浸出率高。研究雄黄微生物浸出液和经传统水飞方法炮制后雄黄的体外抑菌效果,结果表明雄黄微生物浸出液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌粪肠杆菌、铜绿假单胞菌、耐药表皮葡萄球菌、非耐药表皮葡萄球菌九种细菌均有明显的抑制作用;而水飞法炮制后的雄黄无论其水悬液还是助悬液均无任何抑菌作用。测定雄黄微生物浸出液的LD,证明雄黄微生物浸出液具有一定毒性。在低于LD值剂量一半的浸出液浓度下测定其体内抑菌作用,研究表明雄黄微生物浸出液能够有效的抑制金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌在小鼠体内的繁殖,提高小鼠的存活率。促睡眠实验证明雄黄微生物浸出液具有显著的抑制中枢神经作用,能够明显延长小鼠在戊巴比妥那作用下的睡眠时间。耐高温和扭体实验证明雄黄微生物浸出液具有一定的镇痛作用。耳肿胀实验证明雄黄微生物浸出液具有较明显的抗炎作用。

关键词：雄黄生物浸出氧化亚铁硫杆菌抑菌镇痛抗炎中枢神经抑制

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臭氧冰的制备及其在鱿鱼保鲜中的应用

臭氧冰的制备及其在鱿鱼保鲜中的应用

作者：杜文静福建农林大学

学位级别：硕士

臭氧的广谱杀菌及无毒、无残留的特点使得它在食品工业中应用范围日益扩大。但是臭氧的不稳定性及制冰过程中臭氧大量损失为臭氧冰的制备带来极大的困难。目前，有关臭氧冰稳定性的相关报道甚少。因此，本文从臭氧冰的制备、稳定性及其... 详细信息

臭氧的广谱杀菌及无毒、无残留的特点使得它在食品工业中应用范围日益扩大。但是臭氧的不稳定性及制冰过程中臭氧大量损失为臭氧冰的制备带来极大的困难。目前，有关臭氧冰稳定性的相关报道甚少。因此，本文从臭氧冰的制备、稳定性及其对水产保鲜效果的影响等方面进行了研究。主要研究内容和成果如下： 1低温乙醇制备臭氧冰的研究采用超低温乙醇制备臭氧冰，探讨了不同冷冻介质、冷冻温度、酸度调节剂对臭氧保存率(冰中臭氧残留量/水中臭氧初始值)的影响。结果表明，与空气冷冻介质相比，采用低温乙醇制备臭氧冰能够极显著(p≤0.01)地提高臭氧保存率。比空白组比较，酸度调节剂能提高臭氧保存率，就效果而言，0.1mol/L磷酸效果最佳。以-30℃的乙醇为冷冻介质，以0.1mol/L磷酸作为酸度调节剂将臭氧水的pH调节到3，制备臭氧冰，冰中臭氧保存率可高达51%。 2冰中臭氧稳定性及降解动力学研究 (1)以-30℃的乙醇作为冷冻介质，分别用不同酸度剂将臭氧水的pH调到3，并置于3℃的贮藏环境下，定期取样测定冰中臭氧残存率(某时刻臭氧冰的浓度与臭氧冰初始浓度之比)，通过比较臭氧残存率随时间的变化情况，考察酸度调节剂对冰中臭氧稳定性的影响。结果表明，酸度调节剂对冰中臭氧稳定性的影响极显著(p≤0.01)，其中0.1mol/L磷酸的效果最佳，可极显著地(p≤0.01)提高冰中臭氧稳定性。 (2)用0.1mol/L磷酸将臭氧水的酸度调节到不同的pH，以-30℃乙醇作为冷冻介质，制备臭氧冰，并将臭氧冰置于3℃的贮藏环境下，定期取样测定冰中臭氧残存率(某时刻臭氧冰的浓度与臭氧冰初始浓度之比)，考察pH对冰中臭氧稳定性的影响。结果表明，在pH为3的范围内，臭氧冰中臭氧的降解速率与pH之间存在正相关，在3℃条件下，臭氧冰中臭氧的降解动力学方程为A(t)=exp[-(0.0236pH+0.0183)t](其中A(t)为t时刻的冰中臭氧残存率)。 (3)用0.1mol/L磷酸将臭氧水的pH调节到3,以-30℃乙醇作为冷冻介质，制备臭氧冰，并将臭氧冰置于不同温度的贮藏环境下，定期取样测定冰中臭氧残存率(某时刻臭氧冰的浓度与臭氧冰初始浓度之比)，考察温度对冰中臭氧稳定性的影响。结果表明，温度在00℃的范围内，臭氧冰中臭氧的降解速率与温度之间存在正相关，pH为3时臭氧冰的降解动力学方程为A(t)=exp[-(0.0085T+0.0706) t](其中A(t)为t时刻的冰中臭氧残存率)。3臭氧冰对鱿鱼保鲜效果的研究在2℃条件下，通过定期取样测定鱿鱼的pH、TVB-N、细菌菌落总数等指标以及对其进行感官评分，考察臭氧冰对鱿鱼的保鲜效果。结果表明，与对照组相比，用浓度为3.53mg/kg的臭氧冰保鲜鱿鱼，有效地控制了pH的回升，抑制了挥发性盐基氮的产生和细菌菌落总数的增加，有效地提高了鱿鱼的感官品质，可以延长货架期4天。

关键词：臭氧冰低温乙醇制备稳定性降解动力学保鲜

多体系统动力学约束Hamilton方程数值算法

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多体系统动力学约束Hamilton方程数值算法

作者：杜文静青岛大学

学位级别：硕士

国防科技的发展对多体系统动力学仿真提出了更高要求,需要设计高效稳定的算法来满足仿真需求。对复杂机械系统进行动力学仿真时,保持模型结构不变,往往可以设计出精度高、稳定性好的数值方法。本文首先根据Hamilton原理以及Legendre变换... 详细信息

国防科技的发展对多体系统动力学仿真提出了更高要求,需要设计高效稳定的算法来满足仿真需求。对复杂机械系统进行动力学仿真时,保持模型结构不变,往往可以设计出精度高、稳定性好的数值方法。本文首先根据Hamilton原理以及Legendre变换,构造多体系统动力学各指标约束Hamilton方程,结合梯形公式以及向后二阶差分格式构造TR-BDF2方法,证明该方法保持L-稳定性,并以空间双摆为例进行数值仿真实验验证。然后针对各指标约束Hamilton方程,选取等距节点、Legendre节点和Chebyshev节点构造单步块稳定以及多步块稳定格式,并通过双连杆系统以及曲柄滑块系统进行数值仿真验证,对比不同仿真时间、不同步长、不同指标以及不同节点处的实验结果,实验结果表明该方法计算精度高,稳定性好,能量误差以及位移与速度级误差都能有效得到保持。长时间仿真情况下,也能有效的保持系统能量误差,但是能量有耗散的趋势。最后针对指标-3约束Hamilton方程构造了高阶变分数值积分方法,其中变量采取Lagrange插值方法进行离散,采取Gauss方法进行数值积分,从而提高算法精度。通过双摆模型进行数值验证,结果表明该方法能使能量在有界范围内变化,位移约束得到有效保持。特别地,当仿真时间为1000s时,能量曲线仍然不会发生偏移,弥补了块稳定方法能量发生耗散的不足。

关键词：多体系统动力学约束Hamilton方程块稳定方法变分数值积分方法

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科学立法的逻辑

法学论坛 2017年第1期32卷 80-89页

作者：熊明辉杜文静中山大学逻辑与认知研究所广东广州510275 华东政法大学人文学院上海201620

在法律审判中,逻辑错误在所难免。导致逻辑错误的原因通常有三:一是法官对法条之误读;二是法条之不明晰性与不恰当性;三是法律体系之不一致性、不完备性和不可判定性。针对前一种原因,需要提供法官的基本素养,而针对后两种原因,则需要... 详细信息

在法律审判中,逻辑错误在所难免。导致逻辑错误的原因通常有三:一是法官对法条之误读;二是法条之不明晰性与不恰当性;三是法律体系之不一致性、不完备性和不可判定性。针对前一种原因,需要提供法官的基本素养,而针对后两种原因,则需要科学立法。正因如此,中共十八大报告把"科学立法"作为全面推进依法治国战略的一大方针。科学立法的必要条件之一就是逻辑立法,即立法要符合逻辑标准。科学立法的逻辑标准包括:法律词项之明晰性;法律命题之恰当性;法律体系之一致性、完备性和可判定性。

关键词：法律审判逻辑错误科学立法逻辑立法

不同倾斜角新型板式换热器特性及场协同原理分析

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中国石油大学学报（自然科学版） 2011年第6期35卷 144-147页

作者：郭春生杜文静王飞程林山东大学热科学研究中心山东济南250061

通过三维CFD数值模拟软件ANSYS-CFX模拟分析一种新型波纹板式换热器——复合人字形板式换热器,分析其倾斜角β为20°～70°的传热和阻力特性,并对不同倾斜角的复合人字形板片进行场协同理论分析。数值计算结果表明:在β=60°时复合人字... 详细信息

通过三维CFD数值模拟软件ANSYS-CFX模拟分析一种新型波纹板式换热器——复合人字形板式换热器,分析其倾斜角β为20°～70°的传热和阻力特性,并对不同倾斜角的复合人字形板片进行场协同理论分析。数值计算结果表明:在β=60°时复合人字形板式换热器比普通人字形板式换热器的摩擦阻力系数低8%左右,综合性能提高25%左右;β=20°时速度场、温度场和压力场协同最好。

关键词：板式换热器数值模拟传热阻力场协同原理

基督教锲入下的农村日常生活及意义世界的重构 ——基于陕西省秦庄塬区的调查与分析

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基督教锲入下的农村日常生活及意义世界的重构 ...

作者：杜文静西北大学

学位级别：硕士

改革开放后,基督教在我国农村地区迅速发展,这引起了社会各界的高度关注。学界对此进行了大量的研究,获得了丰硕的成果,但是,以往的研究大多集中于宏观的、单线式的分析,未能深入认识基督教给我国农村社会生活带来的复杂且多面的影响。... 详细信息

改革开放后,基督教在我国农村地区迅速发展,这引起了社会各界的高度关注。学界对此进行了大量的研究,获得了丰硕的成果,但是,以往的研究大多集中于宏观的、单线式的分析,未能深入认识基督教给我国农村社会生活带来的复杂且多面的影响。特别的,农村基督教研究的热潮出现在上世界90年代末至本世纪初,至此以后,关于“农村基督教”研究的方向和内容都鲜有变化。鉴于此,本文基于对陕西省秦庄地区的田野考察,研究基督教锲入下的农村社会生活的变化,在这里,秦庄地区作为一个个案——一个有着较长基督教发展历史的区域社会,它成为观测本研究主题的一个可靠对象。本文将从三个维度来探讨这一主题：基督教如何作用于农村社会的日常生活;基督教如何改变了农民的意义系统;基督教的进一步发展将会呈现何种趋势。这构成了本研究的三个主体内容。主体内容下设诸多议题,这些议题均依据调查得来的经验资料而设置,它们反映了农村社会的不同侧面。具体的,研究的内容和结构安排如下：第一章为绪论,概要叙述了本研究的导论、理论基础和文献回顾、研究方法、基本概念和研究说明及论文结构。第二章,概述了研究地点及其基督教发展的基本情况。第三章,研究了基督教如何嵌入到我国农村社会的日常生活并对其产生复杂而深刻影响。包括：个体基督徒和教友群体的日常生活实践、农村社会关系形态的变化、基督教与文化生活的互嵌、村庄公共空间和私密家庭空间的重组。它们构成了“日常生活”这一概念下的操作性分析维度。第四章,研究了基督教锲入下的农民意义系统的变化。首先,笔者探讨了基督教对于村庄本体性价值和社会性价值的培植与改造;其次,探讨了基督教与民俗及民间宗教的张力,并揭示出两种价值意识的不同关切以及不同宗教态度的显著差异;最后,指出了基督教对农民意义系统的作用也存在着一定程度的限度。第五章,着眼于秦庄的现实经验,讨论了农村基督教的发展趋势。第一节,考察了“世俗化”背景下的基督教发展的不同方向的发展趋势;第二节,记述了秦庄教会间及教会内部的矛盾和冲突,并分析了其对于基督教发展的深刻影响;第三节,追踪了那些已受过基督教影响的个体离开秦庄、进入到更广阔的外面世界的宗教际遇,研究其信仰发生了何种变化,以及这种变化对于农村基督教发展所具有的战略性意义。第六章是结语,基于对论文内容的回顾,笔者概略地展示了一个新的认识框架,它提供了与旧有的研究发现截然不同的思考。如果换一种视角,从操作技术而言,本研究是将基督教和诸如日常生活、社会关系、文化生活、村庄空间、意义系统、民俗和民间宗教等相关的关键变量都纳入到统一的分析框架下,进而“深描”这些变量的相关联系,并在此基础上,勾勒出基督教的锲入所致使的农村社会生活深刻变化的动态图景。秦庄基督教的发展还在继续,因此,为本课题做出一个确定性的结论显得尤为困难。但是有一点是毋庸置疑的,农村基督教的发展深深卷入到地方社会的政治、经济和文化系统中,它既改变了这个系统中的诸多面向,同时,也被已有的社会条件所框定,在此基础上,基督教与农村社会交互作用。本研究的目的正是要辨识这种复杂的作用形态,并阐释其中的含义。

关键词：基督教社会生活意义世界村庄政治文化生活民俗和民间宗教

一种Rhodococcus erythropolis CCM2595来源的腈水合酶的纯化包覆及催化性能研究

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一种Rhodococcus erythropolis CCM2595来源的腈水合酶的纯化包覆...

作者：杜文静大连理工大学

学位级别：硕士

腈水合酶(nitrile hydratase,英文简称NHase)是金属酶的一种,主要应用在催化含有碳氮三键有机官能团的氰基化合物所经过水合成反应生成的对应酰胺类物质。因为该腈水合酶的产物专一性高、常温加压下可操作、副产物少、减少污染等优势,... 详细信息

腈水合酶(nitrile hydratase,英文简称NHase)是金属酶的一种,主要应用在催化含有碳氮三键有机官能团的氰基化合物所经过水合成反应生成的对应酰胺类物质。因为该腈水合酶的产物专一性高、常温加压下可操作、副产物少、减少污染等优势,更适合目前绿色化学的发展方向。目前,生物催化技术已逐渐替代传统化学方法应用于化工工业领域、农业领域及医药领域等。但是,游离的腈水合酶在参与催化反应过程中以及其保存过程中存在着稳定性差,难以保存和容易失活等诸多缺陷。因此,探究腈水合酶的催化性能,并通过酶的固定化方式,制成固定化的腈水合酶(纳米生物催化剂)。这种方式既可以在使用方面解决游离酶存在的大部分问题,又可以实现工业上的连续生产,对我国具有很大的经济价值和可持续发展意义。本课题前期工作中发现了一种来源于Rhodococcus erythropolis CCM2595的腈水合酶(ReNHase),在本研究中进一步探究了该酶学性质及其纯化包覆后的催化性能,主要研究结果如下:(1)成功构建了用于纯化的带有组氨酸标签的ReNHase基因的质粒,并在重组大肠杆菌中进行异源表达,利用AKTA蛋白分离纯化仪纯化了ReNHase。(2)利用高效液相色谱法探究ReNHase的底物谱。发现该ReNHase对二腈类化合物(特别是己二腈)具有显著的催化活性和区域选择性。与全细胞催化相比,纯化的ReNHase对以上底物谱催化时间明显缩短,并显著提高了对单腈类化合物的转化率。(3)检测分析了ReNHase对己二腈的酶促反应动力学常数。ReNHase比酶活为63.107 U/mg,与全细胞催化相比提高了104倍。与己二腈反应的表观Km值为6.6252mmol/L,表明ReNHase与己二腈具有良好的亲和力。反应Kcat为82.77 s,Kcat/Km为1.249×10(mol*L*s),说明ReNHase对己二腈具有较高的转化率。同时检测了腈水合酶的最适反应温度为35℃,最适反应p H为7.4,并且发现在p H 5-9范围内,ReNHase依然可以保持70%以上的催化活性,说明ReNHase具有良好的酸碱稳定性。(4)制备沸石咪唑盐框架ZIF-67及ReNHase@ZIF-67生物催化剂。运用多种表征方法(扫描电子显微镜、热重分析等)对ZIF-67进行表征,实验结果表明ZIF-67成功合成。同时实验测得ZIF-67的孔径为3.49?,根据ReNHase的最大直径为2.65?,初步判断ReNHase@ZIF-67可以通过原位合成的方式进行合成。同时利用催化反应测定初步合成的ReNHase@ZIF-67的催化活性,实验结果表明,ReNHase@ZIF-67相对于纯化的ReNHase依然保持一定的催化活性,但是活性大幅度降低,推测原因有:(1)ReNHase是铁离子型金属酶,可能在纯化过程中金属活性中心与Ni-NTA树脂结合,造成部分酶活损失,(2)聚合物-ZIF杂化虽然可以增强酸性条件下ZIF稳定性,但是因为咪唑能与金属发生螯合,也会使酶部分失活。结论:实现了腈水合酶(来源于红球菌Rhodococcus erythropolis CCM2595)的异源表达。该ReNHase具有广泛的底物谱,可在常温中性条件下催化不同腈类化合物,相对于单腈类化合物,ReNHase对二腈(特别是己二腈)具有显著的转化率、底物亲和力和区域选择性,ReNHase与全细胞催化相比,底物谱催化时间明显缩短,并显著提高了对单腈类化合物的转化率。腈水合酶催化剂ReNHase@ZIF-67虽然活性有一定程度的降低,可能是由于(1)ReNHase是铁离子型金属酶,可能在纯化过程中金属活性中心与Ni-NTA树脂结合,造成部分酶活损失,(2)聚合物-ZIF杂化虽然可以增强酸性条件下ZIF稳定性,但是因为咪唑能与金属发生螯合,也会使酶部分失活。我们的实验结果希望为ReNHase的固定化提供一定的理论依据。

关键词： Rhodococcus erythropolis CCM2595 腈水合酶纯化己二腈 ReNHase@ZIF-67