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利用CRISPR/Cpf1技术编辑忍冬抗白粉病相关基因MLO的研究

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利用CRISPR/Cpf1技术编辑忍冬抗白粉病相关基因MLO的研究

作者：李小丽山东中医药大学

学位级别：硕士

目的:1.筛选出适宜的忍冬内源U6启动子,构建忍冬CRISPR/Cpf1基因编辑载体。2.分离、鉴定与忍冬白粉病发生密切相关的MLO基因,确定基因编辑位点。3.构建以忍冬U6启动子驱动LjMLO sgRNA的CRISPR/Cpf1基因编辑载体,通过农杆菌介导的遗传转... 详细信息

目的:1.筛选出适宜的忍冬内源U6启动子,构建忍冬CRISPR/Cpf1基因编辑载体。2.分离、鉴定与忍冬白粉病发生密切相关的MLO基因,确定基因编辑位点。3.构建以忍冬U6启动子驱动LjMLO sgRNA的CRISPR/Cpf1基因编辑载体,通过农杆菌介导的遗传转化获得抗白粉病的忍冬新种质。方法:1.以忍冬基因组DNA为模板,克隆并筛选出具有较高转录活性的忍冬U6启动子。2.基于忍冬全基因组测序数据,鉴定出MLO家族基因,并分析其理化性质、进化关系、保守结构域、组织特异性和白粉病菌诱导表达模式。3.利用在线工具(CRISPR RGEN Tools)设计目的基因的sgRNA并进行脱靶预测,利用获得的sgRNA设计、合成crRNA序列,构建基因编辑载体。4.利用农杆菌侵染法转化长势良好的无菌苗,诱导愈伤组织,检测抗性种质。结果:1.从忍冬基因组中克隆到4个U6启动子,并将U6启动子连接至携带β-葡萄糖苷酸酶(GUS)基因的pBI121载体,成功构建4个LjU6-pBI121融合表达载体,通过农杆菌瞬时转化法转化烟草叶片,筛选得到一个转录活性较高的忍冬U6启动子,命名为LjU6。2.基于忍冬基因组测序结果,对忍冬MLO相关基因进行了克隆和序列分析,得到25个MLO基因,分别命名为MLO1-MLO25,其中8个基因在叶中高表达,2个基因在茎中高表达,2个基因在花中高表达。接种白粉菌后,有4个基因显著上调表达,其中MLO14增加最多。3.通过酶切连接的方法改造了水稻的基因编辑载体,得到Fncpf1-LjU6 和 Lbcpf1-Lj U6 重组载体。以 MLO2、MLO3、MLO14、MLO15、MLO21为目标基因,建立了同时编辑5个MLO基因的CRISPR/Cpf1重组表达载体。4.通过农杆菌介导的遗传转化,获得了 Fncpf1-LjU6编辑的阳性愈伤组织4份,Lbcpf1-LjU6编辑的阳性愈伤组织6份,测序发现Fncpf1-LjU6编辑的L2 同时编辑了MLO2和MLO14基因,Lbcpf1-LjU6编辑的L3同时编辑了MLO2,MLO3,MLO14基因。结论:1.筛选得到了 1 个高转录活性的忍冬U6启动子。2.构建了2个忍冬专用的多基因编辑载体Fncpf1-LjU6和Lbcpf1-LjU6。3.确定了5个与抗白粉病相关的MLO家族基因MLO2、MLO3、MLO14、MLO15、MLO21。4.转化获得的阳性愈伤组织中检测到有多基因同时被编辑。

关键词：忍冬基因编辑 MLO基因白粉病

基层老年高血压患者的用药依从性调查及影响因素分析

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基层老年高血压患者的用药依从性调查及影响因素分析

作者：李小丽海南医学院

学位级别：硕士

目的了解基层管辖范围内建立高血压档案的老年患者的用药依从性现状,分析影响用药依从性的因素,为提高基层老年高血压患者的用药依从性提供借鉴资料。方法选取2011年1月1日至2020年12月31日在中原镇中心卫生院辖区范围内的建立高血压档... 详细信息

目的了解基层管辖范围内建立高血压档案的老年患者的用药依从性现状,分析影响用药依从性的因素,为提高基层老年高血压患者的用药依从性提供借鉴资料。方法选取2011年1月1日至2020年12月31日在中原镇中心卫生院辖区范围内的建立高血压档案的老年高血压患者为研究对象。通过上门访问,使用MMAS-8量表调查患者的用药依从性现状,收集患者的资料,包括性别、年龄、婚姻、居住情况、学历、医保类型、商业医疗保险(有或无)、经济状况(家庭年人均可支配收入)、病程、服药种数、药物不良反应(有或无)、了解高血压知识情况、并发症(有或无)等资料。将收集有效数据录入SPSS统计软件内,采用卡方检验进行单因素分析筛选,再进行多因素Logistic回归分析,以α=0.05为检验水准,P<0.05表明差异有统计学意义。结果本研究共收集有效问卷785份,用药依从性好者79例(占比10.06%),用药依从性中等者202例(占比25.73%),用药依从性差者有504例(占比68.79%)。根据MMAS-8量表得分分成中等-好组和差组,单因素分析结果表明,两组患者在年龄、婚姻、学历、家庭人均收入、高血压病程、服药种数、高血压知识、并发症的差异具有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,家庭人均收入、服药种数、高血压知识、并发症是用药依从性的独立影响因素(P<0.05)。结论基层老年高血压患者的用药依从性较差,影响因素较多,通过本研究显示独立影响因素有家庭人均收入、服药种数、高血压知识、并发症。建议可通过家庭社会支持、减轻患者经济负担、加强基层医疗队伍建设、优化治疗方案、加强健康宣教等措施提高基层老年高血压患者的用药依从性,为基层慢性病管理提供参考意见。

关键词：基层高血压用药依从性影响因素

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指向深度学习的初中物理单元教学设计研究

指向深度学习的初中物理单元教学设计研究

作者：李小丽华东师范大学

学位级别：硕士

随着新时代基础教育教学改革的深化和学科核心素养的提出,初中物理课堂教学迎来了新的挑战。新的物理课程理念更加注重学科的育人价值,同时对学生的整合建构能力、思辨能力和创新意识等提出了新的要求。众多学者的研究表明,通过深度学... 详细信息

随着新时代基础教育教学改革的深化和学科核心素养的提出,初中物理课堂教学迎来了新的挑战。新的物理课程理念更加注重学科的育人价值,同时对学生的整合建构能力、思辨能力和创新意识等提出了新的要求。众多学者的研究表明,通过深度学习能够更好地发展学生的物理课程核心素养,而单元教学则是促进深度学习发生的载体,由此本文结合实际教学需要,以单元备课为对象,对指向深度学习的初中物理单元教学设计进行研究。本文共分为七章。首先,通过文献的查阅和研究,分析国内外深度学习的研究现状;进而界定相关概念,梳理理论支撑。在此基础上,采取问卷调查法,对所任教学校学生进行物理深度学习情况的调查和结果分析,找出了现状不乐观的原因。接下来,基于理论和学情实际,针对单元教学,进行指向深度学习的初中物理教学设计的研究,并形成依托初中学段通盘考虑、挖掘单元核心价值的单元教学设计流程;并以《浮力》单元教学设计为案例,进行分析。最后,采用准实验研究法进行一学期的教学实践,也就是对照班采用常规教学,实验班采用指向深度学习的初中物理单元教学设计进行教学,通过分析学期末学生思维导图达成度、成绩和开展访谈,对教学效果进行评价。通过研究,本文主要得到以下三个结论:1.以单元为整体进行的教学设计,教学内容系统性强,单元内部联系紧密,学习活动衔接有效,有助于学生对核心概念的深入理解,促进高阶思维能力的提升。2.与教学目标和评价方案高度一致的学习活动,更容易实现教学的目标,尤其是具有一定挑战的实践活动的设计,能够促进学生综合能力的的发展。3.指向深度学习的初中物理单元教学设计能够提高学生的学习质量和知识迁移应用的能力,尤其对优秀生和中等生的效果更佳显著。

关键词：深度学习单元教学设计核心素养初中物理

巩固脱贫攻坚成果同乡村振兴有效衔接研究 ——以山西省忻州市静乐县为例

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巩固脱贫攻坚成果同乡村振兴有效衔接研究 ...

作者：李小丽辽宁大学

学位级别：硕士

Multiwavelength visible laser based on the stimulated Raman scattering effect and beta barium borate angle tuning

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Chinese Optics Letters 2016年第2期14卷 47-50页

作者：李小丽 Institute of Laser Engineering Beijing University of Technology

We demonstrate wavelength-selectable visible emissions from a miniature crystalline laser that combines the stimulated Raman scattering （SRS） effect in an Nd：YVO4 crystal with intracavity frequency mixing in an angle-tuned beta barium borate （BBO） crystal. The presented laser is operating on demand at any one of three wavelengths in the green-yellow spectral region. Up to 600, 560, and 200 mW output powers at 559, 532, and 588 nm, respectively, are obtained from the continuous wave （CW） laser having a 18 mm long resonator and a 3.8 W laser diode end pumping. The pump threshold for each visible wavelength is less than 0.4 W.

关键词： Barium Barium compounds Pumping (laser)

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刍议新旧教材对比视域下的高中语文教学

刍议新旧教材对比视域下的高中语文教学

对接京津——扩展思维基础教育

作者：李小丽江西省临川市临川一中实验学校

随着新一轮高中新课标的不断深化,高中语文统编新教材也逐渐被广大老师所采用。因此,在高中语文教学中,如何准确地把握新旧教材的差异,使其在语文教学中发挥出更大的作用,就成为了广大教师努力实现的重要任务。而新旧教材的变化会导致... 详细信息

随着新一轮高中新课标的不断深化,高中语文统编新教材也逐渐被广大老师所采用。因此,在高中语文教学中,如何准确地把握新旧教材的差异,使其在语文教学中发挥出更大的作用,就成为了广大教师努力实现的重要任务。而新旧教材的变化会导致高中语文教学环节出现巨大的改变,教师的教学观念和教学方法也要进行有效的革新。因此,对比和研究高中语文新旧教材的变化,并且利用变化进行有效的教学就十分重要。

关键词：高中语文新旧教材对比教学策略

来源： cnki会议评论

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高中英语“以读促写”教学实践探析

高中英语“以读促写”教学实践探析

技术多元化、发明者网络嵌入与军民融合企业技术创新效率

对接京津——社会形态基础教育

作者：李小丽深圳市华一实验学校

现代高中英语阅读和写作教学中,教师不仅要培养学生的阅读能力,帮助学生在阅读中获得知识,还要培养学生的写作能力,让英语知识能更好地以文本形式输出。因此,在当前的高中英语教学中,教师要不断地探索阅读和写作之间的关系,利用"以读促... 详细信息

现代高中英语阅读和写作教学中,教师不仅要培养学生的阅读能力,帮助学生在阅读中获得知识,还要培养学生的写作能力,让英语知识能更好地以文本形式输出。因此,在当前的高中英语教学中,教师要不断地探索阅读和写作之间的关系,利用"以读促写,读写整合"的形式,真正地发展学生的英语学习素养,提升学生英语核心价值能力,以促进学生的长足发展。在此期间,高中英语教师要下足功夫,下狠功夫,真正地探究适合学生的英语读写学习策略,切实提升他们的学习能力和语言运用能力,为他们今后的学习和发展奠定基础。

关键词：高中英语 "以读促写" 教学实践

来源： cnki会议评论

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科技进步与对策 2022年第23期39卷 140-150页

作者：李小丽陈蕾武汉纺织大学管理学院湖北武汉430073

采用随机前沿模型对2015—2020年中国内地107家军民融合企业技术创新效率进行测算,并基于军民融合企业专利数据构建技术多元化、发明者网络嵌入(结构洞和网络密度)等指标。运用社会网络分析与多元线性回归方法,实证分析技术多元化、发... 详细信息

采用随机前沿模型对2015—2020年中国内地107家军民融合企业技术创新效率进行测算,并基于军民融合企业专利数据构建技术多元化、发明者网络嵌入(结构洞和网络密度)等指标。运用社会网络分析与多元线性回归方法,实证分析技术多元化、发明者网络嵌入及两者交互作用、结构洞与网络密度的互补关系/平衡关系对军民融合企业技术创新效率的影响。结果发现:技术多元化、结构洞及两者交互作用对军民融合企业技术创新效率具有正向影响;网络密度及其与技术多元化的交互作用对军民融合企业技术创新效率具有负向影响;网络密度和结构洞的互补关系会抑制军民融合企业技术创新效率提升,但两者在军民融合企业内部的平衡关系能够促进军民融合企业技术创新效率提升。

关键词：技术多元化结构洞网络密度技术创新效率军民融合企业

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镍基化合物析氧催化电极的研究进展

电镀与精饰 2022年第10期44卷 74-79页

作者：李小丽李朋喜河北工程大学材料科学与工程学院河北邯郸056000 中国船舶集团有限公司第七一八研究所河北邯郸056000

氢能是一种清洁、高效、安全的可持续的绿色能源。电解水制氢将成为未来氢能源的核心技术,具有很大的应用发展前景。析氧催化电极作为电解水制氢的关键材料,是影响其研究发展的重要因素之一。镍基化合物作为析氧催化电极,具有资源丰富... 详细信息

氢能是一种清洁、高效、安全的可持续的绿色能源。电解水制氢将成为未来氢能源的核心技术,具有很大的应用发展前景。析氧催化电极作为电解水制氢的关键材料,是影响其研究发展的重要因素之一。镍基化合物作为析氧催化电极,具有资源丰富、价格低廉、析氧过电位低的特性,在碱性电解水中有着极大的应用研究价值。本文对镍基化合物析氧催化电极的研究现状进行了综述,并指出了析氧电极的研究发展方向。

关键词：镍基化合物析氧电极碱性水电解析氧过电位