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甘草SQS1基因多态性及其对产物积累的影响研究

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甘草SQS1基因多态性及其对产物积累的影响研究

作者：呙未北京中医药大学

学位级别：硕士

甘草为常用大宗药材,其有效成分甘草酸(glycyrrhizie acid, GA)具有重要的药理学活性。但甘草酸含量不稳定,个体间差异较大的原因尚不清楚。本研究试图从甘草酸形成的基因机制来阐明甘草酸含量差异的原因。众多研究证明,由于基因的突变... 详细信息

甘草为常用大宗药材,其有效成分甘草酸(glycyrrhizie acid, GA)具有重要的药理学活性。但甘草酸含量不稳定,个体间差异较大的原因尚不清楚。本研究试图从甘草酸形成的基因机制来阐明甘草酸含量差异的原因。众多研究证明,由于基因的突变,导致氨基酸序列的变化,进一步引起酶活性发生变化,从而使得目标产物积累发生改变,因此可以从甘草酸合成过程中关键酶基因多态性的角度,探明甘草酸含量存在差异的内在基因因素。甘草酸是经甲羟戊酸途径合成的次生代谢产物,其合成途径中鲨烯合酶(squalene synthase, SQS)和β-香树脂醇合酶(β-amyrin synthase,βAS)起着的重要作用,催化形成p-香树脂醇,进一步氧化即可形成甘草酸。因此本研究将以上述两个关键酶作为对象,考察其对合成途径的影响。其次,一个天然产物的生物合成途径,常常涉及15-20个酶,形成了一个代谢网络,而上下游的酶具有复杂的调控与反馈机制。现阶段大量关于生物工程的研究,都是通过构建一个完整的代谢途径来获得大量的目的产物,这过程中必定会涉及到多基因共表达,因此多基因共表达已成为研究的热点。而本研究则期望通过共表达上述两个基因,获得更多的p-香树脂醇。因此,本课题拟采用同样条件下生长的人工栽培甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch),在系统分析功能基因序列和甘草酸含量关系的基础上,筛选出具有多态性的基因型,同时构建2个基因共表达的工程菌。研究基因多态性对产物积累的影响,验证多基因共表达增多产物的合成。为后续的甘草人工分子育种以及发酵技术大量生产甘草酸奠定基础。本课题主要结论如下：1.甘草植株在同一生长环境下甘草酸也存在显著差异,甘草酸含量从0.9087%到4.9164%不等。2.甘草SQS1基因存在多态性,具有至少3种基因型。但通过聚类分析,发现该多态性与甘草酸含量无直接关系。这可能是由于甘草酸高低是由多个酶共同调控的,单个酶的作用有限,因此需研究整个代谢途径的多个酶共同作用机制。***1基因多态性对sQ,βA的积累都产生影响。通过将具有态性的SQS1基因分别导入酵母细胞中表达后发现不同基因型的SQS对鲨烯和下游的p As的基因产物-β香树脂醇存在影响。鲨烯的净增量分别是-0.0009mg/ml (-1.8%),0.0043mg/ml(8.6%),0.004mg/ml(8.0%);β香树脂醇的净增量分别是0,0.0025 (50%),0.0007 mg/ml (14%).由此可见优良的SQS1基因型对下游的β香树脂醇含量产生较大的影响,SQ的积累有助于βA的合成。4.基因共表达能够增强产物的合成。优良基因组合影响下游基因的催化产物含量,特别是将SQSl,βAS两个基因共表达后生成βA最高的bSd2P菌株是只导入了bP菌株的1.5倍,也是最低的bSd1P菌株的1.5倍。说明优良基因共表达能够获得更多的目的产物。5.甘草SQS1基因存在选择性剪切体,但是该现象对于甘草酸的影响及作用机制均待于进一步的研究。

关键词：甘草基因多态性基因共表达鲨烯合酶选择性剪切

IGF-1在糖尿病大鼠血清和肾脏组织的变化及意义

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IGF-1在糖尿病大鼠血清和肾脏组织的变化及意义

作者：呙劲松南华大学

学位级别：硕士

目的:观察链脲菌素(STZ)糖尿病大鼠血清和肾脏组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的动态变化,探讨其与糖尿病肾病(DN)发生发展的关系。同时观察胰岛素治疗对糖尿病大鼠血清、肾脏组织IGF-1的变化以及肾脏病理改变的影响。方法:选用雄性Spr... 详细信息

目的:观察链脲菌素(STZ)糖尿病大鼠血清和肾脏组织中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的动态变化,探讨其与糖尿病肾病(DN)发生发展的关系。同时观察胰岛素治疗对糖尿病大鼠血清、肾脏组织IGF-1的变化以及肾脏病理改变的影响。方法:选用雄性Sprague Dawley(SD)大鼠70只,随机分为对照组(n=18)和造模组(n=52)。造模组使用链脲菌素(STZ)60mg/kg腹腔注射,72小时后测空腹血糖(FBG)≥16.7mmol/L者确定为糖尿病大鼠(其中4只造模未成功)。造模成功的大鼠随机分为糖尿病组(n=24)、糖尿病治疗组(n=24)。各组再随机分为4、8、12周组。治疗组给予长效胰岛素3u/(100g·d)皮下注射,糖尿病组和对照组给予0.2ml生理盐水皮下注射。分别于第4周、8周、12周末收集各组大鼠24小时尿液测量尿微量白蛋白,测量FBG以及体重,然后处死大鼠,取血和肾脏,测量肾重,并计算肾重/体重比值。用放射免疫法测定血清IGF-1含量,肾脏固定后石蜡包埋、切片,HE染色后用光镜观察肾组织形态学改变,并采用免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中IGF-1的表达。结果:1、糖尿病组大鼠第4周末、8周末、12周末FBG、24小时尿微量白蛋白、肾重/体重明显高于对照组和治疗组(p<0.01);2、血清IGF-1与对照组和治疗组比较显著下降(p<0.01),且糖尿病组4、8、12周组内比较差异均有统计学意义(p<0.05);3、糖尿病组肾脏IGF-1积分光密度值(IOD)在第4、8周末较对照组和治疗组明显升高(p<0.01),但随着病程的延长,肾脏IGF-1在第8周末有下降趋势,到第12周末肾脏IGF-1与对照组和治疗组比较无统计学意义。结论:1、STZ诱导的糖尿病大鼠血清IGF-1的下降及肾脏IGF-1早期的增高与糖尿病早期肾脏病变的发生有关。2、胰岛素治疗显著改善了STZ诱导的糖尿病大鼠血清和肾脏IGF-1的异常以及早期的肾脏病变。

关键词：糖尿病肾病胰岛素样生长因子糖尿病大鼠

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神农架金丝猴源肠道益生菌的筛选和鉴定

神农架金丝猴源肠道益生菌的筛选和鉴定

作者：呙会会华中农业大学

学位级别：硕士

川金丝猴(Rhinopithecus roxellanae)是中国特有的珍稀物种,我国I级保护动物,湖北省神农架地区是川金丝猴生活的的最东端。由于消化道疾病是金丝猴常发疾病之一,且消化道疾病是导致幼猴死亡的主要原因,因此,维持金丝猴肠道微生态平衡,... 详细信息

川金丝猴(Rhinopithecus roxellanae)是中国特有的珍稀物种,我国I级保护动物,湖北省神农架地区是川金丝猴生活的的最东端。由于消化道疾病是金丝猴常发疾病之一,且消化道疾病是导致幼猴死亡的主要原因,因此,维持金丝猴肠道微生态平衡,减少金丝猴消化道疾病的发生,对金丝猴个体健康和种群复壮具有重要意义。本研究以神农架金丝猴为研究对象,通过采集野生金丝猴的粪便300份,MRS培养基共分离到92株兼性乳酸菌,92株菌发酵液上清对病原指示菌均有抑菌活性,但各菌株之间抑菌差异性较大。其中抑菌效果最明显的是dlt6a、dlt6b、dlt6c、dlt7a、 dlt7b、dlt9、dltl0a和dlt10b共8株菌。对该8株菌进行属、种的鉴定,鉴定结果表明分离的8株菌均为粪肠球菌。16S rRNA基因序列扩增测序,肠球菌种特异性片段ddlE、faecalis、ddlE、faecium扩增检测,进一步确证8株分离细菌为粪肠球菌。对分离的粪肠球菌进行安全性评价,包括抗生素耐药性检测和毒力因子检测,减少菌株存在的潜在危险性。毒力因子的检测方式为PCR扩增cylA、esp、gelE、agg、 efaAfs、ace、efaAfm等基因片段,PCR扩增检测结果为：dlt6a为agg+esp+efaAfs+;dlt6b有agg+esp+efaAfs+;dlt6c为agg+esp+efaAfs+;dlt7a为esp+efaAfs+;dlt7b为esp+efaAfs+;dlt9为agg+cylA+esp+efaAfs+;dlt10a为agg+cylA+efaAfs+;dlt10b为agg+esp+efaAfs+。综合抑菌试验和毒力因子分析,选择***7b和dlt10a为后续试验菌株。抗生素抗性检测结果证明：dlt7a、dlt7b、和dlt10a对氨苄西林、红霉素、万古霉素、环丙沙星、呋喃妥因、壮观霉素、诺氟沙星、强力霉素、氯霉素和庆大霉素敏感;而对青霉素、四环素表现耐药,与肠球菌固有耐药的类型相符。动物急性毒性试验从体态特征观察、细菌易位、脏器指数和脏器组织形态学方面考察分离菌株对动物机体的安全性,结果表明粪肠球菌dlt7a和dlt7b是安全的菌株,dlt10a存在潜在危险性。为筛选能够成为机体肠道优势菌群的菌株,本试验从菌株生长速度、耐受能力(肠道胆盐高渗透压、胃酸低pH值等)以及耐高温能力等方面评价分离的菌株。结果表明,两株粪肠球菌(dlt7a和dlt7b)具有以下特点：(1)能耐受pH2.5的酸性环境保持活菌数基本不变;(2)能耐受0.5%胆盐浓度;(3)繁殖能力强,无迟缓期,1‰接种量4h后进入对数生长期,9h后进入稳定期;(4)可耐受一定的高温。实验结果表明,两株粪肠球菌能顺利通过胃肠道。本实验从安全性、抗逆性、生长特性及对动物的安全性等方面进行筛选和鉴定,筛选出两株抑菌效果较好,对机体毒性较小,并且能顺利通过胃肠道的益生肠球菌,为后期生产应用提供了坚实的物质基础。

关键词：益生菌肠球菌筛选安全性有效性

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血胰岛素水平与甲状腺乳头状癌的相关性研究

血胰岛素水平与甲状腺乳头状癌的相关性研究

作者：呙晓燕大连医科大学

学位级别：硕士

目的:比较甲状腺乳头状癌与良性甲状腺结节的临床及代谢相关组分的差异,并进一步探讨血胰岛素水平或胰岛素抵抗是否与甲状腺乳头状癌发病相关。方法:本研究收集了2016年3月至2016年8月于大连医科大学附属第二医院甲状腺外科住院行甲状... 详细信息

目的:比较甲状腺乳头状癌与良性甲状腺结节的临床及代谢相关组分的差异,并进一步探讨血胰岛素水平或胰岛素抵抗是否与甲状腺乳头状癌发病相关。方法:本研究收集了2016年3月至2016年8月于大连医科大学附属第二医院甲状腺外科住院行甲状腺结节切除术的258例患者的临床相关资料及空腹血清样本,根据术后病理结果分为甲状腺乳头状癌组和良性甲状腺结节组,其中甲状腺乳头状癌组153例,良性甲状腺结节组105例。测量并记录患者的性别、年龄、身高、体重、空腹血糖、空腹胰岛素、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、低密度脂蛋白胆固醇(LDC-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇、甘油三酯、血尿酸和高血压病史,计算体重指数(BMI)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。比较甲状腺乳头状癌组和良性甲状腺结节组上述指标的差异,应用多因素logistic回归分析进一步筛选甲状腺乳头状癌的危险因素。结果:1.258例甲状腺结节患者,术后病理结果提示:良性甲状腺结节组105例,占40.7%,其中女性80例,占76.2%,男性25例,占23.8%;甲状腺乳头状癌组153例,占59.3%,其中女性116例,占75.8%,男性37例,占24.2%。良性甲状腺结节组平均年龄(48.42±11.85)岁,甲状腺乳头状癌组平均年龄(45.67±11.61)岁,性别和年龄在两组间的差异均无统计学意义(P>0.05)。2.良性甲状腺结节组中,合并高血压病13例,占12.4%;甲状腺乳头状癌组中,合并高血压病26例,占17.0%,两组间比较高血压病史,差异无统计学意义(P>0.05)。3.良性甲状腺结节组空腹胰岛素水平为(7.82±5.88)u U/ml,甲状腺乳头状癌组空腹胰岛素水平为(10.00±8.14)u U/ml,甲状腺乳头状癌组的空腹胰岛素的水平明显高于良性甲状腺结节(P0.05)。7.多因素logistic回归分析结果显示甲状腺乳头状癌与空腹胰岛素和TPO-Ab呈正相关(P<0.05)。结论:1.甲状腺乳头状癌组的空腹胰岛素、HOMA-IR、TPOAb、血尿酸水平明显高于甲状腺良性结节组,两组间差异有统计学意义。2.良性甲状腺结节组与甲状腺乳头状癌组比较年龄、性别、高血压病史、空腹血糖、BMI、TSH、FT3、FT4、TGAb、LDL-C、HDL-C、总胆固醇和甘油三酯,差异无统计学意义。3.高胰岛素血症和高水平的TPOAb是甲状腺乳头状癌的危险因素。合并2型糖尿病、代谢综合征或桥本甲状腺炎的甲状腺结节患者需密切随访。

关键词：甲状腺乳头状癌良性甲状腺结节胰岛素水平甲状腺过氧化物酶抗体胰岛素抵抗

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B银行员工敬业度问题研究

B银行员工敬业度问题研究

作者：呙佳广西大学

学位级别：硕士

高效、敬业的员工队伍一直以来都被服务型企业视为自身的核心竞争力之一。作为金融服务企业的商业银行也不例外,随着金融改革的不断深化,在可以预见的未来,商业银行必定将面临着越来越重的竞争压力。如何在激烈的竞争中保持自身人才队... 详细信息

高效、敬业的员工队伍一直以来都被服务型企业视为自身的核心竞争力之一。作为金融服务企业的商业银行也不例外,随着金融改革的不断深化,在可以预见的未来,商业银行必定将面临着越来越重的竞争压力。如何在激烈的竞争中保持自身人才队伍的稳定、敬业的为银行服务,是银行经营者不容忽视的问题。B银行是在区域内具有一定影响力的城市商业银行,在未来发展中,如何提升员工的敬业水平,需要重点关注。本文首先归纳、整理了国内外有关于员工敬业度问题的具有代表性的主要研究成果。列举了员工敬业度概念与维度、测量方法等。随后,结合B银行的实际情况,提出由3S模型对其员工敬业度进行测量。在成熟的商业问卷的基础上,结合调查单位实际情况,对员工敬业度影响因素进行了重新分类,编制了适合本文使用的调查问卷,并在B银行内部进行了问卷调查。对于调查结果,使用SPSS等软件对数据进行了信度分析、描述分析、相关分析等。结合员工访谈结果,找出了B银行在员工敬业度影响因素及存在的问题。通过分析,本文发现B银行员工敬业度处于中等水平,存在提升空间。找出了B银行员工敬业度影响因素,发现B银行在在职教育和培训、薪酬管理等方面存在问题。最后,针对影响因素和问题,提出了加强员工在职教育和职业生涯管理,提高员工工作满意度,建立合理薪酬机制,优化管理方式、营造和谐企业文化等员工敬业度提升策略。

关键词：商业银行敬业度影响因素

一体式A/O反应器中不同碳硫比对除碳脱臭效率的影响

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环境工程学报 2013年第7期7卷 2629-2634页

作者：姜丹妮吴忆宁辽宁大学环境学院沈阳110000 萍乡高等专科学校材料与化学工程系萍乡370000 哈尔滨工业大学城市水资源与水环境国家重点实验室哈尔滨150090

在污水处理领域同步除碳脱臭研究一直是个难题,本实验开发了一种新型同步除碳脱臭一体式A/O反应器,研究了该一体式A/O反应器处理不同碳硫比有机废水时的同步除碳脱臭功能。结果表明,碳硫比为30∶1时,即进水SO24-浓度为133 mg/L,该反应器... 详细信息

在污水处理领域同步除碳脱臭研究一直是个难题,本实验开发了一种新型同步除碳脱臭一体式A/O反应器,研究了该一体式A/O反应器处理不同碳硫比有机废水时的同步除碳脱臭功能。结果表明,碳硫比为30∶1时,即进水SO24-浓度为133 mg/L,该反应器总COD去除率可达到95%。在进水SO24-浓度不大于400 mg/L时,中间产物臭气硫化氢气可以完全去除,实现了同步除碳脱臭的功能,减少了在有机废水处理过程中的大量臭气的排放。微生物学角度分析,表明污泥中含有大量的硫细菌。

关键词：一体式A O反应器同步除碳脱臭碳硫比研究

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控股股东增持的市场效应及影响因素研究

控股股东增持的市场效应及影响因素研究

作者：呙竹重庆大学

学位级别：硕士

上市公司大股东行为一直是学者研究的焦点。在国内研究中，学者集中于关联交易等行为对中小投资者的利益侵害，而关注大股东二级市场交易行为较少。2008、2011年，A股市场步入大级别的熊市调整，市场基本功能受到强烈挑战、投资者信心... 详细信息

上市公司大股东行为一直是学者研究的焦点。在国内研究中，学者集中于关联交易等行为对中小投资者的利益侵害，而关注大股东二级市场交易行为较少。2008、2011年，A股市场步入大级别的熊市调整，市场基本功能受到强烈挑战、投资者信心也随之跌入谷底。这两个时段中，政府相关部门都采取了积极措施，先后共有300多家上市公司的控股股东和高管短时间、密集发布增持公告。由于两次增持事件发生的特殊性、A股上市公司特殊的股权结构和事件本身给市场带来的积极意义，使控股股东增持的研究具有特殊意义。本文首先介绍这两次事件的背景及相关政策。在文献综述和相关理论中，介绍了国外关于内部人交易及市场收益的相关研究;并在回购相关研究的框架下，分析了增持效应的信号理论，还从价值低估、现金流假说来分析了影响控股股东增持行为的因素。在实证研究中，我们对2008年8月“六十三条”修改颁布到2012年2月初之间选取221家被控股股东增持的上市公司进行研究，利用事件研究法发现在增持公告的短期时间窗内表现出正的异常收益，三日公告效应之和是2.41%。增持公告前，样本公司的累积异常收益为负，而在事件发生之后，公司股票的平均累积异常收益很快变为正，并且有很强的持续性。同时，为了研究控股股东的性质对公告公司异常收益的影响，我们以最终控制人性质把公司分为国有和非国有公司;发现在公告窗内，国有上市公司的累积异常收益要远远大于非国有上市公司，但出乎我们预料的是在（-20,20）窗口期中非国有上市公司的平均异常累积收益率是为负的。在研究增持事件公告效应的影响因素时，我们发现公司股价的短期异常收益和低估值、盈利水平等没有明显的关系，但和控股股东的增持量、控股股东的性质呈正相关关系、和股价增持前期的累积异常收益呈反向关系。上述研究表明，这两次增持潮中，市场可能更加关心增持事件本身的影响，而不是公司的基本财务情况。最后我们利用现金流假说和价值低估假说的理论，运用财务指标数据进行实证分析影响股东增持的因素，发现控股股东增持可能是大股东在一定政治目的下，并考虑公司自身的一些财务情况采取的行动。控股股东增持的市场反应和行为研究为新兴市场中大股东研究提供了新的证据。同时，对投资者、管理层和控股股东自身运作也是一种有益的参考。

关键词：控股股东增持事件研究法股东性质政治目的财务情况

移动透明计算中智能终端多操作系统启动及其性能分析优化

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移动透明计算中智能终端多操作系统启动及其性能分析优化

作者：呙邵明中南大学

学位级别：硕士

网络泛在化和计算普适化促进了移动互联网的迅猛发展,用户可以通过智能终端随时随地地访问移动互联网,获取服务。智能终端的丰富性和日益完善的功能、应用程序满足了用户不同时间和空间的需求。用户在智能终端上存储大量的资源、个人数... 详细信息

网络泛在化和计算普适化促进了移动互联网的迅猛发展,用户可以通过智能终端随时随地地访问移动互联网,获取服务。智能终端的丰富性和日益完善的功能、应用程序满足了用户不同时间和空间的需求。用户在智能终端上存储大量的资源、个人数据,安装各式各样的应用程序,导致用户对于智能终端的存储能力和计算能力要求越来越高。本文设计了一种移动透明计算中智能终端多操作系统启动方案。通过在用户使用的智能终端上预置轻量级的操作系统引导程序和元操作系统来完成多操作系统的启动。智能终端加电初始化后,加载预置的操作系统引导程序和元操作系统,元操作系统完成无线网络的配置。无线网络配置完成后,用户选择操作系统,智能移动终端通过无线网络从透明服务器上下载相应系统的U-boot、改造后的操作系统内核镜像文件uImage和临时的根文件系统uInitrd:下载完成后终端执行下载的引导程序,然后加载改造后的uImage和uInitrd,uInitrd执行阶段完成操作系统无线网络的配置,通过网络文件系统协议NFS协议挂载透明服务器上实际的文件系统,完成系统的启动。本文在PandaBoard ES开发板上实现了Android系统和Ubuntu系统的启动。此外,为了加速系统启动时间,提升资源调度的效率,本文对移动透明计算中的NFS协议进行了分析。本文中所使用的NFS协议版本为v3。首先本文测试了使用不同的读写块大小和传输协议时NFS协议的性能,实验结果表明,在NFSv3版本支持最大的块大小内,数据块越大,NFS协议的吞吐率越高,NFS协议的读速度也远远高于写速度。然后,本文使用多个移动终端同时挂载NFS文件系统以监测无线带宽对于NFS协议的影响。基于网络文件系统的移动透明手机系统使得用户可以随时随地通过不同的智能移动终端加载属于自己的同一个操作系统;系统的文件系统存储在服务器上,用户可以存储大量的数据,安装大量的应用程序而无需担心存储空间和个人隐私问题;系统切换更为方便,只要服务器上提供不同操作系统的内核镜像文件uImage和文件系统uInitrd,用户可以随时更换启动不同的操作系统,方便了用户手机系统的维护和管理。图16幅,表11个,参考文献60篇。

关键词：移动透明计算智能终端多操作系统启动 NFS协议

近代山东红十字运动研究，（1904-1949）

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近代山东红十字运动研究，（1904-1949）

作者：呙盼盼苏州大学

学位级别：硕士

近代山东兵燹连绵，自然灾害频仍，社会动荡不安。针对难民、灾民问题突出的现实，山东各地红十字分会本博爱襟怀，自觉承担起部分慈善救济的责任，为弱势群体带来了人道关怀。本文首先对红十字运动在山东兴起的社会历史背景进行梳... 详细信息

近代山东兵燹连绵，自然灾害频仍，社会动荡不安。针对难民、灾民问题突出的现实，山东各地红十字分会本博爱襟怀，自觉承担起部分慈善救济的责任，为弱势群体带来了人道关怀。本文首先对红十字运动在山东兴起的社会历史背景进行梳理，以此为依托，分晚清时期、民国前期、抗战时期、解放战争时期等四个时期，分别论述了不同时期山东各地分会的组织演变以及在战地救护、灾害救援、医疗服务、社会救济等方面所做出的贡献。并以青岛分会、莒县分会为个案，具体呈现红十字分会在救援中所发挥的独特作用。同时，在详细论述四个阶段发展情况的基础上，适当与江苏红十字运动进行比较，总结出山东红十字运动发展的特点及其社会功能，旨为慈善事业的当代发展与和谐社会建设提供历史借鉴。

关键词：山东红十字分会战地救护灾害救助社会服务