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恙螨染色体分带的初步研究

昆虫学报 1992年第2期35卷 165-170页

作者：叶韵斌王敦清福建医学院寄生虫学教研室

本文报道应用胰酶法对微红纤恙螨Leptotrombidium rubellum,苍白纤恙螨L.pallidum和小板纤恙满L.scutellarc进行G带带型分析。三种恙螨染色体分别显示17、21、19条深带带纹,用CS-190机对每条显带的染色体进行薄层扫描,结果每一条深带显... 详细信息

本文报道应用胰酶法对微红纤恙螨Leptotrombidium rubellum,苍白纤恙螨L.pallidum和小板纤恙满L.scutellarc进行G带带型分析。三种恙螨染色体分别显示17、21、19条深带带纹,用CS-190机对每条显带的染色体进行薄层扫描,结果每一条深带显示一个峰,对微红纤螨和巨螯齿恙螨Odontaearus majestivus进行BSG法的C显带实验,均未见到带纹,从C带结果及对敬红纤慧螨染色体扫描电镜的初步观察结果,提示恙螨染色体可能为泛着丝粒类型,本文根据恙螨染色体的分带情况,探讨了几种恙螨间的亲缘关系以及恙螨染色体的研究在分类上的意义。

关键词： C带 G带恙螨染色体

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TCR-T治疗中靶点选择的策略

中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2022年第4期12卷 250-256页

作者：吴素馨叶韵斌福建医科大学基础医学院福州350014 福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室福州350014 福建省肿瘤转化医学重点实验室福州350014

T细胞受体工程化T细胞(TCR-T)治疗是目前肿瘤免疫细胞过继治疗研究领域的热点之一,近年,TCR-T治疗取得了突破性进展,在肿瘤免疫治疗中发挥越来越重要的作用。本文将综述目前TCR-T基础研究和临床应用方面的进展,分析不同类型肿瘤抗原对TC... 详细信息

T细胞受体工程化T细胞(TCR-T)治疗是目前肿瘤免疫细胞过继治疗研究领域的热点之一,近年,TCR-T治疗取得了突破性进展,在肿瘤免疫治疗中发挥越来越重要的作用。本文将综述目前TCR-T基础研究和临床应用方面的进展,分析不同类型肿瘤抗原对TCR-T治疗有效性的影响,为癌症细胞免疫治疗提供新思路。

关键词：肿瘤抗原 TCR-T 过继性细胞免疫治疗

实体肿瘤TCR-T治疗研究的现状与面临的挑战

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中国肿瘤生物治疗杂志 2020年第9期27卷 959-967页

作者：叶春梅叶韵斌福建医科大学基础医学院福建医科大学附属肿瘤医院暨福建省肿瘤医院福建省肿瘤转化医学重点实验室福建福州350014

T细胞表面含有特异性的T细胞受体(T cell receptors,TCR),能够识别不同的肿瘤抗原,从而实现对癌变细胞的杀伤和清除。TCR工程化T细胞(TCR-engineered T cells,TCR-T)治疗即是通过钓取针对肿瘤细胞的特异性TCR,并应用基因工程技术改造T细... 详细信息

T细胞表面含有特异性的T细胞受体(T cell receptors,TCR),能够识别不同的肿瘤抗原,从而实现对癌变细胞的杀伤和清除。TCR工程化T细胞(TCR-engineered T cells,TCR-T)治疗即是通过钓取针对肿瘤细胞的特异性TCR,并应用基因工程技术改造T细胞,输注体内后可达到治疗肿瘤的目的。尽管TCR-T治疗取得一定成果,但是还存在治疗毒性、T细胞浸润有限、抗原特异性不佳等问题,需要不断优化TCR-T治疗的安全性和有效性。因此,本文阐述了目前国内外关于实体肿瘤TCR-T治疗的研究现状以及存在的问题与对策。

关键词：实体肿瘤过继性细胞免疫治疗 TCR工程化T细胞新抗原

表观遗传修饰介导抑制SOSTDC1表达促进宫颈癌细胞的恶性生物学行为

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中国肿瘤生物治疗杂志 2023年第6期30卷 473-481页

作者：林万松郭爱华陈淑萍汪阳黄天莹冯梅叶韵斌福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室福建福州350014 福建医科大学肿瘤临床医学院福建省肿瘤医院妇科肿瘤科福建福州350014 福建省肿瘤转化医学重点实验室福建福州350014 福建医科大学基础医学院福建福州350122

目的:探究含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)对宫颈癌细胞恶性生物学行为的调控及其分子机制。方法:收集2020年8月至2022年5月间在福建省肿瘤医院活检或手术切除的53例宫颈癌组织和相应的癌旁组织标本,免疫组化法检测SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织... 详细信息

目的:探究含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)对宫颈癌细胞恶性生物学行为的调控及其分子机制。方法:收集2020年8月至2022年5月间在福建省肿瘤医院活检或手术切除的53例宫颈癌组织和相应的癌旁组织标本,免疫组化法检测SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织及相应癌旁组织中的表达,qPCR法检测正常宫颈细胞、宫颈癌细胞中SOSTDC1 mRNA表达;将SOSTDC1过表达慢病毒(OE-sostdc1)和对照空病毒(NC)感染宫颈癌细胞SiHa及CaSki,将其分为SiHa-OE-sostdc1、SiHa-NC、CaSki-OE-sostdc1、CaSki-NC组,采用WST-1法、细胞集落形成实验、Transwell实验和WB法检测转染各组SiHa及CaSki细胞的增殖、集落形成、迁移和侵袭能力和BMP、Wnt/β-catenin信号途径相关蛋白及上皮-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达。用DNA甲基化酶抑制剂5-氮杂2'-脱氧胞苷(5'-Aza-CdR)处理宫颈癌细胞后采用qPCR和WB法检测SOSTDC1 m RNA及蛋白的表达变化,用甲基化特异性PCR(MSP)检测5例配对宫颈癌组织与癌旁组织中SOSTDC1基因启动子区甲基化水平,同时qPCR检测其SOSTDC1 mRNA水平。结果:与癌旁组织比较,SOSTDC1蛋白在宫颈癌组织中呈低表达(P<0.01),且与淋巴结转移与FIGO分期有关联(均P<0.05);与正常宫颈HUCEC细胞比较,SOSTDC1 mRNA在宫颈癌C33A、HeLa、SiHa、CaSki细胞中均呈低表达(均P<0.01)。过表达SOSTDC1显著抑制SiHa及CaSki细胞的增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。WB法结果检测显示,过表达SOSTDC1显著抑制SiHa及CaSki细胞中磷酸化Smad、Dvl2/3、β-catenin、VIM、N-cadherin、Snail蛋白的表达(均P<0.05),5'-Aza-CdR处理后的SiHa及CaSki细胞中SOSTDC1 mRNA和蛋白水平均显著增加(均P<0.05),MSP检测结果显示,相较于癌旁组织,宫颈癌组织中SOSTDC1基因启动子区呈高度甲基化,且SOSTDC1 mRNA水平降低(P<0.01)。结论:SOSTDC1在宫颈癌组织中呈低表达且与肿瘤的恶性进展关联,其表达下调与其基因启动子区高度甲基化有关,过表达SOSTDC1可能通过阻断BMP及Wnt/β-catenin信号通路从而抑制SiHa、CaSki细胞的增殖、侵袭和迁移能力。

关键词：宫颈癌 SiHa细胞 CaSki细胞含硬化蛋白域蛋白1 启动子区甲基化增殖侵袭迁移

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基于深度学习的英文小说阅读教学策略

中小学外语教学 2024年第5期47卷 7-12页

作者：吴叶韵江苏省常州市武进区洛阳高级中学

英文小说的阅读教学长期处于浅层化状态,无法发挥其重要价值,而深度学习对于解决该问题具有指导意义。本文以深度学习为理论基础,结合教学案例阐述了建构情节框架、探究思想本质、丰富文学活动、交流鉴赏语言、基于小说内容展开写作、... 详细信息

英文小说的阅读教学长期处于浅层化状态,无法发挥其重要价值,而深度学习对于解决该问题具有指导意义。本文以深度学习为理论基础,结合教学案例阐述了建构情节框架、探究思想本质、丰富文学活动、交流鉴赏语言、基于小说内容展开写作、真实情景迁移运用,以及批判评价所学等契合小说特点的阅读教学策略,以帮助学生深入解读小说,充分挖掘其思想、语言等各方面价值,提高英语素养。

关键词：深度学习英文小说阅读教学

乳腺癌患者外周血癌胚抗原及细胞角蛋白19mRNA表达的临床意义

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中华医学杂志 2008年第32期88卷 2267-2270页

作者：郑弘宇陈强叶韵斌黄伟炜福建省肿瘤医院乳腺科福州350014

目的探讨细胞角蛋白19（CK19）mRNA、癌胚抗原（CEA）mRNA的表达在诊断乳腺癌患者外周血微转移的临床意义及与临床病理指标的关系。方法采用实时定量聚合酶链反应（RQ—PCR）法，测定28名健康女性志愿者、20例良性乳腺疾病患者、108例... 详细信息

目的探讨细胞角蛋白19（CK19）mRNA、癌胚抗原（CEA）mRNA的表达在诊断乳腺癌患者外周血微转移的临床意义及与临床病理指标的关系。方法采用实时定量聚合酶链反应（RQ—PCR）法，测定28名健康女性志愿者、20例良性乳腺疾病患者、108例乳腺癌患者（88例行手术切除乳腺癌患者、20例复发转移乳腺癌患者）的外周血中CK19、CEAmRNA的表达。以上有一项为阳性即判定为转移。结果28名健康对照者CK19mRNA和CEAmRNA两个指标检测结果均为阴性。20例良性乳腺疾病患者中，CK19mRNA阳性1例（5％），无CEAmRNA表达阳性者。108例乳腺癌患者中，26例（24，1％）CK19mRNA阳性，23例（21．3％）CEAmRNA阳性，15例（13，9％）两者均阳性。在108例乳腺癌患者中，复发转移乳腺癌患者CK19mRNA和（或）CEAmRNA的表达高于行手术切除乳腺癌患者。88例行手术切除乳腺癌患者外周血微转移阴性组、阳性组在肿瘤大小、病理分期、ki67，细胞黏附分子CD44变异型、，6（CDd4v6），血管内皮生长因子（VEGF）表达方面差异有统计学意义（P〈0．05），但在年龄、肿瘤位置、病理组织学类型、淋巴结转移、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、CerbB2、基质金属蛋白酶9（MMP9）表达等方面差异无统计学意义（P〉0．05）。多因素分析表明肿瘤大小、病理分期、ki67、CD44v6、VEGF与患者外周血微转移有关。结论联合检测CK19mRNA和CEAmRNA可提高乳腺癌患者外周血微转移的检出率。肿瘤大小、病理分期、ki67、CDd4v6、VEGF可评估乳腺癌患者外周血微转移风险。

关键词：乳腺肿瘤癌胚抗原角蛋白循环肿瘤细胞诊断

纳米微粒偶联抗OX40/抗AFP抗体在细胞毒性T细胞抗肝癌中的作用

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细胞与分子免疫学杂志 2014年第4期30卷 337-341页

作者：陈明水欧阳海超周山勇李洁羽叶韵斌福建医科大学教学医院福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室福建福州350014 福建省肿瘤转化医学重点实验室福建福州350014 中国科学院福建物质结构研究所

目的探讨乳酸-羧基乙酸共聚物(PLGA)制备的纳米微粒偶联抗OX40及抗AFP抗体(抗OX40/抗AFP-NP)对甲胎蛋白AFP158-166抗原肽特异性细胞毒性T细胞(CTL/AFP158-166)体外杀伤肝癌细胞的影响。方法用溶剂蒸发法制备纳米微粒(NP),并与抗OX40和抗... 详细信息

目的探讨乳酸-羧基乙酸共聚物(PLGA)制备的纳米微粒偶联抗OX40及抗AFP抗体(抗OX40/抗AFP-NP)对甲胎蛋白AFP158-166抗原肽特异性细胞毒性T细胞(CTL/AFP158-166)体外杀伤肝癌细胞的影响。方法用溶剂蒸发法制备纳米微粒(NP),并与抗OX40和抗AFP共价偶联。用扫描电镜观察所制得PLGA-NP纳米颗粒的形态;ZetaPlusTM粒度测定仪检测纳米微粒的粒径及电荷;用BCA蛋白定量方法检测纳米微粒偶联抗体的效率;用人外周血单核细胞诱导形成树突状细胞(DC),用AFP158-166抗原肽负载DC诱导AFP特异性的CTL/AFP158-166;分别用2-(4-碘苯)-3-(4硝基苯)-5-(2,4-磺苯基四氮唑)-2H-四唑单钠盐-1法(WST-1)法、ELISA及乳酸脱氢酶(LDH)法分别检测抗OX40/抗AFP-NP对CTL/AFP158-166细胞增殖能力、分泌IL-2和IFN-γ及杀瘤活性的影响。结果所制得的PLGA-NP为圆形,大小较均一,粒径约为(300±42)nm,带负电荷,约为-(25.12±5.34)mV。蛋白定量显示每mg的PLGA-NP偶联约100μg抗体,偶联效率为25%;增殖和活化实验显示偶联有抗OX40的纳米微粒能显著刺激CTL的增殖、IL-2和IFN-γ的分泌;杀伤实验显示,抗OX40/抗AFP-NP能显著增强AFP特异性CTL/AFP158-166细胞对HepG2细胞特异性杀伤作用,而对SMMC-7721杀伤作用无明显效果。结论抗OX40/抗AFP-NP能刺激CTL/AFP158-166细胞的增殖、细胞因子的分泌并增强CTL/AFP158-166细胞对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤作用。

关键词：纳米微粒肝癌细胞毒性T细胞 HepG2 OX40

IL-12诱导肝癌微环境中NK细胞活化发挥抗肿瘤作用

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第1期20卷 93-98页

作者：周智锋江金华李洁羽陈强叶韵斌福建省肿瘤转化医学重点实验室福建福州3500014 福建医科大学福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室福建福州3500014 龙岩市第二医院肿瘤内科福建龙岩364000 福建医科大学附属协和医院肿瘤内科福建福州3500014

目的:探讨IL-12通过诱导肝癌微环境中NK细胞活化诱导抗肿瘤的效果。方法:NOD/SCID小鼠皮下注射肝癌HepG2细胞,成瘤后腹腔注射人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),建立HCC-huPBL荷瘤小鼠模型。将荷瘤小鼠随机分为IL-12组... 详细信息

目的:探讨IL-12通过诱导肝癌微环境中NK细胞活化诱导抗肿瘤的效果。方法:NOD/SCID小鼠皮下注射肝癌HepG2细胞,成瘤后腹腔注射人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL),建立HCC-huPBL荷瘤小鼠模型。将荷瘤小鼠随机分为IL-12组和PBS对照组,瘤内注射IL-12后,观测荷瘤小鼠瘤体积、体重、一般状况的变化,IL-12瘤内注射后第30天ELISA法检测荷瘤小鼠肝癌组织微环境中IL-12、INF-γ含量以及小鼠外周血中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate amin-otransferase,AST)及谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的含量,免疫组化法检测IL-12治疗后肝癌微环境中NK细胞活化性受体NKG2D、NKp44、NKp30、NKp46,以及抑制性受体KIR2DL3/CD158b、NKG2A/CD159a的表达。结果:第12、18、24、30天IL-12组荷瘤小鼠瘤体积均小于PBS组[(594.47±205.51)vs(832.10±187.49)mm3,(963.61±427.95)vs(1 350.87±468.23)mm3,(1 285.02±368.56)vs(1 975.49±655.54)mm3,(1 903.64±471.34)vs(2 568.77±784.68)mm3,均P<0.05]。IL-12组小鼠肝癌组织中IL-12与INF-γ的表达水平均明显高于PBS组[(2.96±1.02)vs(1.35±0.75)pg/ml,(12.26±4.11)vs(7.81±3.46)pg/ml,均P<0.05]。IL-12组与PBS组相比,血清ALT水平第7天显著升高[(73.85±10.71)vs(41.73±13.13)U/L;P<0.05],第14天达到高峰。IL-12组治疗后肝癌组织中NK细胞活化性受体NKG2D、NKp44、NKp30的表达较PBS组高(P<0.05),NKp46的表达未见明显升高;而NK细胞抑制性受体CD158b和CD159a表达较PBS组低(P<0.05)。结论:肝癌模型小鼠瘤体内IL-12注射可上调瘤组织内NK细胞活化性受体、IL-12、IFN-γ的表达,下调抑制性受体的表达,从而抑制小鼠模型中肿瘤的生长。

关键词： NK细胞活化性受体抑制性受体 IL-12 IFN-γ 移植性肝癌

体外扩增对食管癌患者NK细胞表面受体表达及其抑瘤活性的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2013年第3期20卷 330-335页

作者：周智锋柳硕岩郑庆丰李洁羽王枫叶韵斌福建省肿瘤转化医学重点实验室福建福州3500014 福建医科大学教学医院&福建省肿瘤医院肿瘤免疫学研究室福建福州3500014 福建省肿瘤医院胸外科福建福州3500014

目的:探讨食管癌患者NK细胞扩增前后的受体表达及其对肿瘤细胞的杀伤。方法:收集福建省肿瘤医院食管癌患者外周血20例,健康供者(对照组)外周血10例。NK细胞培养采用细胞因子(IL-2+IL-12+IL-15+IL-18)组合,流式细胞术检测NK细胞免疫表型... 详细信息

目的:探讨食管癌患者NK细胞扩增前后的受体表达及其对肿瘤细胞的杀伤。方法:收集福建省肿瘤医院食管癌患者外周血20例,健康供者(对照组)外周血10例。NK细胞培养采用细胞因子(IL-2+IL-12+IL-15+IL-18)组合,流式细胞术检测NK细胞免疫表型及其受体(CD56+、CD69+、NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46、CD158b、CD159a)的表达,LDH法检测不同效靶比时NK细胞对多种肿瘤细胞株(K562、Raji、Eca-109、TE-1)的杀伤作用。结果:与对照组相比,食管癌患者外周血CD3+、CD4+细胞比例以及CD4+/CD8+T细胞比值明显降低(P0.05)。经细胞因子体外培养20 d后,NK细胞表面CD69及活化性受体(NKG2D、NKp30、NKp44、NKp46)均明显上调,而抑制性受体(CD158b、CD159a)均明显下调(P<0.05)。培养20 d后,食管癌患者NK细胞对肿瘤细胞K562、Raji、Eca-109、TE-1的杀伤能力均显著高于培养前[(69.2±5.1)%vs(42.3±3.0)%,(44.6±3.2)%vs(21.1±2.0)%,(69.7±3.9)%vs(50.3±3.5)%,(67.1±4.5)%vs(41.2±3.3)%;均P<0.01]。结论:细胞因子IL-2+IL-12+IL-15+IL-18组合能有效扩增外周血NK细胞并上调其活并性受体的表达、下调抑制性受体的表达,其数量及功能均能满足临床治疗需要。

关键词： NK细胞活化性受体抑制性受体白细胞介素肿瘤细胞