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作者：刘才峰中国人民解放军海军军医大学

学位级别：硕士

研究背景和目的原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)简称肝癌,位居世界上第六大最常见肿瘤,肝癌的死亡率居第二位。据统计,每年新增的肝癌病人约为70万,其中约有一半的病人位于我国。然而大部分肝癌患者诊断时已经处于癌症的... 详细信息

研究背景和目的原发性肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)简称肝癌,位居世界上第六大最常见肿瘤,肝癌的死亡率居第二位。据统计,每年新增的肝癌病人约为70万,其中约有一半的病人位于我国。然而大部分肝癌患者诊断时已经处于癌症的中晚期,失去了最好的手术切除时机。目前肝癌的治疗手段主要包括手术切除和肝移植等,术后可以采用放化疗、肝动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)或靶向治疗等方法。但是由于肝癌的异质性,对于常规的放化疗效果并不明显,而小分子靶向治疗药物索拉菲尼,其对于晚期肝癌患者的生存期延长并不理想。肝癌干细胞(liver cell stem cells)是肝癌中一类具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞,被认为是肝癌患者术后复发和化疗耐药的最主要原因。已有研究报道肝癌干细胞可以利用CD133、CD24、CD90和Ep CAM等干细胞表面标志物进行分选鉴定。CD24可以通过STAT3介导的Nanog调节促进肝脏干细胞的自我更新和肿瘤发生。肝癌干细胞在肝癌的发生发展和复发耐药等方面起着极其重要的作用,因此深入探索研究肝癌干细胞的调控机制显得尤为重要,这也可能成为攻克肝癌的一个重要途径。micro RNAs是一类长度为20-22 nt的非编码小RNA分子,可以通过与目标m RNA的3’端非翻译区(3’-untranslated regions,3’UTR)结合来抑制翻译或诱导m RNA降解,以达到其调控细胞的增值、分化、凋亡和迁移等多种生物学行为。micro RNA在各种生物学过程中发挥着重要的调控作用。根据不同的肿瘤环境,micro RNA可以作为肿瘤抑制基因或癌基因来调控肿瘤的发生和发展。例如,miR-429通过靶向Rb结合蛋白4来调控肝癌起始细胞。已有研究报道miR-206在骨骼肌胚胎发育过程中受到雌二醇的调控。此外,miR-206在不依赖雌二醇生长的三阴性乳腺肿瘤中高度表达,是乳腺癌患者整体生存率较差的预测因子。还有报道称,miR-206抑制了肺癌细胞和胃癌细胞的增殖和侵袭,提示该miRNA参与了肿瘤的进展。然而miR-206是否在肝癌干细胞的分化过程中起到调控作用并不是十分清楚。前期研究发现miR-206在非酒精性脂肪肝患者的样本中可以持续监测到,在饮食肥胖的小鼠模型中,miR-206的治疗作用导致肝脏内脂质和葡萄糖的产生减少。已有研究报道miR-206可通过EGFR抑制肝癌的生长。但miR-206在肝癌干细胞中的作用未见报道。因此,本课题将通过体内、体外实验探明miR-206对肝癌干细胞的调控作用;进一步通过生物学分析结合经典的生物学技术探索miR-206调控肝癌干细胞的分子机制。研究方法:1.流式细胞仪分选CD133和Ep CAM阳性的肝癌细胞及阴性对照细胞;2.利用Realtime-PCR检测肝癌细胞球中miR-206的表达水平;3.利用Realtime-PCR检测CD133和Ep CAM阳性肝癌细胞中miR-206的表达水平;4.利用Realtime-PCR检测耐药肝癌组织中miR-206的表达水平;5.利用慢病毒系统建立稳定过表达miR-206的肝癌细胞系SMMC-7721 miR-206、HCCLM3 miR-206及其对照细胞系;***-7721 miR-206、HCCLM3 miR-206及其对照细胞系采用低粘附成球实验观察过表达miR-206后对肝癌干细胞自我跟新能力的影响;***-7721 miR-206、HCCLM3 miR-206及其对照细胞系采用体外有限稀释实验观察过表达miR-206后对肝癌干细胞生物学特性的影响;***-7721 miR-206、HCCLM3 miR-206及其对照细胞系采用流式检测干细胞标志物观察过表达miR-206后对肝癌干细胞比例的影响;***-7721 miR-206、HCCLM3 miR-206及其对照细胞系采用Realtime-PCR检测分析各种干性标志物和Mark等观察过表达miR-206后对肝癌干细胞生物学特性的影响;10.将不同浓度的SMMC-7721 miR-206及其对照细胞分别接种NOD-SCID小鼠皮下,检测miR-206对肝癌干细胞体内成瘤的影响;***-7721 miR-206、HCCLM3 miR-206及其对照细胞系加入不同浓度的索拉菲尼或顺铂,通过CCK8实验检测miR-206过表达肝癌细胞与对照细胞的生长情况;***-7721 miR-206、HCCLM3 miR-206及其对照细胞系加入不同浓度的索拉菲尼或顺铂,通过流式凋亡检测分析miR-206过表达肝癌细胞对索拉菲尼和顺铂的敏感性;13.利用Realtim

关键词：肝癌干细胞 miR-206 表皮生长因子受体索拉菲尼

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肝胆管结石合并肝内胆管癌的诊断与治疗(附18例报告)

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第二军医大学学报 2008年第10期29卷 1258-1260页

作者：晏建军周飞国曹杰刘才峰黄亮严以群第二军医大学东方肝胆外科医院肝外一科上海200438

目的:探讨肝内胆管结石合并肝胆管癌的早期诊断和治疗措施。方法:回顾性分析近6年收治的18例肝内胆管结石并发肝胆管癌患者的临床资料。结果:本组肝胆管结石并肝内胆管癌的发生率为5.0%(18/359),癌肿均发生于含结石胆管处,术前B超、CT、... 详细信息

目的:探讨肝内胆管结石合并肝胆管癌的早期诊断和治疗措施。方法:回顾性分析近6年收治的18例肝内胆管结石并发肝胆管癌患者的临床资料。结果:本组肝胆管结石并肝内胆管癌的发生率为5.0%(18/359),癌肿均发生于含结石胆管处,术前B超、CT、MRCP/ERCP对肝胆管癌变的诊断正确率分别为57.1%(4/7)、70%(7/10)、45.5%(5/11);手术切除率为61.1%(11/18),根治性切除率27.8%(5/18)。术后1、3年生存率:根治性切除组分别为80%(4/5)、40%(2/5),姑息性切除组分别为33.3%(2/6)、16.7%(1/6),两者比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:肝内胆管结石长期、反复发作是引起胆管癌的重要原因;肝胆管结石癌变的延误诊断率高、根治性切除率低、预后差。早期诊断并手术切除依然是肝胆管结石癌变最有效的治疗方法。

关键词：肝胆管结石胆管肿瘤外科学诊断治疗

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以肝内胆管扩张为首发临床表现的华支睾吸虫病1例报告

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第二军医大学学报 2008年第8期29卷 1003-1004页

作者：周飞国刘才峰严以群第二军医大学东方肝胆外科医院肝外一科上海200438

华支睾吸虫病因其起病隐匿、发展缓慢、临床表现轻微而不典型，往往得不到早期诊治，在病程晚期则可导致严重并发症。我科收治1例以肝内胆管扩张为首发临床表现的华支睾吸虫病，结合相关文献浅谈早期诊治该病的体会。

关键词：华支睾吸虫病肝内胆管病理性扩张

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肝脏三叶切除术治疗肝脏肿瘤60例报告

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中国实用外科杂志 2009年第11期29卷 925-927页

作者：黄亮刘才峰周飞国晏建军吴孟超严以群第二军医大学东方肝胆外科医院肝外一科上海200438

目的探讨肝脏三叶切除术的手术技术。方法回顾性分析第二军医大学东方肝胆外科医院2000年1月至2005年12月行肝脏三叶切除60例病人的临床资料。结果全组术前肝功能Child—Pugh分级均属A级．57例（95％）评为5分，3例（5％）评为6分。肿... 详细信息

目的探讨肝脏三叶切除术的手术技术。方法回顾性分析第二军医大学东方肝胆外科医院2000年1月至2005年12月行肝脏三叶切除60例病人的临床资料。结果全组术前肝功能Child—Pugh分级均属A级．57例（95％）评为5分，3例（5％）评为6分。肿瘤直径平均15．2（5～27）cm，其中〈15cm14例．15．20cm34例，〉20cm12例。行左三叶切除24例，右三叶切除36例。联合尾状叶切除1例、门静脉取栓3例、下腔静脉取栓＋右肾上腺切除l例、胆管切开取栓2例、淋巴结清扫4例。60例均行常温下第一肝门阻断法切肝，阻断1次者30例，2次者15例，3次者15例。阻断总时间最长73min，平均30．1min；单次阻断最长45min。术中出血最少200mL，最多11000mL，平均1605mL。输血最多13200mL，平均2003mL。未输血者15例。术后并发症发生率为13.3％（8／60），手术死亡率为3.3％（2／60）。结论肝三叶切除是治疗肝脏肿瘤的有效方法，术前对肝脏储备功能的准确评估是术后肝功能恢复的保证。术野良好的暴露，肝创面的妥善处理及对残肝内重要结构的保护，是减少术后并发症的重要保证。

关键词：肝切除肝肿瘤肝脏三叶切除

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“吃出来”的食管癌

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食品与健康 2023年第10期35卷 4-5页

作者：刘才峰魏巍海军军医大学第三附属医院

食管是人体消化道的主要组成部分，它上连口腔，下连胃部，是食物进入胃部的通道。食管癌是发生在食管黏膜上皮的恶性肿瘤，又叫食道癌，其病情发展快、恶性程度高、复发率高。作为全球范围内常见的恶性肿瘤之一，食管癌的发病率位居全...

食管是人体消化道的主要组成部分，它上连口腔，下连胃部，是食物进入胃部的通道。食管癌是发生在食管黏膜上皮的恶性肿瘤，又叫食道癌，其病情发展快、恶性程度高、复发率高。作为全球范围内常见的恶性肿瘤之一，食管癌的发病率位居全球第7位，病死率高居第6位。我国是食管癌的高发地区之一，这种可怕的癌症的发生、发展，与不良饮食习惯关系密切。

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多处肝切除治疗复杂肝胆管结石病69例手术分析

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第四军医大学学报 2008年第13期29卷 1232-1234页

作者：周飞国黄亮刘才峰晏建军张向化沈军严以群第二军医大学东方肝胆外科医院肝外一科上海200438

目的：探讨多处肝切除治疗复杂肝胆管结石病的手术方法,以提高手术疗效和减少并发症发生.方法：回顾性分析近8a收治的69例应用多处肝切除治疗累及二叶或二叶以上的复杂肝胆管结石病的临床资料.肝内胆管结石同时累及二、三、四、五肝叶... 详细信息

目的：探讨多处肝切除治疗复杂肝胆管结石病的手术方法,以提高手术疗效和减少并发症发生.方法：回顾性分析近8a收治的69例应用多处肝切除治疗累及二叶或二叶以上的复杂肝胆管结石病的临床资料.肝内胆管结石同时累及二、三、四、五肝叶的病例分别为47,19,2,1例,伴有肝内胆管狭窄15例,肝局部纤维化和萎缩55例,慢性肝脓肿2例,早期肝内胆管癌1例,胆囊结石9例,胆总管结石35例.2处肝切除67例,3处肝切除2例,合计140处肝切除,包括局部楔形切除41处、规则性肝段切除23处、规则性肝叶切除65处和半肝切除11处.同时行胆囊切除45例,胆总管切开探查或取石68例,胆道T管引流67例.结果：肝内胆管结石手术清除率为73.9%（51/69）,残留结石18例,术后经T管窦道取石16例,取净14例,最终结石清除率为94.2%（65/69）.手术并发症发生率43.5%,手术死亡率2.9%,肝功能不全是最常见并发症,2例因肝功能衰竭死亡.随访3～94（平均48）mo,肝内胆管结石复发6例.结论：多处肝切除治疗复杂肝胆管结石病的疗效较为肯定,尽管手术并发症的发生率相对较高.准确评估病变累及范围、选择合适的肝切除类型、多保留正常肝组织、防止误伤肝内正常结构、常规胆总管切开和T管引流,是多处肝切除的手术要点.

关键词：胆结石手术肝切除

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淫羊藿素脂质体抗大鼠肝脏缺血再灌注损伤

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第二军医大学学报 2017年第6期38卷 739-745页

作者：李君刘才峰仲兴阳徐峰孙淑军王洋严以群殷正丰第二军医大学东方肝胆外科医院肝胆外科/放疗科上海200438 上海交通大学药学院药物分析实验室上海200240 上海中医药大学中医方证与系统生物学研究中心上海201203 第二军医大学东方肝胆外科医院肝外一科上海200438 第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤实验室上海200438

目的探讨淫羊藿素脂质体对大鼠肝脏缺血再灌注(I/R)损伤的作用及其机制。方法建立大鼠70%肝脏I/R损伤模型。将120只雄性大鼠随机分成淫羊藿素脂质体+I/R损伤(ICT+I/R)组、空白脂质体+I/R损伤(LIP+I/R)组、单纯I/R损伤组和假手术(Sham)组... 详细信息

目的探讨淫羊藿素脂质体对大鼠肝脏缺血再灌注(I/R)损伤的作用及其机制。方法建立大鼠70%肝脏I/R损伤模型。将120只雄性大鼠随机分成淫羊藿素脂质体+I/R损伤(ICT+I/R)组、空白脂质体+I/R损伤(LIP+I/R)组、单纯I/R损伤组和假手术(Sham)组,每组再随机分成2h和6h两个亚组。Sham组仅游离肝门,其余各组均行70%肝脏缺血60min。血流阻断前10min,ICT+I/R组、LIP+I/R组分别经门静脉注射淫羊藿素脂质体(1.5mg/kg)、空白脂质体(与淫羊藿素脂质体等体积),I/R组和Sham组不行任何预处理。经2、6h血流再灌注后,采集各组血液及肝脏组织标本,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平以及肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)以及髓过氧化物酶(MPO)含量。采用H-E染色法观察肝脏组织形态,TUNEL染色法观察肝细胞凋亡情况并测定凋亡指数(AI)。结果再灌注2h,ICT+I/R组的ALT、MDA、MPO、AI较LIP+I/R组和I/R组下降,差异有统计学意义(P<0.01);再灌注6h,与LIP+I/R组和I/R组相比,ICT+I/R组的ALT、AST、MDA、AI下降,同时SOD、NO、NOS、eNOS升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论淫羊藿素脂质体能够通过增加SOD含量、减少MDA的生成,促进eNOS表达的升高、增加NO的含量以及抑制MPO的聚集、减少肝细胞凋亡等多途径发挥抗大鼠肝脏I/R损伤的保护作用。

关键词：淫羊藿素脂质体肝再灌注损伤氧化性应激

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5例异位胆囊诊治体会

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肝胆胰外科杂志 2010年第2期22卷 121-122页

作者：晏建军杨晓宇沈军刘才峰严以群第二军医大学附属东方肝胆外科医院上海200438

目的总结异位胆囊的诊断与治疗经验。方法回顾性总结分析我院收治的5例异位胆囊的临床资料。结果肝内胆囊2例,肝右叶的后下方2例,肝左外叶1例。B超检查有4例(80%)术前提示胆囊异位,而MRCP检查发现3例胆囊管汇合异常,无一例怀疑胆囊异位... 详细信息

目的总结异位胆囊的诊断与治疗经验。方法回顾性总结分析我院收治的5例异位胆囊的临床资料。结果肝内胆囊2例,肝右叶的后下方2例,肝左外叶1例。B超检查有4例(80%)术前提示胆囊异位,而MRCP检查发现3例胆囊管汇合异常,无一例怀疑胆囊异位。全部患者均行胆囊切除术,其中2例为腹腔镜手术,3例为开腹手术。结论B超为异位胆囊的首选检查方法,而明确有无胆囊管汇合异常则MRCP更有价值,异位胆囊切除手术中应注意胆囊三角的关系,避免损伤胆管。

关键词：异位胆囊诊断治疗胆囊切除术胆道损伤

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乳腺癌术后肝脏转移的手术治疗：47例回顾性分析

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中华肝胆外科杂志 2012年第6期18卷 420-423页

作者：刘才峰晏建军李静黄亮周飞国严以群第二军医大学附属东方肝胆外科医院肝外一科上海200438

目的探讨手术治疗乳腺癌肝转移的疗效及预后影响因素。方法回顾性收集2000—2009年在我院就诊的47例乳腺癌术后肝转移手术治疗资料和随访结果，分析乳腺癌肝转移患者的临床特征及其与预后的关系。结果本组患者围手术期死亡率为0，术后1... 详细信息

目的探讨手术治疗乳腺癌肝转移的疗效及预后影响因素。方法回顾性收集2000—2009年在我院就诊的47例乳腺癌术后肝转移手术治疗资料和随访结果，分析乳腺癌肝转移患者的临床特征及其与预后的关系。结果本组患者围手术期死亡率为0，术后1、3、5年累积生存率分别为74．5％、42．5％和17．0％，中位生存时间为29个月。其中肝内转移灶数目〈3个者平均生存时间为79．4个月，1、3、5年累积生存率分别为86．7％、53．3％和23．3％；肝内转移灶数目≥3个者平均生存时间为34．6个月，1、3、5年累积生存率分别为52．8％、23．5％和5．9％，两组间差异有统计学意义（P=0．001）。伴有肝脏周围局部淋巴结转移者平均生存时间为28．6个月，1、3、5年累积生存率分别为53．8％、23．1％和0；无局部淋巴结转移者平均生存时间为71．9个月，1、3、5年累积生存率分别为82．3％、50．0％和23．5％，两组间差异亦有显著统计学意义（P=0．002）。患者生存率和生存时间与转移瘤分化程度以及雌激素受体（ER）、孕酮受体（PR）、Her-2受体阳性与否无关。结论乳腺癌术后肝转移患者，手术治疗安全性好。与转移灶数目≥3者相比，转移灶数目〈3个者可取得更好的远期疗效；局部淋巴结转移者预后要比无转移者差。

关键词：乳腺癌肝脏转移瘤手术治疗预后

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不同病毒载量的乙型肝炎病毒在不同ALT状态下对肝星状细胞增殖、细胞周期及细胞分泌的影响

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中山大学学报(医学科学版) 2024年

作者：高鹏刘才周朱陇东李俊峰于海涛姚立琼兰州大学第一医院医学检验中心兰州大学第一医院传染科甘肃兰州

【目的】临床上经常以ALT是否正常等因素将乙型肝炎感染者分为乙型肝炎携带者或乙型肝炎患者，并且以ALT≥2UNL作为临床抗病毒治疗的适应症之一，但是目前尚缺乏足够的文献阐明其理论学依据，本文借助乙型肝炎病毒对肝星状细胞的影响对... 详细信息

【目的】临床上经常以ALT是否正常等因素将乙型肝炎感染者分为乙型肝炎携带者或乙型肝炎患者，并且以ALT≥2UNL作为临床抗病毒治疗的适应症之一，但是目前尚缺乏足够的文献阐明其理论学依据，本文借助乙型肝炎病毒对肝星状细胞的影响对此进行探讨。【方法】分层随机选取不同ALT状态下不同病毒载量的慢性乙型肝炎的患者132例，作为干扰血清。经干扰血清干预HSC后，分别用MTT法检测HSC增殖，流式细胞仪检测HSC细胞周期，RT-PCR和免疫印迹分别检测TGF-β1、Smad3、 Smad7、α-SMA、collagenⅠ、collagenⅢmRNA及蛋白的表达，同时对ALT≥2UNL的慢性乙肝患者抗病毒治疗随访24周，对比分析治疗前后患者干扰血清对肝星状细胞的影响。【结果】在ALT正常状态下，不同病毒载量的乙型肝炎病毒对肝星状细胞增殖、细胞周期及细胞分泌无差别性影响。而在ALT异常状态下，特别是ALT≥2UNL组中，随着病毒载量的增加，HSC增殖加速，处于G0/G1期的明显减少，而处于S期，G2/M期的明显增多以及TGF-β1、Smad3、CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA mRNA及相应蛋白的表达明显增高，Smad7 mRNA及蛋白明显减少，差异有统计学意义。与抗病毒治疗前相比抗病毒治疗后，干扰血清对肝星状细胞的影响明显减弱。【结论】本文揭示了在不同ALT状态下乙型肝炎病毒对HSC的差异性影响，并通过抗病毒治疗前后对比分析。补充说明了以ALT为节点抗病毒治疗乙型肝炎病毒的细胞学理论基础。

关键词：乙型肝炎病毒病毒载量肝星状细胞细胞周期细胞增殖细胞分泌丙氨酸氨基转移酶

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