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紫杉醇生物合成上游途径中重要酶基因克隆

紫杉醇生物合成上游途径中重要酶基因克隆

作者：于湘莉天津大学

学位级别：硕士

紫杉醇生物合成上游途径是指紫杉醇生物合成途径中GGPP之前的部分,包括MVA途径、DXP途径和从IPP缩合形成GGPP的代谢途径。为从曼地红豆杉中克隆紫杉醇生物合成上游途径中的重要酶基因,首先建立了一种从曼地亚红豆杉成熟组织中提取高质量... 详细信息

紫杉醇生物合成上游途径是指紫杉醇生物合成途径中GGPP之前的部分,包括MVA途径、DXP途径和从IPP缩合形成GGPP的代谢途径。为从曼地红豆杉中克隆紫杉醇生物合成上游途径中的重要酶基因,首先建立了一种从曼地亚红豆杉成熟组织中提取高质量RNA的方法。在此基础上,采用RACE方法从曼地亚红豆杉中克隆了六个重要酶的基因的全长cDNA:MVA途径上的3-羟基-3-甲基戊二酰CoA合成酶基因(tmhmgr)和异戊烯焦磷酸异构酶基因(tmipi)、DXP途径上的5-磷酸脱氧木酮糖合成酶基因(tmdxs)和5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因(tmdxr)、从IPP缩合形成GGPP途径上的曼法呢基焦磷酸合成酶基因(tmfps)和香叶基香叶基焦磷酸合成酶基因(tmggpps)。除tmggpps外其他五个基因都是首次从裸子植物中获得。酵母遗传功能互补的方法证实了tmhmgr、tmfps、tmggpps基因都编码相应的功能蛋白,而tmipi也能通过其在大肠杆菌中过量表达促进β-胡萝卜素的生物合成,说明它是一个编码有功能的IPI蛋白的基因。Southern杂交表明,在曼地亚红豆杉中tmhmgr、tmfps、tmipi、tmdxs都是其相应基因家族的成员。Northern杂交表明,这些基因在根、茎、叶中都有表达,但一般来说针叶中的表达量高于根和树干。通过MeJA诱导实验,发现tmggpps和tmdxs在对照实验有本底表达,但MeJA处理东北红豆杉细胞导致其长时间超量表达。通过克隆tmggpps基因的基因组序列,发现tmggpps是一个没有内含子的基因。利用染色体步移技术,获得了tmggpps上游启动子调控序列,在其中发现了与长春花str基因MeJA反应元件G-box一样的顺式作用元件CACGTC,该元件可能是MeJA诱导tmggpps表达上调的分子基础,有助于阐明MeJA诱导紫杉醇超量积累的分子机制。本文关于这些基因的研究为深入阐明紫杉醇生物合成的分子机制奠定了重要基础,为紫杉醇的代谢工程提供了更多可能的调控靶点。

关键词：红豆杉紫杉醇 3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶基因法尼基焦磷酸合成酶基因异戊烯焦磷酸异构酶基因 5-磷酸脱氧木酮糖合成酶基因 5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因香叶基香叶基焦磷酸合成酶基因

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楸灵素在水环境下的热稳定性及热降解动力学

化工学报 2016年第4期67卷 1448-1452页

作者：胡郁楠于湘莉唐克轩苗志奇上海交通大学农业与生物学院上海200240

用高效液相色谱检测不同温度下楸灵素降解的动态变化。建立楸灵素热降解动力学模型,定量分析温度对楸灵素稳定性的影响。实验发现楸灵素在发酵液中的热降解符合一级反应动力学,热降解速率常数随温度提高而快速上升,符合Arrhenius方程。... 详细信息

用高效液相色谱检测不同温度下楸灵素降解的动态变化。建立楸灵素热降解动力学模型,定量分析温度对楸灵素稳定性的影响。实验发现楸灵素在发酵液中的热降解符合一级反应动力学,热降解速率常数随温度提高而快速上升,符合Arrhenius方程。4℃条件下楸灵素在发酵液中的半衰期长达25 d,25℃条件下则缩短为6 d,而55℃条件则进一步下降到14 h。模型预测楸灵素在70℃半衰期只有3.7 h,楸灵素发酵液旋转蒸发会造成大量降解,收率低下,与验证实验结果完全吻合。

关键词：药物楸灵素降解不稳定性温度动力学模型

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基于模糊理论的酵母发酵动力学模型

无锡轻工大学学报（食品与生物技术） 2002年第6期21卷 638-640,644页

作者：于湘莉苗志奇元英进李睿洁张磊天津大学化工学院天津300072 天津华立达生物工程有限责任公司博士后工作站天津300241

在模糊理论基础上,提出了一种描述菌体生长的模糊动力学模型,将专家对发酵过程的定性经验描述和精确的数学模型联系起来.模型分析发现,对数期隶属度函数就是菌体的相对比生长速率,从而提供了一种划分菌体发酵阶段的方法.最后针对酵母发... 详细信息

在模糊理论基础上,提出了一种描述菌体生长的模糊动力学模型,将专家对发酵过程的定性经验描述和精确的数学模型联系起来.模型分析发现,对数期隶属度函数就是菌体的相对比生长速率,从而提供了一种划分菌体发酵阶段的方法.最后针对酵母发酵过程,精确地确定了划分对数生长期的开始时间和结束时间.

关键词：模糊理论酵母发酵动力学模型生长动力学

一株具有抗HepG2活性的胡桃楸内生真菌的分离及研究

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中国中药杂志 2009年第13期34卷 1623-1627页

作者：李美芽吴运帷蒋福升于湘莉唐克轩苗志奇上海交通大学农业与生物学院上海200240 浙江中医药大学生命科学学院浙江杭州310053

目的：从胡桃楸树皮部分离抗癌活性菌株，筛选抗癌活性菌株，进行菌种鉴定，并对其发酵产物体外抗癌活性进行初步研究。方法：采用菌丝顶端纯化法从胡桃楸树皮部分离、纯化抗癌活性菌株；以MTT法对上述活性菌株发酵液体外抗癌活性进行... 详细信息

目的：从胡桃楸树皮部分离抗癌活性菌株，筛选抗癌活性菌株，进行菌种鉴定，并对其发酵产物体外抗癌活性进行初步研究。方法：采用菌丝顶端纯化法从胡桃楸树皮部分离、纯化抗癌活性菌株；以MTT法对上述活性菌株发酵液体外抗癌活性进行初步评价；形态学观察结合ITS序列分析法对筛选出的高抗癌活性菌株进行了菌种鉴定；单独对高抗癌活性菌株进行了体外抗癌活性试验。结果：分离得到FSN001—014共14株内生真菌，初步评价发现菌株FSN006具有较强的抗癌活性，鉴定为半知菌亚门，丝孢纲，丛梗孢目，木霉菌属长枝木霉。MTT结果显示FSN006发酵液对人肝癌HepG2细胞具有明显的生长抑制作用，在稀释20倍后仍能达到半数抑制效果。同等条件下阳性对照药姜黄素的IC50为11．49mg·L^-1。同时发酵液对正常肝细胞HL-7702的抑制程度仅相当于癌细胞抑制率的I／4左右，表现出较好的癌细胞选择性，有望开发成一种水溶性的高效低毒的抗癌药物。结论：胡桃楸树皮部存在多种内生真菌，其中分离得到的一个菌株具有较强的抗癌活性；其抗癌活性成分及其是否与胡桃楸中抗癌活性物质存在相关性等问题有待进一步深入研究。

关键词：胡桃楸内生真菌发酵液抗肿瘤

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树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响

吉林大学学报（理学版） 2018年第1期56卷 178-183页

作者：冯婷婷苗辰飞于湘莉苗志奇上海交通大学农业与生物学院上海200240

以含有楸灵素的楸树内生真菌FSN002发酵液为原料,采用静态实验法考察树脂对楸灵素的吸附过程,建立树脂吸附动力学模型,并通过模型分析定量研究各种树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响.结果表明,树脂对楸灵素的吸附过程符合一级动力学模型... 详细信息

以含有楸灵素的楸树内生真菌FSN002发酵液为原料,采用静态实验法考察树脂对楸灵素的吸附过程,建立树脂吸附动力学模型,并通过模型分析定量研究各种树脂对楸灵素吸附与洗脱特性的影响.结果表明,树脂对楸灵素的吸附过程符合一级动力学模型,其中反相树脂对楸灵素的最大吸附能力平均为39.39mg/mL,是离子交换树脂的1.38倍;反相树脂吸附的楸灵素不易洗脱,平均洗脱收率为12.2%,离子交换树脂的平均洗脱收率为46.6%,其中阴离子交换树脂D201的楸灵素洗脱收率最高达83.0%,吸附速率较快,综合性能较好.

关键词：大孔树脂楸灵素吸附洗脱

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农技推广协同机制分析与涉农高校实践探索

科技管理研究 2023年第9期43卷 90-94页

作者：王航于湘莉杜清清吕红芝上海交通大学农业与生物学院上海200240 上海交通大学新农村发展研究院上海200240

为进一步强化我国“一主多元”农技推广体系促进多元力量的协同推广,针对当前多元主体协同推广的体系不完备、机制不健全、服务效能不高等问题,借鉴系统学、协同学等相关理论,分析并提出资源整合的协同推广形成机制(机会识别、沟通、决... 详细信息

为进一步强化我国“一主多元”农技推广体系促进多元力量的协同推广,针对当前多元主体协同推广的体系不完备、机制不健全、服务效能不高等问题,借鉴系统学、协同学等相关理论,分析并提出资源整合的协同推广形成机制(机会识别、沟通、决策)和资源互动的协同推广运行机制(动力、利益、管理),即“两类六大”协同机制;并分析涉农高校作为重要“一元”开展的衔接型和嵌入式实践探索和创新做法,明晰互动式的沟通机制、“推-拉”驱动力的均衡是高校参与农技推广的重要保障。

关键词： “一主多元”农技推广体系高校农推模式协同机制互动式沟通 “推-拉”驱动力

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纳豆发酵过程中的生物胺

纳豆发酵过程中的生物胺

中国食品科学技术学会第五届年会暨第四届东西方食品业高层论坛

作者：于湘莉沈翔张建华上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系

本研究通过丹磺酰氯柱前衍生,用 HPLC 对纳豆发酵过程中的生物胺进行检测．结果表明纳豆发酵过程中可产生亚精胺、精胺、腐胺和酪胺。发酵12小时至18小时,生物胺含量从268．7± 0．32mg/kg;增加到347．7±24．31 mg/kg,18小时至24小时... 详细信息

本研究通过丹磺酰氯柱前衍生,用 HPLC 对纳豆发酵过程中的生物胺进行检测．结果表明纳豆发酵过程中可产生亚精胺、精胺、腐胺和酪胺。发酵12小时至18小时,生物胺含量从268．7± 0．32mg/kg;增加到347．7±24．31 mg/kg,18小时至24小时生物胺含量变化不大。纳豆中95%以上的生物胺是对人体没有直接毒性的多聚胺,其中亚精胺约占70%;对人体有直接毒性的生物胺只检测到酪胺,其含量小于14mg/kg。在2种商品纳豆中检测到亚精胺、精胺和腐胺,没检测到酪胺,总生物胺含量分别为84．1±1．52mg/kg 和104．0±4．30mg/kg。

关键词：纳豆生物胺 HPLC

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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新时代高校农业科技推广动力与模式分析

农业科技管理 2021年第4期40卷 75-78,81页

作者：王航于湘莉吕红芝上海交通大学农业与生物学院上海200240 上海交通大学新农村发展研究院上海200240

新形势下高校开展农技推广工作的主要驱动力,除了来自农科成果示范应用需要及新农科建设要求的内部“推力”之外,还有来自政策、农业科技与农技推广体系需要的外部“拉力”。各高校依托其建立的新农村发展研究院,不断探索形成了与公益... 详细信息

新形势下高校开展农技推广工作的主要驱动力,除了来自农科成果示范应用需要及新农科建设要求的内部“推力”之外,还有来自政策、农业科技与农技推广体系需要的外部“拉力”。各高校依托其建立的新农村发展研究院,不断探索形成了与公益性农技推广机构相结合的衔接型或嵌入式等高校农技推广模式。为保障持续性,建议各高校探索符合实际需求和自身特点的农技推广模式;同时,相关管理部门对高校具有推广应用价值的技术研发与攻关应予以关注和稳定支持。通过借助政府农技推广机构等推广力量和资源,合力形成农技推广协同格局,促进先进适用的农业科技成果推广应用。

关键词：高校 “一主多元”农技推广体系 “推-拉”驱动力推广模式

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纳豆发酵过程中的生物胺

上海交通大学学报（农业科学版） 2007年第1期25卷 1-5页

作者：张建华沈翔于湘莉上海交通大学食品科学与工程系上海201101

研究通过丹磺酰氯柱前衍生,用HPLC对纳豆发酵过程中的生物胺进行检测。结果表明纳豆发酵过程中可产生亚精胺、精胺、腐胺和酪胺。发酵12至18h,生物胺含量从268.7±0.32mg·kg-1增加到347.7±24.31mg·kg-1,18～24h生物胺含量变化不大。... 详细信息

研究通过丹磺酰氯柱前衍生,用HPLC对纳豆发酵过程中的生物胺进行检测。结果表明纳豆发酵过程中可产生亚精胺、精胺、腐胺和酪胺。发酵12至18h,生物胺含量从268.7±0.32mg·kg-1增加到347.7±24.31mg·kg-1,18～24h生物胺含量变化不大。纳豆中95%以上的生物胺是对人体没有直接毒性的多聚胺,其中亚精胺约占70%;对人体有直接毒性的生物胺只检测到酪胺,其含量小于14mg·kg-1。在2种商品纳豆中检测到亚精胺、精胺和腐胺,没检测到酪胺,总生物胺含量分别为84.1±1.52mg·kg-1和104.0±4.30mg·kg-1。

关键词：纳豆生物铵 HPLC