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小续命汤调控NLRP3对CPZ诱导脱髓鞘小鼠的保护机制

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中国医院药学杂志 2024年第14期44卷 1613-1619页

作者：杨琬芳许晶任桓莹苑舒文杨智超宋国斌宋丽娟王青马存根山西中医药大学神经生物学研究中心国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西晋中030619 山西医科大学基础医学院山西太原030001 山西大同大学脑科学研究所山西大同037009

目的:探究小续命汤(Xiaoxuming Decoction,XD)对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘小鼠的神经炎症影响。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照(Control)组、CPZ组、XD1组(低剂量)和XD2(高剂量)组。每组10只小鼠,Control组... 详细信息

目的:探究小续命汤(Xiaoxuming Decoction,XD)对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘小鼠的神经炎症影响。方法:C57BL/6雄性小鼠随机分为正常对照(Control)组、CPZ组、XD1组(低剂量)和XD2(高剂量)组。每组10只小鼠,Control组不建模,其他3组每日喂饲0.2%CPZ建模,第28日起XD1和XD2组分别给予30 g·kg^(-1),bid和30 g·kg^(-1),tid XD灌胃,Control组和CPZ组分别给予等量生理盐水灌胃,持续至第42日。通过高架十字迷宫检测小鼠行为学表现,LFB染色和MBP免疫荧光染色观察小鼠胼胝体髓鞘脱失情况,脑组织小胶质细胞IBA1染色,荧光定量PCR和Western blot检测CD11b,HMGB1,TLR4/NLRP3/Caspase-1炎症小体和炎症介质的mRNA和蛋白质表达水平。结果:与CPZ模型组比较,XD治疗组小鼠进入闭臂次数减少和闭臂运动距离缩短,高剂量治疗组效果尤为显著(P<0.05,P<0.01),改善胼胝体髓鞘脱失(P<0.05),降低脑组织中小胶质细胞浸润(P<0.05);减少HMGB1、TLR4和炎症小体NLRP3的mRNA和蛋白质表达(P<0.05),降低细胞因子Caspase-1、IL-1β和IL-18的mRNA(P<0.05),抑制Akt/NF-κB通路活化(P<0.05)。结论:XD可能通过调控NLRP3炎症小体表达,抑制脑组织中小胶质细胞活化和浸润,进而降低CPZ模型神经炎性损伤,发挥神经保护作用。

关键词：小续命汤双环己酮草酰二腙髓鞘脱失神经炎症 NLRP3炎症小体

黄芪甲苷可抑制炎性诱导星形胶质细胞激活及炎症反应

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中国组织工程研究 2024年第31期28卷 5022-5028页

作者：于婧文郭敏芳张冰心穆秉桃孟涛张慧宇马存根殷金珠宋丽娟尉杰忠山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室/附属第一医院神经科山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心国药同煤总医院神经外科/山西省卫健委神经疾病防治研究重点实验室山西大同市第五人民医院

背景：星形胶质细胞在中枢神经系统疾病的病理中起着重要作用。星形胶质细胞的表型变化及功能改变，提示其可能是中枢神经系统疾病的有效治疗靶点。前期研究证实，黄芪甲苷可以抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的星形胶质细胞炎... 详细信息

背景：星形胶质细胞在中枢神经系统疾病的病理中起着重要作用。星形胶质细胞的表型变化及功能改变，提示其可能是中枢神经系统疾病的有效治疗靶点。前期研究证实，黄芪甲苷可以抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的星形胶质细胞炎性反应，其是否可以通过Notch-1及其下游信号通路调控星形胶质细胞表型和功能，尚不清楚。目的：探讨黄芪甲苷对炎性诱导的星形胶质细胞激活及炎症反应的影响及可能机制。方法：体外培养新生C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞，CCK-8法检测星形胶质细胞活力确定黄芪甲苷及Notch活性抑制剂DAPT的最适浓度；然后将星形胶质细胞分为5组：PBS组、LPS组、LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组和LPS+DAPT+黄芪甲苷组，ELISA法检测炎性因子分泌水平，Griess法检测一氧化氮水平，用Transwell小室将星形胶质细胞与脾脏单个核细胞共培养，观察CD4 T细胞的迁移情况，免疫荧光染色检测星形胶质细胞活化标志物GFAP、星形胶质细胞的A1标记物C3、A2标记物S100A10以及信号通路相关Notch-1、Jag-1的表达，Western blot法检测CFB、C3、S100A10、PTX3、Notch-1、Jag-1和Hes的表达。结果与结论：(1)根据CCK-8结果，筛选黄芪甲苷终浓度为25μmol/L,DAPT终浓度为50μmol/L进行后续实验；(2)与PBS组相比，LPS组白细胞介素6、白细胞介素12和一氧化氮分泌水平显著升高(P 0.05,P 0.05)的表达增加；(5)与PBS组相比，LPS组Jag-1、Notch-1和Hes表达明显增加(均为P <0.01)；与LPS组相比，LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组、LPS+DAPT+黄芪甲苷组Jag-1(均为P <0.01)、Notch-1(均为P <0.01)和Hes(P <0.05,P <0.01,P <0.01)表达显著减少；(6)结果表明：黄芪甲苷可通过调控Notch-1信号通路促进星形胶质细胞由A1型向A2型转化，减少炎性因子的分泌和CD4 T细胞的迁移，从而抑制星形胶质细胞的激活和炎性反应。

关键词：黄芪甲苷脂多糖星形胶质细胞 Notch-1/Hes信号通路神经炎性反应 DAPT

烟酰胺核糖对EAE小鼠的外周抗炎作用及其机制研究

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免疫学杂志 2024年第2期40卷 122-130页

作者：席国萍宋国斌章培军孟涛魏文悦李苏垚李娜李梦迪王青马存根山西大同大学脑科学研究所 037009 山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心晋中030619

目的探讨烟酰胺核糖(NR)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的外周抗炎作用及机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35~55肽段(MOG35-55)诱导C57BL/6雌性小鼠制备EAE模型,随机分为EAE模型组和NR治疗组。EAE模型组每只小鼠按200μl/d... 详细信息

目的探讨烟酰胺核糖(NR)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的外周抗炎作用及机制。方法采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35~55肽段(MOG35-55)诱导C57BL/6雌性小鼠制备EAE模型,随机分为EAE模型组和NR治疗组。EAE模型组每只小鼠按200μl/d剂量灌胃给予生理盐水,NR治疗组每只小鼠按500 mg/kg、200μl/d剂量灌胃给予NR,观察并记录各组小鼠临床评分和体质量。免疫后第28天处死小鼠,制备脾脏和脊髓冰冻切片,提取脊髓组织蛋白。HE染色检测外周炎性细胞浸润脊髓,免疫荧光染色检测小鼠脊髓CD4^(+)T细胞、CD68^(+)巨噬细胞数量,Western blot检测小鼠脊髓IFN-γ、IL-1β表达,免疫荧光染色检测小鼠脾脏ROCK-Ⅰ^(+)细胞、TLR4^(+)细胞、p-NF-κB^(+)细胞、TNF-α^(+)细胞、IL-1β^(+)细胞、IFN-γ^(+)细胞、IL-6^(+)细胞、IL-10^(+)细胞、IL-17^(+)细胞、i NOS^(+)细胞、Arg-1^(+)细胞数量。结果与EAE模型组相比,NR显著推迟EAE小鼠发病时间(P<0.05),降低临床评分(P<0.05或P<0.01),减轻体质量丢失,阻止外周炎性细胞浸润脊髓(P<0.01),减少脊髓CD4^(+)T细胞、CD68^(+)巨噬细胞数量(P<0.01),下调脊髓IFN-γ、IL-1β炎性因子表达(P<0.05),抑制小鼠脾脏ROCK-Ⅰ、TLR4、p-NF-κB表达(P<0.01),减少脾脏IFN-γ、i NOS、IL-6等促炎因子分泌(P<0.05或P<0.01),促进脾脏抗炎因子Arg-1、IL-10分泌(P<0.05或P<0.01)。结论NR能够有效缓解EAE小鼠临床症状,显著减轻外周和中枢神经系统炎症反应,其机制可能与抑制EAE小鼠脾脏Rho/ROCK信号通路和TLR4/NF-κB信号通路有关。

关键词：烟酰胺核糖实验性自身免疫性脑脊髓炎 Rho/ROCK信号通路 TLR4/NF-κB信号通路抗炎

基于SIRT1/VEGFA信号通路探讨川芎嗪调节缺血性脑卒中损伤后血管内皮细胞的新生作用研究

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中国中药杂志 2024年第1期49卷 162-174页

作者：舒梦琦戴瑶瑶宋丽娟马东刘可心苗珠月魏汝恒殷金珠马存根黄建军山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心山西晋中030619 山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030032 国药同煤集团总医院神经外科山西大同037003

该文研究川芎嗪(tetramethylpyrazine, TMP)能否通过刺激脑微血管内皮细胞促进血管新生,缓解缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke, CIS)并探讨其作用机制。体内实验:成年sprague-dawley(SD)大鼠,假手术(sham)组、大脑中动脉闭塞再灌... 详细信息

该文研究川芎嗪(tetramethylpyrazine, TMP)能否通过刺激脑微血管内皮细胞促进血管新生,缓解缺血性脑卒中(cerebral ischemic stroke, CIS)并探讨其作用机制。体内实验:成年sprague-dawley(SD)大鼠,假手术(sham)组、大脑中动脉闭塞再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion, MCAO/R)组、MCAO/R+TMP组(腹腔注射20 mg·kg^(-1))。采用Z-Longa法评估神经功能;TTC染色检测脑梗死体积,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、血管生成素(angiopoietin, Ang)和血小板衍生生长因子(platelet-derived growth factor, PDGF);免疫荧光检测Ki67、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、沉默信息调节因子1(slient information regulator 1,SIRT1);蛋白免疫印迹法(Western blot)检测VEGFA、SIRT1、血管生成素-2(angiopoietin-2,Ang-2)和血小板衍生生长因子B(platelet-derived growth factor B,PDGFB)。体外实验:培养小鼠脑微血管内皮细胞(brain-derived endothelial cells.3,Bend.3),确定TMP的最佳药物浓度;加入血管新生抑制剂卡博替尼(cabozantinib, BMS),ELISA检测VEGF、Ang和PDGF;Western blot检测VEGFA、Ang-2和PDGFB;免疫荧光染色检测CD31、CD34、Ki67;成管实验观察Bend.3细胞增殖、迁移和管腔形成的能力。加入SIRT1特异性抑制剂selisistat (EX-527)检测SIRT1和VEGFA的蛋白和免疫荧光,观察TMP对SIRT1/VEGFA通路的调控。结果显示,在体内实验中与sham组相比,MCAO/R组神经功能受损严重,脑梗死体积增大,VEGF、VEGFA、Ang、Ang-2、PDGF和PDGFB表达上升,Ki67和SIRT1表达下降(P<0.01)。与MCAO/R组相比,MCAO/R+TMP组神经功能受损症状改善、脑梗死体积明显缩小,激活了VEGF、VEGFA、Ang、Ang-2、PDGF和PDGFB、Ki67和SIRT1表达(P<0.01)。体外实验中发现与sham组相比,Bend.3细胞经糖氧剥夺复糖氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation, OGD/R)处理后被激活(P<0.05,P<0.01)。与OGD/R组相比,OGD/R+TMP组VEGF、VEGFA、Ang、Ang-2、PDGF、PDGFB、SIRT1、Ki67、CD31和CD34的表达水平上调,Bend.3细胞的成管能力增强,同时不受BMS和EX-527的抑制作用(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。由此表明,TMP能通过激活SIRT1/VEGFA通路,刺激血管新生,缓解CIS损伤。

关键词：川芎嗪(TMP) 小鼠脑微血管内皮细胞(Bend.3) 血管新生沉默信息调节因子1(SIRT1) 血管内皮生长因子A(VEGFA)

灵孢多糖对过氧化氢致SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控

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中国组织工程研究 2024年第25期28卷 4041-4047页

作者：李雁冰王记委刘晓琴郭敏芳牛晓洁孟涛苏琴王瀚斌杨立志马存根尉杰忠山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西省晋中市030619 山西大同大学脑科学研究所山西省大同市037009 山西国润制药有限公司山西省大同市038100 大同市第五人民医院山西省大同市037009

背景:目前研究证实,灵孢多糖可促进神经退行性相关疾病的神经再生。神经退行性疾病的发生与线粒体功能失调密切相关,但灵孢多糖对神经退行性疾病的细胞凋亡及线粒体功能的调控作用尚不明确。目的:探索灵孢多糖对过氧化氢诱导的SH-SY5Y... 详细信息

背景:目前研究证实,灵孢多糖可促进神经退行性相关疾病的神经再生。神经退行性疾病的发生与线粒体功能失调密切相关,但灵孢多糖对神经退行性疾病的细胞凋亡及线粒体功能的调控作用尚不明确。目的:探索灵孢多糖对过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控作用及机制。方法:SH-SY5Y细胞分为3组:对照组,过氧化氢组,灵孢多糖组。对照组细胞正常培养,过氧化氢组细胞用300μmol/L过氧化氢处理24 h,灵孢多糖组先用300μg/μL灵孢多糖干预一两个小时,然后加入300μmol/L过氧化氢干预24 h,干预结束后用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,TUNEL染色试剂盒检测细胞凋亡情况,丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶试剂盒检测丙二醛和超氧化物歧化酶活性,免疫荧光染色法和Western blot法检测凋亡、线粒体动力学相关蛋白的表达。结果与结论:①与对照组相比,过氧化氢组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著降低,细胞凋亡率、丙二醇水平显著增高,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著增高,细胞凋亡率、丙二醛水平显著下降,差异均有显著性意义(P<0.05);②与对照组相比,过氧化氢组促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表达显著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著下降,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达显著降低,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著增加,差异均有显著性意义(P<0.05);③与对照组相比,过氧化氢组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达均显著增高,线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达均显著降低,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达显著降低,线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达显著增高,差异均有显著性意义(P<0.05);④以上结果证实,灵孢多糖可通过改善线粒体功能障碍以减轻过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤和细胞凋亡。

关键词：灵孢多糖 SH-SY5Y细胞细胞凋亡线粒体功能障碍氧化应激

基于不同粮食安全底线的西安市耕地保护弹性空间研究

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自然资源情报 2024年第5期 17-24页

作者：王锐常金为李兰范田禾周林张舜禹马存霞陕西华地勘察设计咨询有限公司陕西西安710000 玉溪师范学院地理与国土工程学院云南玉溪653100

科学解析耕地“保多少”与“如何保”,对保障粮食安全和资源环境可持续发展具有重要意义。本文通过建立耕地数量底线模型,测算不同情境下的西安市耕地数量底线;构建“产能特征-健康状态-耕作条件-利用水平”的多维度耕地保护紧迫性评估... 详细信息

科学解析耕地“保多少”与“如何保”,对保障粮食安全和资源环境可持续发展具有重要意义。本文通过建立耕地数量底线模型,测算不同情境下的西安市耕地数量底线;构建“产能特征-健康状态-耕作条件-利用水平”的多维度耕地保护紧迫性评估框架;最后,基于耕地数量底线边界控制与空间尺度的区域规则约束,刻画西安市耕地保护弹性空间。研究表明,满足理论粮食安全的西安市耕地数量底线为1321.09~1323.85 km^(2);临潼区、长安区和周至县是耕地保护综合紧迫性值较高区域;至2035年,西安市耕地可休耕量为61.86 km^(2),休耕后能够满足耕地保护目标值;西安市的耕地保护弹性空间可分为优先保护、严格管控、休养生息、战略储备、整治修复和特殊保护6类,不同空间的耕地保护弹性强度、目标与任务各有侧重,优先保护空间占比不高。

关键词：粮食安全耕地保护弹性空间底线约束西安市

对比分析胸腔镜辅助下小切口与传统开胸手术治疗胸外伤的临床效果

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世界复合医学 2024年第6期10卷 125-128页

作者：牙俊锋范玉刚何宏伟马存乾吴鹏上海市第一人民医院酒泉医院(酒泉市人民医院)胸心血管外科甘肃酒泉735000

目的对比胸腔镜辅助下小切口手术和传统开胸手术治疗胸外伤的临床效果。方法选择2023年1月—2024年1月酒泉市人民医院收治的80例胸外伤患者为研究对象,根据手术方法不同分组,其中接受传统开胸手术的40例为对照组,接受胸腔镜辅助下小切... 详细信息

目的对比胸腔镜辅助下小切口手术和传统开胸手术治疗胸外伤的临床效果。方法选择2023年1月—2024年1月酒泉市人民医院收治的80例胸外伤患者为研究对象,根据手术方法不同分组,其中接受传统开胸手术的40例为对照组,接受胸腔镜辅助下小切口手术的40例为观察组,对比两组手术相关指标、凝血功能指标、术后并发症。结果观察组患者术中失血量和输血量均低于对照组,手术时间和术后住院时间均短于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。术后1周,两组凝血酶原时间均长于术前,活化部分凝血酶原时间均短于术前,D-二聚体水平均高于术前,血小板数目均低于术前,差异有统计学意义(P均<0.05);但观察组各项指标变化幅度均更小,差异有统计学意义(P均<0.05)。观察组术后并发症发生率为7.50%(3/40),低于对照组的25.00%(10/40),差异有统计学意义(χ^(2)=4.501,P<0.05)。结论在胸外伤手术治疗中,胸腔镜辅助下小切口手术相对于传统开胸手术效果更好,安全性更高。

关键词：胸外伤传统开胸手术胸腔镜辅助下小切口手术

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胸腔镜肺段切除术与胸腔镜肺叶切除术治疗老年Ⅰ期肺癌合并慢性阻塞性肺疾病的效果比较

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中国社区医师 2024年第14期40卷 64-66页

作者：牙俊锋范玉刚何宏伟马存乾翟永富上海市第一人民医院酒泉医院(酒泉市人民医院) 甘肃酒泉735000

目的:比较胸腔镜肺段切除术与胸腔镜肺叶切除术治疗老年Ⅰ期肺癌合并慢性阻塞性肺疾病的效果。方法:选取2022年1月—2023年11月于上海市第一人民医院酒泉医院进行手术治疗的60例老年Ⅰ期肺癌合并慢性阻塞性肺疾病患者作为研究对象,随机... 详细信息

目的:比较胸腔镜肺段切除术与胸腔镜肺叶切除术治疗老年Ⅰ期肺癌合并慢性阻塞性肺疾病的效果。方法:选取2022年1月—2023年11月于上海市第一人民医院酒泉医院进行手术治疗的60例老年Ⅰ期肺癌合并慢性阻塞性肺疾病患者作为研究对象,随机分为段切组与叶切组,各30例。段切组实施胸腔镜肺段切除术,叶切组实施胸腔镜肺叶清除术。比较两组治疗效果。结果:两组手术时间比较,差异无统计学意义(P>0.05);段切组术中出血量、术后引流量少于叶切组,抗生素使用时间、入住ICU时间短于叶切组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:胸腔镜肺段切除术与胸腔镜肺叶切除术治疗老年Ⅰ期肺癌合并慢性阻塞性肺疾病的效果相当,安全性均较高,但胸腔镜肺段切除术的术中出血量、术后引流量较少,患者恢复较快。

关键词：胸腔镜肺段切除术胸腔镜肺叶切除术老年 Ⅰ期肺癌慢性阻塞性肺疾病

法舒地尔通过抑制NLRP3炎症小体激活抑制Aβ_(1-42)诱导的小胶质细胞炎症反应

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中国免疫学杂志 2024年第9期40卷 1833-1837页

作者：郭敏芳章培军于婧文孟涛李艳花李娜李梦迪李玉璐宋丽娟尉杰忠马存根山西大同大学脑科学研究所大同037009 山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心晋中030619 山西医科大学生理学系太原030001 大同市第五人民医院大同037008

目的:基于NLRP3炎症小体探讨法舒地尔减轻Aβ_(1-42)诱导的BV2小胶质细胞损伤的机制。方法:BV2细胞分为:正常对照组、Aβ刺激组、Aβ+法舒地尔联合干预组、Aβ+MCC950(NLRP3抑制剂)联合干预组。显微镜下观察细胞形态;CCK8测定细胞活性;G... 详细信息

目的:基于NLRP3炎症小体探讨法舒地尔减轻Aβ_(1-42)诱导的BV2小胶质细胞损伤的机制。方法:BV2细胞分为:正常对照组、Aβ刺激组、Aβ+法舒地尔联合干预组、Aβ+MCC950(NLRP3抑制剂)联合干预组。显微镜下观察细胞形态;CCK8测定细胞活性;Griess测定NO释放量;免疫荧光染色检测NLRP3、caspase 1和IL-18表达;Western blot检测NLRP3、ASC、caspase 1、IL-1β和IL-18表达。结果:与正常对照组比较,Aβ_(1-42)刺激组BV2细胞激活,呈阿米巴样形态,活性下降,NO释放量增加,NLRP3、ASC、caspase 1、IL-1β和IL-18表达增加。法舒地尔干预和MCC950干预均可改善Aβ_(1-42)诱导的BV2细胞损伤,使细胞形态趋于正常,细胞活性有所增加,NO释放量降低,同时下调NLRP3、ASC、caspase 1、IL-1β和IL-18表达,两组间差异无统计学意义。结论:法舒地尔可能通过抑制NLRP3炎症小体激活减轻Aβ_(1-42)诱导的BV2细胞损伤和炎症反应。

关键词：法舒地尔小胶质细胞 NLRP3炎症小体炎症反应