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调节性T细胞的稳定性和可塑性

免疫学杂志 2015年第9期31卷 816-819页

作者：韩俊燕曾辉首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所新发突发传染病研究北京市重点实验室北京100015

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)表达转录因子Foxp3,在维持机体免疫平衡和自身耐受中发挥重要的作用。Treg细胞并非单一细胞群体。既往认为,Foxp3+Treg细胞较为稳定,但近年来研究表明,Foxp3+T细胞可在一定条件或病理状况下丢失Fo... 详细信息

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)表达转录因子Foxp3,在维持机体免疫平衡和自身耐受中发挥重要的作用。Treg细胞并非单一细胞群体。既往认为,Foxp3+Treg细胞较为稳定,但近年来研究表明,Foxp3+T细胞可在一定条件或病理状况下丢失Foxp3表达,转变为其他不同功能的细胞。对Treg细胞可塑性和稳定性的深入探讨,并为临床研究治疗靶点和干预措施提供新的思路。

关键词：调节性T细胞可塑性稳定性 Foxp3

发酵辣椒细菌多样性的16S rDNA测序分析

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中国食品学报 2018年第5期18卷 246-251页

作者：韩俊燕赵国忠赵建新张灏陈卫江南大学食品学院江苏无锡214122

以家庭自制的剁辣椒、酸辣椒、腌辣椒和辣椒酱为对象,研究不同样品中的微生物多样性,为分离其中的乳酸菌及开发发酵辣椒制品复合发酵剂提供参考依据。采用土壤基因组DNA提取试剂盒提取样品的基因组,然后PCR扩增细菌的16S r DNA V4区,琼... 详细信息

以家庭自制的剁辣椒、酸辣椒、腌辣椒和辣椒酱为对象,研究不同样品中的微生物多样性,为分离其中的乳酸菌及开发发酵辣椒制品复合发酵剂提供参考依据。采用土壤基因组DNA提取试剂盒提取样品的基因组,然后PCR扩增细菌的16S r DNA V4区,琼脂糖凝胶电泳验证后回收胶,荧光定量后上机进行MiSeq高通量测序,然后分析样品中细菌的多样性。结果显示:不同样品所含细菌的种类多样性和丰度存在较大的差异。在属的水平上,剁辣椒中魏斯氏菌、明串珠菌和乳杆菌是主要的菌属,丰度在16%左右;乳杆菌(61.5%)和片球菌(28.6%)是酸辣椒中主要的细菌;腌辣椒中乳杆菌的丰度达到79.4%;辣椒酱的物种多样性最为丰富,魏斯氏菌(40.7%)和乳杆菌(11%)是其主要的微生物。

关键词：发酵辣椒细菌多样性测序分析

食源性乳酸菌的分离及其在小鼠肠道的定植能力

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中国食品学报 2018年第5期18卷 239-245页

作者：王梦颖赵国忠韩俊燕赵建新张灏陈卫江南大学食品学院无锡214122

从传统发酵食品中分离出乳酸菌22株,包括植物乳杆菌7株、干酪乳杆菌3株、发酵乳杆菌3株、瑞士乳杆菌5株、鼠李糖乳杆菌2株以及保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌各1株。从上述乳酸菌中选择6株不同种类的乳杆菌做动物实验,通过实时荧光定量PCR... 详细信息

从传统发酵食品中分离出乳酸菌22株,包括植物乳杆菌7株、干酪乳杆菌3株、发酵乳杆菌3株、瑞士乳杆菌5株、鼠李糖乳杆菌2株以及保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌各1株。从上述乳酸菌中选择6株不同种类的乳杆菌做动物实验,通过实时荧光定量PCR法分析不同时期小鼠粪便中各种乳杆菌的数量,检测其在小鼠肠道定植能力。结果发现菌株之间肠道定植能力存在较大差异,植物乳杆菌H7和干酪乳杆菌C6具有最好的肠道定植能力,能在小鼠肠道最少定植14 d,而瑞士乳杆菌C36、鼠李糖乳杆菌Y2和发酵乳杆菌Z1则基本不定植。

关键词：乳酸菌实时荧光定量PCR 肠道定植

黄连解毒汤对高脂饮食apoE^(-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应影响的研究

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中国中西医结合杂志 2013年第11期33卷 1520-1525页

作者：马雅銮王蓓蓓韩俊燕李蕊张卫梅李彤陈冰苏静王宪波曾辉中国中医科学院中医基础理论研究所分子生物学实验室北京100700 首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所北京100011

目的观察黄连解毒汤对高脂饮食喂养的apoE基因敲除(apoE-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应的影响。方法以8只野生型C57BL6小鼠为野生普食组,24只apoE-/-小鼠随机分为apoE-/-普食组、apoE-/-高脂组、apoE-/-高脂加中药组,每组8只。... 详细信息

目的观察黄连解毒汤对高脂饮食喂养的apoE基因敲除(apoE-/-)小鼠全身和主动脉血管局部免疫反应的影响。方法以8只野生型C57BL6小鼠为野生普食组,24只apoE-/-小鼠随机分为apoE-/-普食组、apoE-/-高脂组、apoE-/-高脂加中药组,每组8只。普食组与高脂组分别给予普食和高脂饮食4周。ApoE-/-高脂加中药组同时给予黄连解毒汤5 g/(kg·d)灌胃,其他小鼠采用等量纯净水灌胃。4周后,检测血脂水平、外周血单核细胞比例及其表面Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)和清道夫受体CD36的表达;检测主动脉病理变化和主动脉血管局部细胞因子表达水平;进一步采用脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激检测血浆细胞因子的水平。结果 (1)与野生普食组比较,apoE-/-普食组TC、TG和LDL-C水平显著升高(P0.05)。(2)与野生普食组比较,apoE-/-普食组外周血单核细胞比例无明显变化,TLR4表达水平显著增多(P0.05);黄连解毒汤干预4周后,与apoE-/-高脂组比较,apoE-/-高脂加中药组MCP-1表达显著下调,而IL-10水平进一步显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)与野生普食组比较,apoE-/-普食组主动脉血管壁炎症因子IFN-γ、MCP-1、TNF-α和IL-1βmRNA水平显著升高,抑炎因子IL-10亦显著升高(P<0.05,P<0.01);与apoE-/-普食组比较,apoE-/-高脂组主动脉血管壁不仅IFN-γ、MCP-1、TNF-α和IL-1β水平进一步显著升高,且抑炎因子IL-12、IL-10和TGF-β亦显著升高(P<0.05,P<0.01);黄连解毒汤干预4周后,与apoE-/-高脂组比较,apoE-/-高脂加中药组主动脉血管壁炎症因子MCP-1、TNF-α、IL-1β和IL-12显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论高脂饮食引发apoE-/-小鼠全身性炎症反应和血管局部炎症反应,血管局部炎症反应程度超过全身性炎症反应。黄连解毒汤干预后能够减轻炎症反应,并且对血管局部的作用更为显著,同时增强全身抗炎反应。

关键词：黄连解毒汤 apo E基因敲除小鼠高脂血症单核细胞细胞因子

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调节性T细胞的稳定性和可塑性

调节性T细胞的稳定性和可塑性

祛痰化瘀解毒方药对高脂血症痰瘀互阻证患者单核细胞亚群异常的影响

第九届全国免疫学学术大会

作者：韩俊燕曾辉首都医科大学附属北京地坛医院

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是CD4T细胞的一个亚群,表达转录因子Foxp3,在维持机体免疫平衡和自身耐受中发挥重要的作用。Foxp3(forkhead box P3)是Treg细胞发育和维持功能的重要分子,既往认为,Foxp3Treg细胞较为稳定。但近年... 详细信息

调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)是CD4T细胞的一个亚群,表达转录因子Foxp3,在维持机体免疫平衡和自身耐受中发挥重要的作用。Foxp3(forkhead box P3)是Treg细胞发育和维持功能的重要分子,既往认为,Foxp3Treg细胞较为稳定。但近年来研究表明,Foxp3T细胞具有一定的不稳定性(instability)和可塑性(plasticity),在一定条件或病理状况下丢失Foxp3表达,转变为其他不同功能的细胞。在探讨Treg细胞的可塑性和稳定性方面,要考虑人和小鼠Treg细胞的异质性,以及DNA甲基化在维持FoxP3稳定性方面发挥的作用。因此,采用功能稳定性Treg细胞用于临床治疗将显得尤为重要。对Treg细胞可塑性和稳定性的深入探讨,并为临床研究治疗靶点和干预措施提供新的思路。

关键词：调节性T细胞稳定性可塑性 Foxp3

来源： cnki会议评论

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中国中西医结合杂志 2011年第1期31卷 23-27页

作者：马雅銮王亚红韩俊燕郝禹陈冰宋剑南韩俊阁尚涛徐丽丽王宪波曾辉中国中医科学院中医基础理论研究所北京100700 北京中医药大学附属东直门医院北京100700 首都医科大学传染病研究所北京100069

目的研究高脂血症痰瘀互阻证患者外周血单核细胞亚群比例及其表面受体TLR4、CD163和CD36表达变化,初步探讨和评价祛痰化瘀解毒方药干预的治疗效果。方法采用流式细胞仪将单核细胞分为CD14highCD16-(Mo1)、CD14highCD16+(Mo2a)和CD14lowC... 详细信息

目的研究高脂血症痰瘀互阻证患者外周血单核细胞亚群比例及其表面受体TLR4、CD163和CD36表达变化,初步探讨和评价祛痰化瘀解毒方药干预的治疗效果。方法采用流式细胞仪将单核细胞分为CD14highCD16-(Mo1)、CD14highCD16+(Mo2a)和CD14lowCD16+(Mo2b)3个亚群。检测83例高脂血症痰瘀互阻证患者和42名同龄健康对照者外周血单核细胞亚群比例及其表面TLR4、CD163和CD36的表达水平。对其中11例接受祛痰化瘀治疗(对照组)和10例在祛痰化瘀基础上加用解毒治疗(治疗组)的患者,比较治疗前后外周血单核细胞亚群比例及其表面TLR4、CD163和CD36的表达变化。结果患者外周血单核细胞Mo2a亚群比例较正常对照显著升高(5.35±2.57vs3.09±2.38,P<0.01)。Mo1亚群TLR4受体的表达较健康组降低(50.73±24.45vs69.92±21.06,P<0.01),其余亚群差异无统计学意义。经过4周治疗,治疗组患者Mo2a亚群细胞比例明显地降低(疗后/疗前3.73±1.05vs5.50±2.06,P=0.043;对照组疗后/疗前4.20±1.81vs5.65±1.89,P=0.097)。两干预组对TLR4、CD36、CD163的表达影响差异无统计学意义。结论高脂血症痰瘀互阻证患者外周血单核细胞Mo2a亚群比例及Mo1表面受体TLR4的表达具有特征性改变,可能与高脂血症导致的免疫损伤有关;祛痰化瘀解毒方药能较好地改善Mo2a亚群比例失调。

关键词：高脂血症痰瘀互阻证单核细胞亚群祛痰化瘀解毒方药

婴儿源益生性双歧杆菌的筛选及肠道定殖性研究

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现代食品科技 2016年第10期32卷 14-21页

作者：韩俊燕赵国忠杨波刘小鸣张灏陈卫江南大学食品学院江苏无锡214122

本研究旨在从婴儿粪便中筛选出具有潜在益生特性的双歧杆菌,并探究其肠道定殖情况,为双歧杆菌的产品开发提供优良的菌株。采用MRS培养基对样品进行分离纯化,菌株经F6PPK检测及16S r DNA测序鉴定,之后进行模拟胃肠液、胆盐耐受性、对食... 详细信息

本研究旨在从婴儿粪便中筛选出具有潜在益生特性的双歧杆菌,并探究其肠道定殖情况,为双歧杆菌的产品开发提供优良的菌株。采用MRS培养基对样品进行分离纯化,菌株经F6PPK检测及16S r DNA测序鉴定,之后进行模拟胃肠液、胆盐耐受性、对食源性致病菌(大肠杆菌、沙门氏菌、单增李斯特菌等)的抑制及对HT-29细胞的粘附能力测定,将筛选出的菌株进行动物实验,测定其肠道定殖能力。分离到的27株双歧杆菌,经分子生物学鉴定为7个不同的种:Bifidobacterium longum、Bifidobacterium breve、Bifidobacterium bifidum、Bifidobacterium pseudocatenulatum、Bifidobacterium infantis、Bifidobacterium animalis和Bifidobacterium adolescentis。体外实验表明,*** A9、*** A4、*** B6、*** C6、*** F8和*** H6等具有较强的潜在益生特性;动物实验表明,*** H6和*** C6具有较强的肠道定殖能力。*** C6和*** H6有望作为优良的益生性菌株,应用于双歧杆菌的产品开发。

关键词：益生特性双歧杆菌筛选定殖

酱油发酵过程中的耐盐乳酸菌筛选及对低盐固态酱油品质的影响

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食品工业科技 2015年第13期36卷 184-188页

作者：赵国忠王梦颖姚云平韩俊燕陈卫江南大学食品学院食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122

本文通过对酱醪中耐盐乳酸菌的筛选,成功分离出一株耐18%盐度的乳酸菌,经过16S r DNA测序鉴定,确定为一株植物乳杆菌。在酱油酿造过程中添加该耐盐植物乳杆菌,无盐固形物、氨基酸态氮、还原糖和总酸含量等理化指标都有所上升。经过液相... 详细信息

本文通过对酱醪中耐盐乳酸菌的筛选,成功分离出一株耐18%盐度的乳酸菌,经过16S r DNA测序鉴定,确定为一株植物乳杆菌。在酱油酿造过程中添加该耐盐植物乳杆菌,无盐固形物、氨基酸态氮、还原糖和总酸含量等理化指标都有所上升。经过液相测定,发现酱油中乳酸含量比空白增加2倍左右。挥发性风味物质中酮类和酚类物质增加2倍左右,醇类物质稍有增加。本研究为进一步安全有效提高酱油风味物质奠定理论依据。

关键词：酱油乳酸菌筛选发酵

黄连解毒汤调控单核、巨噬细胞及泡沫细胞分化的实验研究

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中国中西医结合杂志 2014年第9期34卷 1096-1102页

作者：李彤韩俊燕王蓓蓓陈冰李玉梅于志静薛欣张剑平王宪波曾辉马雅銮首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所北京100011 中国中医科学院中医基础理论研究所分子生物学实验室北京100700

目的观察黄连解毒汤体内调控载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠外周血单核细胞亚型分化,黄连解毒汤含药血清体外调控巨噬细胞和泡沫细胞亚型分化的作用。方法将15只ApoE^(-/-)小鼠随机分为ApoE^(-/-)普食组、ApoE^(-/-)高脂组及ApoE^(-... 详细信息

目的观察黄连解毒汤体内调控载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠外周血单核细胞亚型分化,黄连解毒汤含药血清体外调控巨噬细胞和泡沫细胞亚型分化的作用。方法将15只ApoE^(-/-)小鼠随机分为ApoE^(-/-)普食组、ApoE^(-/-)高脂组及ApoE^(-/-)高脂加中药治疗组,每组5只,分别给予普食及高脂饮食4周。5只C57BL/6野生型小鼠作为野生普食对照组,ApoE^(-/-)高脂加中药组给予黄连解毒汤5 g/(kg·d)灌胃,其他组给予等量纯净水灌胃。4周后流式细胞仪检测外周血单核细胞亚型。另选30只SD大鼠给予黄连解毒汤5 g/(kg·d)灌胃,每12 h 1次,共5次,制备黄连解毒汤含药血清。采用5%黄连解毒汤含药血清对体外原代骨髓衍生的巨噬细胞(bone marroW-derived macrophage,BMDM)和泡沫细胞分化进行干预,流式细胞仪检测巨噬细胞和泡沫细胞表面受体CD206表达(CD206+M2型)比例;实时定量PCR检测巨噬细胞和泡沫细胞M1型因子Nos2和M2型因子Arg1的表达。结果 ApoE^(-/-)小鼠高脂饮食喂养4周后,外周血炎症型单核细胞(Ly6C^(high))比例增高;黄连解毒汤干预可显著降低炎症型单核细胞比例(P<0.05)。与对照血清比较,5%黄连解毒汤含药血清可显著增加CD206+M2型BMDM的比例(P=0.034)。实时定量PCR结果显示,含药血清可上调巨噬细胞M2亚型基因Arg1的表达水平(P<0.05),抑制巨噬细胞M1亚型基因Nos2的表达水平(P=0.017)。在ox-LDL促进M2型泡沫细胞分化的基础上,黄连解毒汤含药血清可进一步提高CD206+M2型泡沫细胞比例及Arg1的表达(P<0.01)。黄连解毒汤含药血清抑制Th1因子作用下的M2型泡沫细胞向M1型逆转,显著提高Arg1表达水平,降低Nos2表达水平(P<0.01)。结论黄连解毒汤能降低高脂导致的ApoE^(-/-)小鼠外周血炎症性单核细胞亚群比例;黄连解毒汤含药血清体外促进M2型巨噬、泡沫细胞分化。黄连解毒汤可能通过调节单核、巨噬、泡沫细胞的功能性分化,从而减缓、抑制高脂血症引发的AS的发生、发展。

关键词：黄连解毒汤高脂血症/动脉粥样硬化单核细胞巨噬细胞分化