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作者：陈毅保河南工业大学

学位级别：硕士

黄曲霉毒素B(AFB)是一种次级代谢产物,具有高度的肝毒性、肾毒性和免疫毒性。AFB以其毒性、致癌和致畸突变作用而闻名,被世界卫生组织归类为I类致癌物。花生是最容易被黄曲霉毒素浸染的作物之一,花生脱脂后的副产物花生粕富含花生蛋白,... 详细信息

黄曲霉毒素B(AFB)是一种次级代谢产物,具有高度的肝毒性、肾毒性和免疫毒性。AFB以其毒性、致癌和致畸突变作用而闻名,被世界卫生组织归类为I类致癌物。花生是最容易被黄曲霉毒素浸染的作物之一,花生脱脂后的副产物花生粕富含花生蛋白,但因毒素含量超标使其在饲料和食品领域的应用受限。因此AFB的脱除成为研究的热点。目前AFB的脱除方法主要分为物理、化学和生物脱毒法,生物脱毒法因具有效率高、能耗低、绿色环保等优点,受到人们的青睐。因此本研究选用生物法脱除AFB,采用香豆素为唯一碳源,以AFB降解率为指标,从不同原料中筛选出AFB高效降解菌株Burkholderia sp.D6,并对其降解AFB的产物结构和毒性进行表征,探究Burkholderia sp.D6对AFB的降解机制;结合转录组技术对优势菌株Burkholderia sp.D6中的黄曲霉毒素降解酶及其相关基因进行挖掘,并揭示其对AFB的代谢途径;最后将Burkholderia sp.D6应用于花生粕中AFB的降解,生产饲用发酵花生粕并分析花生粕品质。主要研究结果如下:选取土壤、花生、花生粕和羊粪等原料为筛菌来源,进行富集培养,经过初筛和复筛后挑选出高效降解AFB的菌株,并对发酵条件进行优化。经以香豆素为唯一碳源的摇瓶培养和平板初筛,获得90株生长状态良好的细菌。加入AFB标准溶液进行复筛后得到16株可有效脱除AFB的菌株,筛选AFB降解率(66.93%)最高的D6为优势菌株,经菌株鉴定确定D6为伯克霍尔德属(Burkholderia),并对Burkholderia sp.D6的生长曲线进行测定,结果表明Burkholderia sp.D6在LB培养基孵育18 h后进入对数生长期。以AFB脱除率为指标,通过正交优化实验得到Burkholderia sp.D6脱除黄曲霉毒素B的最佳条件为:发酵时间为84 h,发酵温度为37℃,接种量为10%,初始p H为7.0,在此条件下AFB脱除率为(87.91±2.32)%。选用不同方式处理发酵液组分,确定D6对AFB的生物脱除方式,通过UPLC-MS/MS和NMR表征AFB的降解产物,并通过MTT法检测降解产物的细胞毒性。以细菌发酵液、发酵液的上清液和菌体悬浮液分别降解AFB,发酵液和上清液的效果分别为87.91%和89.12%,无显著性差异(P>0.05)。上清液的降解率远高于菌悬液,表明Burkholderia sp.D6脱除AFB的方式为生物降解。使用UPLC-MS/MS、HNMR、COSY等检测方法,鉴定出三种AFB的降解产物分别为P1:CHO;P2:CHO;P3:CHNO,并推测出其结构式。使用Hep G2检测降解产物的细胞毒性,发现降解产物共培养的细胞状态优于AFB共培养的细胞,表明降解产物的细胞毒性与AFB相比显著降低。采用转录组学技术对Burkholderia sp.D6中黄曲霉毒素降解酶基因及差异表达基因进行剖析。以不加AFB的样品为对照,研究Burkholderia sp.D6降解AFB过程中转录组的差异表达情况。结果表明,检测到的总基因数目为3541个,与对照相比,D6菌株显著差异基因有116个,其中显著上调差异基因51个,显著下调差异基因65个。GO富集分析发现,在生物过程中上调表达最多的基因主要涉及单有机体过程、代谢过程、细胞过程和本地化。细胞组分中上调基因主要集中在细胞、细胞部分、膜、膜部分、以及大分子复合物。分子功能中上调基因主要与催化活性、结合和运输活性有关。KEGG富集分析和Pathway代谢通路分析发现,Burkholderia sp.D6中存在大量AFB降解过程直接相关的酶类,如氧化还原酶、脱氢酶、过氧化氢酶和双加氧酶等,以及一些可能与AFB降解相关的酶的编码基因。此外还发现参与蛋白输出和细菌分泌系统的sec D、sec E、sec F、sec G、sec Y、yaj C和yid C等基因表达上调了1-3倍,cat、pca、paa等与芳香化合物代谢相关的基因显著上调。因此,推测Burkholderia sp.D6降解AFB的整个过程可能为:Burkholderia sp.D6受到AFB的刺激,AFB降解相关酶(氧化还原酶、过氧化氢酶等)上调表达,AFB在胞外被分解P1、P2、P3等产物。随后产物在双加氧酶和酯酶的作用下裂解为邻苯二酚、香草醛和苯甲酸等小分子芳香化合物,并被膜蛋白转运至细胞内部转化为乙酰辅酶A或草酰乙酸,最终进入TCA循环,为机体代谢利用。对Burkholderia sp.D6发酵花生粕的条件进行优化,并对发酵花生粕的品质进行分析。研究Burkholderia sp.D6固态发酵花生粕过程中,发酵时间、温度、菌株接种量和料液比等对花生粕中的AFB降解率的影响,通过响应面优化实验对Burkh

关键词：黄曲霉毒素B1 Burkholderia sp.D6 降解机理转录组固态发酵

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生物技术对黄曲霉毒素B_(1)的脱除及机制研究进展

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中国油脂 2023年第7期48卷 109-114页

作者：陈毅保杨趁仙刘昆仑李艳河南工业大学粮油食品学院郑州450001

黄曲霉毒素是危害最大的真菌毒素之一,而黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))是黄曲霉毒素中毒性最大的一种,具有高毒性、致癌、致畸和致突变的作用,对动物和人类健康造成危害。为了有效脱除AFB_(1),综述了近年来研究的具有解毒作用的微生物,介绍... 详细信息

黄曲霉毒素是危害最大的真菌毒素之一,而黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))是黄曲霉毒素中毒性最大的一种,具有高毒性、致癌、致畸和致突变的作用,对动物和人类健康造成危害。为了有效脱除AFB_(1),综述了近年来研究的具有解毒作用的微生物,介绍了采用生物技术脱除AFB_(1)的方法,重点探讨了生物脱除AFB_(1)机制。用于脱除AFB_(1)的菌株有芽孢杆菌、假单胞菌、乳酸菌、非产毒曲霉等,可采用单菌种发酵、多菌种协同发酵和菌-酶协同作用脱除AFB_(1)。生物脱除AFB_(1)机制主要为降解脱除和吸附脱除。可进一步筛选具有高优良能力的菌株以及更深层次地研究微生物脱毒的机制,探索微生物制剂对AFB_(1)的降解作用。

关键词：生物法脱毒黄曲霉毒素B_(1) 脱除机制

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水酶法提油技术及其对植物油脂品质影响的研究进展

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食品与发酵工业 2023年第9期49卷 365-372页

作者：李天赐杨趁仙刘昆仑陈复生李艳陈毅保河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

水酶法作为一种“高效、环保、安全”提取植物油的方法逐渐成为研究热点。文章综述了水酶法提油过程中酶制剂的选择,并且对水酶法与其他辅助技术的联用进行了总结。同时,分析了水酶法对植物油脂品质的影响,总结了水酶法提取植物油过程... 详细信息

水酶法作为一种“高效、环保、安全”提取植物油的方法逐渐成为研究热点。文章综述了水酶法提油过程中酶制剂的选择,并且对水酶法与其他辅助技术的联用进行了总结。同时,分析了水酶法对植物油脂品质的影响,总结了水酶法提取植物油过程中存在的问题并对其发展前景进行了展望。

关键词：水酶法酶提取油脂

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界面蛋白对水酶法提取植物油脂过程中乳状液稳定性影响的研究进展

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食品科学 2023年第17期44卷 188-195页

作者：李天赐陈毅保刘昆仑陈复生杨趁仙段晓杰朱婷伟河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

水酶法提取植物油脂的过程中极易形成稳定的乳状液,乳状液的形成极大限制了油脂的提取。由界面蛋白、磷脂和碳水化合物所形成界面膜的结构和性质会影响乳状液的稳定性,而界面蛋白是组成界面膜的主要成分之一,其在界面膜上的数量、结构... 详细信息

水酶法提取植物油脂的过程中极易形成稳定的乳状液,乳状液的形成极大限制了油脂的提取。由界面蛋白、磷脂和碳水化合物所形成界面膜的结构和性质会影响乳状液的稳定性,而界面蛋白是组成界面膜的主要成分之一,其在界面膜上的数量、结构和性质对乳状液的性质和稳定性有显著影响,对乳状液进行破乳是提高油脂含量的关键。本文简要介绍乳状液的主要组成成分、性质及其影响因素,重点综述界面蛋白浓度、结构和性质对乳状液稳定性的影响,并从界面蛋白变化角度总结乳状液破乳机理,以期为后期水酶法提取植物油脂过程中乳状液的破乳研究提供理论参考。

关键词：界面蛋白水酶法提取乳状液稳定性

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黄曲霉毒素B_(1)降解菌株的分离鉴定、发酵条件的优化及活性组分分析

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中国油脂 2024年第1期49卷 120-126页

作者：陈毅保刘昆仑杨趁仙李艳李天赐贾叶萍张微漾河南工业大学粮油食品学院郑州450001

为筛选出一株高效降解黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))的菌株,选取土壤为菌株来源,进行富集培养,经过以香豆素为唯一碳源的初筛和添加AFB_(1)的复筛后,对筛选得到的各菌株进行16S rDNA鉴定,比对其测序结果,选取降解AFB_(1)最高的菌株,探究发... 详细信息

为筛选出一株高效降解黄曲霉毒素B_(1)(AFB_(1))的菌株,选取土壤为菌株来源,进行富集培养,经过以香豆素为唯一碳源的初筛和添加AFB_(1)的复筛后,对筛选得到的各菌株进行16S rDNA鉴定,比对其测序结果,选取降解AFB_(1)最高的菌株,探究发酵时间、发酵温度、初始pH、接种量、培养基对菌株降解AFB_(1)的影响规律,通过正交试验优化发酵条件,并对降解方式进行初步探索。结果表明:经过初筛和复筛得到7株能够降解AFB_(1)的菌株,经鉴定均为伯克霍尔德菌属,其中Burkholderiasp.D6的AFB_(1)降解率最高;最优发酵条件为以LB培养基为发酵培养基、发酵时间84h、发酵温度37℃、初始pH 7.0、接种量10%,在此条件下Burkholderiasp.D6对AFB_(1)的降解率为(87.91±2.32)%;初步判断降解AFB_(1)的活性组分是蛋白质或者酶。综上,通过筛选得到了一种能够高效降解AFB_(1)的菌株,蛋白质或酶参与了AFB_(1)的降解。

关键词：黄曲霉毒素B_(1) 伯克霍尔德菌降解

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花生粕固态发酵产物的抗氧化活性研究

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粮食与油脂 2023年第9期36卷 123-127页

作者：张微漾陈毅保王怡雯侯春艳周森笛杨趁仙河南工业大学粮油食品学院河南郑州450001

采用6株菌株对花生粕进行固态发酵。以花生粕固体发酵产物对DPPH自由基的清除率为指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化发酵工艺,并对花生粕固体发酵产物进行抗氧化活性分析。结果表明:最优发酵工艺为以花生粕质量为基准,接菌量12... 详细信息

采用6株菌株对花生粕进行固态发酵。以花生粕固体发酵产物对DPPH自由基的清除率为指标,在单因素试验的基础上通过正交试验优化发酵工艺,并对花生粕固体发酵产物进行抗氧化活性分析。结果表明:最优发酵工艺为以花生粕质量为基准,接菌量12%、含水量30%、发酵时间24 h、发酵温度40℃。在此条件下,制备的花生粕固体发酵产物对DPPH自由基的清除率为91.18%,且在花生粕固态发酵产物中起抗氧化活性的物质是小分子花生抗氧化肽。

关键词：花生粕固态发酵抗氧化活性

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剪切流动亚临界转捩中的时空间歇性和相变研究进展

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中国科学:物理学力学天文学 2025年第1期 145-155页

作者：宋保方北京大学工学院航空航天工程系湍流与复杂系统国家重点实验室

剪切流动中层流向湍流的转捩是流体力学中的一个经典难题.近些年在亚临界转捩方面取得了若干重要进展,特别是在转捩的时空特征方面.研究发现,亚临界转捩中湍流以局地湍流形式存在,且表现出复杂的时空间歇性.对局地湍流结构及其时空复杂... 详细信息

剪切流动中层流向湍流的转捩是流体力学中的一个经典难题.近些年在亚临界转捩方面取得了若干重要进展,特别是在转捩的时空特征方面.研究发现,亚临界转捩中湍流以局地湍流形式存在,且表现出复杂的时空间歇性.对局地湍流结构及其时空复杂性的研究逐步揭示了转捩现象和统计物理中的连续型相变之间的关系:流动转捩可能属于一个可描述广泛临界现象的相变普适类,即导向逾渗相变普适类.目前学界仍在试图证明这种相变比拟适用于所有壁面剪切流动中的亚临界转捩.近期在泰勒-库埃特流动实验中给出了相变的直接证据,但对于管道和槽道流动,由于转捩临界点附近系统演化的巨大时间和空间尺度,实验和计算都难以足够靠近临界点进行直接验证,而且槽道流转捩临界点附近湍流的时空特征与导向逾渗相变之间的关系仍不明晰.因而,该比拟的普适性还有待进一步的确认.

关键词：剪切流动亚临界转捩局地湍流时空间歇性相变

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基于一体化结构光纤加速度计的三维光纤矢量水听器

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声学学报 2025年第1期 157-164页

作者：陈毅刘飞佟昊阳李文静金晓峰徐平浙江大学信息与电子工程学院杭州应用声学研究所北京科技大学计算机与通信工程学院

提出了一种基于一体化结构光纤加速度计的同振式三维光纤矢量水听器。利用质量–弹簧系统的一体化结构设计及其工作原理,研制了基于一体化结构的光纤加速度计。在此基础上,采用推挽式结构和6只光纤加速度计,设计制作了一只同振式三维光... 详细信息

提出了一种基于一体化结构光纤加速度计的同振式三维光纤矢量水听器。利用质量–弹簧系统的一体化结构设计及其工作原理,研制了基于一体化结构的光纤加速度计。在此基础上,采用推挽式结构和6只光纤加速度计,设计制作了一只同振式三维光纤矢量水听器。利用驻波管比较法和差分延时外差解调技术进行测试,结果表明,该光纤矢量水听器在20～500 Hz频率范围有较平坦的加速度相移灵敏度频率响应。以X通道为例,其平均灵敏度为34.7 dB (re. 1 rad/(m·s-2)),与声质点振动理论计算结果（36.5 dB）和有限元仿真结果（35.5 dB）接近。

关键词：矢量水听器光纤加速度计相移灵敏度

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越南“冯兴故事”的塑造及其历史书写

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古代文明（中英文） 2025年第1期19卷 142-155,M0007页

作者：陈国保吴剑文广西师范大学越南研究院、华南边疆与周边国家研究中心广西桂林541004 广西师范大学历史文化与旅游学院广西桂林541004

“冯兴故事”是越南民间流传的关于中国唐代安南唐林州土酋冯兴率众起事的传说,已知最早的文本见于越南陈朝李济川编撰的汉文小说《越甸幽灵集》。《大越史记全书》以此补史而记录的唐林冯兴率众反抗唐代安南都护高正平的事迹,是后世建... 详细信息

“冯兴故事”是越南民间流传的关于中国唐代安南唐林州土酋冯兴率众起事的传说,已知最早的文本见于越南陈朝李济川编撰的汉文小说《越甸幽灵集》。《大越史记全书》以此补史而记录的唐林冯兴率众反抗唐代安南都护高正平的事迹,是后世建构的。根据中国典籍以及越南早期文献的记载,唐贞元七年发动安南叛乱的地方土著首领为杜英翰而非冯兴。通过越南国史引冯兴传说入正史的事实不难看出,有关“冯兴故事”的历史建构是在后黎朝建立之后才完成的。由此反映出,如何书写古代中国郡县交州(安南)的古史,一直是古代越南自主建国以后知识精英着力建构历史叙事时的重要问题。越南历代王朝试图通过对所谓以往祖先英雄故事及其人物形象的塑造,渲染反抗中原王朝的南疆交州(安南)地方起事,借以强化越南的国家意识和认同。

关键词： “冯兴故事” 唐林安南豪酋杜英翰之乱越史书写

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降香黄檀中幼林树冠生物量研究

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热带作物学报 2025年第1期46卷 162-170页

作者：余慧霖刘慧兰张学丰张建龙陈佳欣陈毅青杨怀海南大学热带农林学院海南海口570228 海南省林业科学研究院(海南红树林研究院) 海南海口571199 国际竹藤中心三亚研究基地海南三亚572000

研究降香黄檀(Dalbergia odorifera ***)人工林树冠生物量的分布特征,可以为合理的评估林分生物量和调整树冠结构提供理论依据。本研究以海南东方市林龄为10~12 a的降香黄檀人工林为研究对象,设置2种不同立地条件样地(S_(1)和S_(2)),对4... 详细信息

研究降香黄檀(Dalbergia odorifera ***)人工林树冠生物量的分布特征,可以为合理的评估林分生物量和调整树冠结构提供理论依据。本研究以海南东方市林龄为10~12 a的降香黄檀人工林为研究对象,设置2种不同立地条件样地(S_(1)和S_(2)),对4.5 m以上样木截冠处理,采用分层切割法和全量称重法获取树冠层各器官生物量,建立各器官最优生物量拟合方程。结果表明:(1)冠层各器官中生物量大小顺序为裸枝>枝皮>叶片;裸枝、枝皮和冠层总生物量为S_(1)>S_(2),叶片生物量则为S_(1)

关键词：降香黄檀树冠生物量分布特征拟合方程

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