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周期型马来丝虫复合基因重组质粒和相应表达蛋白的免疫学研究

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中华地方病学杂志 2014年第3期33卷 280-285页

作者：王慧方政徐倩陆施娟钱一言徐怿琳方浩徐邦生南通大学医学院寄生虫学教研室 226001

目的构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂／3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmcPI／，BmGAPDH）复合基因重组质粒，并转染人宫颈癌细胞（Hela）进行重组蛋白表达。将重组质粒和相应表达蛋白进行免疫学研究比较。为研制新型的抗丝虫基因工程疫... 详细信息

目的构建周期型马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂／3-磷酸甘油醛脱氢酶（BmcPI／，BmGAPDH）复合基因重组质粒，并转染人宫颈癌细胞（Hela）进行重组蛋白表达。将重组质粒和相应表达蛋白进行免疫学研究比较。为研制新型的抗丝虫基因工程疫苗提供理论及实验依据。方法扩增周期型马来丝虫目的编码基因。将目的基因片段和载体分别双酶切后进行连接，构建复合基因重组质粒pcDNA3．1（＋）-BmCPI/BmGAPDH，鉴定后转染Hela细胞，以G418筛选转染细胞，进而通过RT-PCR和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。亲和层析纯化所表达的重组蛋白并通过免疫蛋白印迹法（Westernblot）对纯化的重组蛋白进行生物学鉴定。60只BALB／c小鼠分5组，每组12只，第2、4、6周分别免疫1次。磷酸盐缓冲液（PBS）对照组为注射PBS100μl；空质粒／CpG对照组为注射pcDNA3．1100μg和CpG30μg；复合重组质粒／CpG组为注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH100μg和CpG30μ；复合重组蛋白／CpG组为注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH复合重组蛋白50P-g和CpG30μg；复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组前2次注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH100μg和CpG30μg；后1次注射pcDNA3．1-BmCPI／BmGAPDH复合重组蛋白50μ和CpG30μg。用RT—PCR方法检测肌肉组织内目的基因；用酶联免疫吸附试验（ELISA）、特异性增殖试验（MTT法）分别检测免疫小鼠血清抗体效价、T淋巴细胞刺激增殖指数和血清中细胞因子干扰素（INF）-γ、白细胞介素（IL）-4水平。结果复合重组质粒pcDNA3．1（＋）-BmCPI／BmGAPDH免疫小鼠后，从小鼠肌肉组织扩增出目的基因。复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组小鼠免疫4、6周后血清抗体效价（1695．12±1．43、3199．63±1．34）均高于复合重组质粒／CpG组（712．69±1．08、1510．08±1．43，P均〈0．05）和复合重组蛋白／CpG组（800．02±1．34、1510．08±1．43，P均〈0．05）；第6周的复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组小鼠淋巴细胞刺激增殖指数（1．629±0．235）高于复合重组蛋白组（1．248±0．110，P〈0．05）；免疫4、6周后，复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组和复合重组质粒／CpG组小鼠血清IFN-γ水平[（101．660±5．101）、（178．265±7．139）mg／L，（102．067±3．722）、（115．148±6．031）mg／L]均高于复合重组蛋白组[（75．438±2．102）、（82．004±3．777）mg／L，P均〈0．05]；免疫后6周，复合重组质粒／复合重组蛋白／CpG组和复合重组蛋白／CpG组的小鼠血清IL-4水平[（75．385±3．318）、（46．363±3．672）mg／L]均明显高于复合重组质粒／CpG组[（36．691±3．443）mg／L，P均〈0．05）。结论pcDNA3．1-BmCPL／BmGAPDH核酸疫苗和相应蛋白疫苗均可诱导BALB／c小鼠产生特异性体液和细胞免疫应答反应。核酸疫苗-蛋白疫苗联合免疫效果有明显的优势。

关键词：马来丝虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂 3-磷酸甘油醛脱氢酶复合基因表达蛋白免疫

两种抗感染用药在预防种植牙术后感染中的临床研究

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中国科技期刊数据库医药 2021年第9期 32-33页

作者：钱一言南通市通州区人民医院口腔科江苏南通226300

探讨全身应用奥硝唑联合罗红霉素以及局部应用甲硝唑联合盐酸米诺环素在预防种植牙术后感染中临床效率。方法:选择南通市通州区人民医院口腔科2019年3月~2021年3月行种植手术的患者61作为研究对象。通过随机数字的方法,将61名研究对象... 详细信息

探讨全身应用奥硝唑联合罗红霉素以及局部应用甲硝唑联合盐酸米诺环素在预防种植牙术后感染中临床效率。方法:选择南通市通州区人民医院口腔科2019年3月~2021年3月行种植手术的患者61作为研究对象。通过随机数字的方法,将61名研究对象分成全身组与局部组,全身组30人,局部组31人。给予全身组病患口服红罗霉素奥硝挫。局部组的种植体周围及切口处涂抹给凝胶性甲硝唑和盐酸米诺环素,并且配合其他抗菌药物。结果:全身组的有效率(96.67%)低于局部组的有效率(100%),P>0.05,比较没有体现出统计学的差异性。在手术一天之后。全身组合局部组的疼痛评分没有体现出统计学差异,P>0.05。在手术的第二和第三天,局部组的疼痛感明显低于全身组,P<0.05,比较具有明显的统计学差异。局部组的并发症发生情况(9.68%)明显好于全身组并发症的发生情况(26.67%)。P<0.05,比较具有明显的统计学差异。结论:在给病患进行牙种植手术之后,通过采取局部盐酸米诺环素配合甲硝锉的方法能够有效降低手术中的感染情况,效果优于全身用药,建议在临床上推广使用。

关键词：牙种植感染预防全身局部

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周期型马来丝虫复合基因真核表达体系的建立

现代预防医学 2013年第23期40卷 4389-4392页

作者：钱一言徐怿琳陆施娟王慧方浩徐邦生方政南通大学医学院病原生物学教研室

目的将含周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(BmGAPDH)和半胱氨酸蛋白酶抑制剂(BmCPI)复合基因的重组质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH转染人宫颈癌细胞(Hela)细胞获得复合重组质粒稳定转染细胞株,并纯化所表达的重组蛋白,为研制新型的抗... 详细信息

目的将含周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶(BmGAPDH)和半胱氨酸蛋白酶抑制剂(BmCPI)复合基因的重组质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH转染人宫颈癌细胞(Hela)细胞获得复合重组质粒稳定转染细胞株,并纯化所表达的重组蛋白,为研制新型的抗周期型马来丝虫重组蛋白疫苗提供理论及实验依据。方法将成功构建的pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH和空载体pcDNA3.1(+)分别转染Hela细胞,以G418筛选转染细胞,进而通过RT-PCR和SDS-PAGE鉴定G418筛选后的单克隆抗性细胞株。对阳性克隆进行无血清悬浮培养,收集细胞及其培养液。亲和层析纯化所表达的重组蛋白并通过Western-blotting对纯化的重组蛋白进行生物学鉴定。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH经转染Hela细胞,G418持续筛选14 d获得稳定表达。表达产物经Western-blotting法鉴定能够与相应的免疫鼠血清反应,相对分子质量Mr约为54×103。结论成功建立了周期型马来丝虫复合重组质粒pcDNA3.1(+)-BmCPI/BmGAPDH稳定转染细胞株并获得了相应的重组蛋白。

关键词：周期型马来丝虫 3-磷酸甘油醛脱氢酶半胱氨酸蛋白酶抑制剂复合基因重组蛋白

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中国古瓷视角下的斯瓦希里文明嬗变

古代文明（中英文） 2024年第1期18卷 47-58,157页

作者：钱一平华东师范大学历史学系上海200241 英国约克大学考古系约克YO17EP

自9世纪起,中国陶瓷就通过印度洋贸易网络流通到东非,随后在斯瓦希里海岸出现了一种中国物质文化与阿拉伯宗教文化相结合的文化采借现象。11—15世纪,以中国陶瓷为代表的进口器物被广泛地运用在东非沿海城市的核心建筑——柱墓、清真寺... 详细信息

自9世纪起,中国陶瓷就通过印度洋贸易网络流通到东非,随后在斯瓦希里海岸出现了一种中国物质文化与阿拉伯宗教文化相结合的文化采借现象。11—15世纪,以中国陶瓷为代表的进口器物被广泛地运用在东非沿海城市的核心建筑——柱墓、清真寺和石屋中,用来连接过去和现在、本土与海外,并成为精英贵族“大传统”的一部分,表现出了同中有异的跨文化特征,反映了前现代的亚非联系。来自波斯和阿拉伯地区移民群体的更迭使东非地区对中国陶瓷作为建筑装饰的使用呈现出时代性变化,同时斯瓦希里人发挥非洲主动性,形成了将珊瑚石建筑、城市与文明挂钩的生活方式和象征体系。以中国古瓷来解释斯瓦希里文明的发展变化成为学界外来起源和本土起源争论的一部分,而借助跨学科的视角能更为全面地认识这段东非历史。

关键词：斯瓦希里文明非洲主动性中国瓷器伊斯兰文化

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文学如何走进政治理论

读书 2024年第3期 118-125页

作者：钱一栋

匹克威克先生想雇一个男佣，于是和房东太太谈起了自己的想法。他吞吞吐吐说道：“你觉得养两个人是不是要比养一个人多花钱啊？”“因为我从来没有和你商量过这个事情，连提都没提过，直到今天早上把你的小孩打发出去才……”单身多年...

匹克威克先生想雇一个男佣，于是和房东太太谈起了自己的想法。他吞吞吐吐说道：“你觉得养两个人是不是要比养一个人多花钱啊？”“因为我从来没有和你商量过这个事情，连提都没提过，直到今天早上把你的小孩打发出去才……”单身多年且头脑简单的房东太太以为匹克威克先生是在向她求婚，激动得昏倒在他臂弯里，

关键词：

方志军教授辨治结肠癌患者用药规律的数据挖掘及核心方网络药理学研究

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方志军教授辨治结肠癌患者用药规律的数据挖掘及核心方网络药理学...

作者：钱一雯南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:基于数据挖掘方法对方志军教授门诊辨治结肠癌患者的中药处方内容进行研究,分析总结方志军教授的临证用药规律,并挖掘其中的核心药物组方,利用网络药理学方法对核心药物组方治疗结肠癌的作用机制进行研究预测,以冀为结肠癌的临床... 详细信息

目的:基于数据挖掘方法对方志军教授门诊辨治结肠癌患者的中药处方内容进行研究,分析总结方志军教授的临证用药规律,并挖掘其中的核心药物组方,利用网络药理学方法对核心药物组方治疗结肠癌的作用机制进行研究预测,以冀为结肠癌的临床治疗提供思路与参考。方法:收集2018年6月1日-2022年6月30日在方志军教授门诊接受诊治的结肠癌患者医案信息,建立原始数据库。运用 Excel 2021、SPSS Modeler18.0、SPSS Statistics26.0、Cytoscape3.9.1软件进行数据挖掘研究,根据研究结果分析总结方志军教授的临证用药规律,并完成核心药物组方的挖掘。运用网络药理学方法对核心药物组方进行分析,在TCMSP平台获取核心组方药物的活性成分及相关靶点。从GeneCards、OMIM、DRUGBANK、TTD数据库中筛选结肠癌的疾病靶点。将核心组方药物的靶点基因与结肠癌的靶点基因取交集。通过STRING11.5数据库构建交集靶点PPI网络。运用Cytoscape 3.9.1构建“中药-活性成分-靶点”网络,并将PPI网络可视化,利用插件cytoHubba筛选出关键靶点。利用DAVID数据库进行GO功能和KEGG通路富集分析,探索核心药物组方的作用机制。结果:1.数据挖掘研究:本研究共纳入61例结肠癌患者,涉及中药处方442首,包含232味中药,使用频次位居前10的中药依次是薏苡仁、黄芪、白花蛇舌草、仙鹤草、白术、白芍、蒲公英、红景天、陈皮、甘草,最常使用的中药类别是补虚药、清热药和利水渗湿药。其中,中药药性以平、温、寒为主,药味以甘、苦、淡居多,归经排名前5的依次为脾经、肺经、肝经、心经、胃经。关联规则分析得到核心关联组合集中于黄芪、白术、白芍、薏苡仁、仙鹤草和白花蛇舌草这六味药物。高频药物聚类分析得到5个聚类,第一类:白花蛇舌草、仙鹤草、蒲公英、薏苡仁、黄芪、白术、白芍、红景天、陈皮、甘草;第二类:金荞麦、苦杏仁、浙贝母;第三类:丹参、甘松;第四类:山茱萸、川牛膝;第五类:枸杞子、桑椹。非常用药物关联集群分析中关联强度最高的药物组合为:女贞子、地锦草、黄精、山慈菇、马齿苋、桑叶、石菖蒲、山楂、远志。在核心中药网络图中,以白花蛇舌草、仙鹤草、黄芪、薏苡仁、白术这5味中药最为重要。结合频次分析、关联规则分析、聚类分析结果和方志军教授的用药经验,选择以“黄芪、白术、薏苡仁、仙鹤草、白花蛇舌草”作为核心药物组方。2.网络药理学研究:经检索筛选得到32种核心组方药物的活性成分,221个潜在治疗靶点,筛选得到1871个结肠癌相关的靶点基因,最终获得1 18个交集靶点基因。核心组方药物的关键活性成分包括槲皮苷、山柰酚、豆甾醇、木犀草素、7-O-methylisomucronulatol、β-谷甾醇、芒柄花黄素、异鼠李素、常春藤皂苷元、鞣花酸等。其关键的作用靶点有TP53、AKT1、VEGFA、MYC、CASP3、ESR1、EGFR、TNF、HIFIA、CCND1 等。GO 功能富集分析共得到生物过程727项,细胞成分71项,分子功能135项。其中生物过程主要有RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正向调控、基因表达的正向调控和细胞凋亡过程的负向调控等,细胞成分包括核、核质和大分子复合物等,分子功能有蛋白质结合、同源蛋白质结合和酶结合等。KEGG通路富集分析共获得173条通路,其中PI3K-Akt、IL-17、TNF、p53等信号通路与结肠癌的发生发展紧密相关。结论:1.方志军教授临证治疗结肠癌的高频用药为薏苡仁、黄芪、白花蛇舌草、仙鹤草、白术、白芍、蒲公英、红景天、陈皮、甘草等。其用药多选平和之品,随症加用寒药与温药平调寒热。药味则以甘、苦、淡为主。用药归经多属脾经、肺经、肝经、心经、胃经。中药功效多为补虚药、清热药和利水渗湿药,其中,补虚药以补气药和补阴药为主。女贞子、地锦草、黄精、山慈菇、马齿苋、桑叶、石菖蒲、山楂、远志是方志军教授非常用的药物关联集群中指导意义最大的药物组合,提示治疗结肠癌可从抑制“炎癌转化”角度预防早期癌变,辨证采用散瘀消滞、凉血止血等治法,同时需注重“身心同治”,关注患者情绪。通过药物聚类分析得到5个常用药物组合,结合关联规则分析、核心中药网络图结果与方志军教授多年临证经验,最终以“黄芪、白术、薏苡仁、仙鹤草、白花蛇舌草”作为核心药物组方。2.核心药物组方“黄芪、白术、薏苡仁、仙鹤草、白花蛇舌草”主要的有效活性成分为槲皮苷、山柰酚、豆甾醇、木犀草素、7-O-methylisomucronulatol、β-谷甾醇、芒柄花黄素、异鼠李素、常春藤皂苷元、鞣花酸等。以上活性成分通过靶向结肠癌的关键靶点TP53、AKT1、VEGFA、MYC、CASP3、ESR1、EGFR、TNF、HIF1

关键词：结肠癌数据挖掘核心验方网络药理学

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不同加载速率下冻融砂岩的动态劈裂特性

东北大学学报（自然科学版） 2024年第1期45卷 111-119页

作者：贾蓬毛松泽钱一锦卢佳亮东北大学资源与土木工程学院辽宁沈阳110819

为研究加载速率和冻融循环对砂岩动态劈裂特性的影响,对冻融0,25,50,75,100次的砂岩进行了静态和不同加载速率的动态劈裂试验,分析了冻融砂岩的静动态抗拉强度及冲击荷载作用下耗散能变化规律.研究结果表明:冻融砂岩的静动态抗拉强度、... 详细信息

为研究加载速率和冻融循环对砂岩动态劈裂特性的影响,对冻融0,25,50,75,100次的砂岩进行了静态和不同加载速率的动态劈裂试验,分析了冻融砂岩的静动态抗拉强度及冲击荷载作用下耗散能变化规律.研究结果表明:冻融砂岩的静动态抗拉强度、纵波波速、质量损失率均随冻融次数增加而劣化.随冻融次数、加载速率增加,动强度增加因子(DIF)不断增大,且砂岩冻融损伤越大,DIF随加载速率增加越明显.建立的基于冻融损伤和加载速率的动态抗拉强度预测模型可以很好地反映砂岩的强度变化.砂岩的冻融损伤越大,动态抗拉强度随加载速率的变化速率越快;冲击荷载作用下的耗散能随冻融次数增加而减小,随加载速率增加而增大.

关键词：冻融循环加载速率损伤动态抗拉强度能量耗散

基于耦合协调分析的火灾-经济-环境时空演化研究

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中国安全科学学报 2024年第2期34卷 103-109页

作者：向月骆鑫秦毅钱一诺重庆科技大学安全工程学院重庆401331 安徽理工大学安全科学与工程学院安徽淮南232000

为探究火灾、经济、环境的时空演化特征,基于2000—2019年中国火灾、经济、环境数据,建立火灾-经济-环境耦合协调模型,研究火灾、经济、环境系统的耦合发展水平;结合探索性空间数据分析(ESDA)方法研究我国31个省域各子系统时空演变特征... 详细信息

为探究火灾、经济、环境的时空演化特征,基于2000—2019年中国火灾、经济、环境数据,建立火灾-经济-环境耦合协调模型,研究火灾、经济、环境系统的耦合发展水平;结合探索性空间数据分析(ESDA)方法研究我国31个省域各子系统时空演变特征及聚集性,并基于Moran'I检验开展火灾、经济、环境空间相关性分析。研究结果表明:2000—2019年火灾、经济和环境综合发展耦合良好。从时间维度上,2000—2019年耦合度和协调度呈上升趋势,耦合度受火灾综合得分影响,协调度受经济子系统影响;从空间维度上,经济发展是影响31个省域耦合协调度的主要因素。从耦合关系时空演变分析看,省域耦合度随时间呈聚集状态,耦合协调度在空间聚集中呈随机性。火灾、经济和环境对耦合协调的不同影响,导致协调类型及空间聚集状态不同。

关键词：火灾-经济-环境耦合协调度时空演化探索性空间数据分析(ESDA) 熵值法

晶粒尺寸对花岗岩动态劈裂力学特性及断面粗糙度影响的试验研究

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应用基础与工程科学学报 2024年第5期32卷 1449-1462页

作者：贾蓬钱一锦毛松泽徐雪桐卢佳亮东北大学资源与土木工程学院

岩石的晶粒尺寸对岩石的动力学特性具有重要影响，为探明晶粒尺寸对花岗岩动态劈裂力学特性及断裂面粗糙度特征的影响，分别对两种晶粒尺寸的花岗岩进行不同应变率条件下的冲击劈裂试验.结果表明：两种晶粒尺寸的花岗岩动态劈裂强度与... 详细信息

岩石的晶粒尺寸对岩石的动力学特性具有重要影响，为探明晶粒尺寸对花岗岩动态劈裂力学特性及断裂面粗糙度特征的影响，分别对两种晶粒尺寸的花岗岩进行不同应变率条件下的冲击劈裂试验.结果表明：两种晶粒尺寸的花岗岩动态劈裂强度与最大吸收能均随应变率的提升而增加，具有明显的应变率效应；晶粒尺寸对相近应变率条件的花岗岩动态劈裂强度与最大吸收能影响不明显；但粗细粒花岗岩能量利用率随应变率增加降低，降低趋势差异明显，粗粒花岗岩存在阈值应变率，平均应变率小于35.24s-1时，能量利用率降低明显，大于35.24s-1时降低缓慢；粗粒花岗岩的最终破坏模式表现为Ⅱ型劈裂破坏，随应变率增加端部楔形破坏区向中心延伸，而细粒花岗岩的最终破坏模式表现为随应变率增加，由Ⅰ型劈裂破坏变为Ⅱ型劈裂破坏.利用三维断面扫描所得的断面数据进行两类花岗岩断面粗糙程度的量化分析，结果表明，粗粒花岗岩的断面粗糙度指标Z2与Rs在相同应变率条件下总体上均大于细粒花岗岩，用断面粗糙度指标Z2预测花岗岩的动态劈裂力学指标的效果优于Rs.

关键词：花岗岩晶粒尺寸动态巴西劈裂应变率粗糙度动态力学特征能量特征