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耐碳青霉烯类大肠埃希菌的耐药机制及其同源性分析

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耐碳青霉烯类大肠埃希菌的耐药机制及其同源性分析

作者：蒋沁炆南昌大学

学位级别：硕士

目的:探讨临床分离的大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制及同源性。方法:收集2016年1月-2016年3月临床标本中分离的大肠埃希菌共计112株,Vitek 2-compact全自动微生物分析仪和常规方法进行细菌鉴定及药敏检测,初步筛选碳青霉烯类... 详细信息

目的:探讨临床分离的大肠埃希菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制及同源性。方法:收集2016年1月-2016年3月临床标本中分离的大肠埃希菌共计112株,Vitek 2-compact全自动微生物分析仪和常规方法进行细菌鉴定及药敏检测,初步筛选碳青霉烯类耐药大肠埃希菌6株;采用EDTA协同试验和改良Hodge试验检测碳青霉烯酶表型;运用PCR扩增碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaVIM、blaGES、blaIMP、blaNDM、blaGIM、bla OXA-23/48等)、及其他β-内酰胺酶基因(blaTEM、blaSHV、blaCTX-M)及及喹诺酮类药物耐药基因(qnrA、qnrB、qnrS)。对阳性产物进行测序以确定基因型别;通过质粒接合实验检测其耐药基因的转移特性;应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对耐碳青霉烯类大肠埃希菌进行同源性分析;应用多位点序列分析(MLST)确定其等位基因编号及基因序列型(ST型),并利用eBURST软件进行亲缘性分析。结果:共检测得6株碳青霉烯类耐药大肠埃希菌,耐药率为5.4%(6/112),其中3株碳青霉烯类耐药大肠埃希菌携带bla NDM,其中1株携带blaNDM-1,1株携带blaNDM-1和blaTEM-1,1株菌同时携带bla NDM-3、blaCTX-M-15及blaTEM-1基因。3株携带blaNDM基因大肠埃希菌经EDTA协同实验和改良Hodge实验均为阳性,基因型和表型一致。3株产blaNDM型大肠埃希菌均通过接合试验将bla NDM基因传递给了大肠埃希菌J53感受态菌,成功转移至受体菌,接合子对碳青霉烯类药物均为耐药,PCR扩增接合子并经测序确定blaNDM阳性,并使其获得了相似的耐药特性。另外3株未检测出碳青霉烯酶基因的大肠埃希菌中,1株仅携带blaCTX-M-65基因,1株仅携带blaTEM-1基因,另1株仅携带bla CTX-M-15基因。未检测到bla KPC、bla VIM、bla GES、bla IMP、bla GIM及bla OXA碳青霉烯类耐药基因阴性。6株碳青霉烯类耐药大肠埃希菌均未发现出qnrA、qnrB、qnrS等喹诺酮类药物耐药基因。3株携带blaNDM的大肠埃希菌MLST结果显示为3个不同ST型,分别为ST744、ST167和ST7219,eBURST软件分析示ST744和ST167属于CC10克隆群,ST7912属于CC131克隆群。这3株携带bla NDM的大肠埃希菌经PFGE成功分型为A、B、C三种不同的克隆型。结论:1、本研究所收集本地区耐碳青霉烯类大肠埃希菌均为多重耐(MDR)菌,对替加环素和阿米卡星均敏感,耐药现象严重,其中3株为产blaNDM型的大肠埃希菌,另外3株未检出碳青霉烯类耐药基因。2、首次在中国发现1株产blaNDM-3的大肠埃希菌,并且该菌株同时携带blaTEM-1和blaCTX-M-15基因。另2株产blaNDM型的大肠埃希菌中,1株仅携带blaNDM-1基因,1株同时携带blaNDM-1和bla TEM-1基因。3、通过MLST和PFGE的方法同时对3株产blaNDM型的大肠埃希菌进行遗传相关性分析发现,3株实验菌无克隆相关性。

关键词：大肠埃希菌碳青霉烯酶 blaNDM-3 MLST PFGE分型

2012-2016年南昌市第三医院医院感染病原菌分布及耐药菌分析

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现代预防医学 2018年第12期45卷 2288-2292页

作者：贾利娜蒋沁炆章群郭蕾南昌市第三医院院感科南昌市第三医院检验科

目的通过总结分析南昌市第三医院近5年医院感染主要病原菌分布及抗菌药物的耐药性,为临床诊疗提供依据。方法采用西门子Mifcro Scan Walk Away-40 plus全自动细菌检定药敏分析仪对2012年1月-2016年12月医院感染患者标本进行细菌鉴定及... 详细信息

目的通过总结分析南昌市第三医院近5年医院感染主要病原菌分布及抗菌药物的耐药性,为临床诊疗提供依据。方法采用西门子Mifcro Scan Walk Away-40 plus全自动细菌检定药敏分析仪对2012年1月-2016年12月医院感染患者标本进行细菌鉴定及药敏试验,用SPSS13.0分析耐药趋势。结果 5年共检出医院感染病原菌2 206株,前3位依次是大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌,其中大肠埃希菌5年多重耐药菌分布率最高,且差异有统计学意义(P26%;铜绿假单胞菌在部分年份对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素等耐药率>30%。结论医院感染主要病原菌耐药率依然较高,仍需进一步加强细菌耐药性监测。

关键词：医院感染病原菌抗菌药物耐药性

盐酸氨溴索联合盐酸丙卡特罗治疗小儿肺炎支原体肺炎的临床效果及对患儿免疫功能和炎症细胞因子水平的影响

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中国妇幼保健 2022年第21期37卷 3936-3939页

作者：李清祥熊文祺蒋沁炆胡犁丽南昌市第三医院检验科江西南昌330009 南昌市第三医院儿科江西南昌330009

目的探讨盐酸氨溴索联合盐酸丙卡特罗治疗小儿肺炎支原体肺炎的临床效果及对患儿免疫功能和炎症细胞因子水平的影响。方法选取2019年1月-2021年12月在南昌市第三医院接受治疗的小儿肺炎支原体肺炎患儿84例为研究对象,随机分为对照组... 详细信息

目的探讨盐酸氨溴索联合盐酸丙卡特罗治疗小儿肺炎支原体肺炎的临床效果及对患儿免疫功能和炎症细胞因子水平的影响。方法选取2019年1月-2021年12月在南昌市第三医院接受治疗的小儿肺炎支原体肺炎患儿84例为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组各42例,对照组患儿给予常规治疗,观察组患儿给予盐酸氨溴索联合盐酸丙卡特罗治疗。对比两组患儿临床治疗效果、T淋巴细胞亚群水平、血清炎症细胞因子水平及临床症状消失时间等指标。结果观察组患儿临床治疗总有效率(92.9%)显著高于对照组(81.0%),差异有统计学意义(χ^(2)=7.156,P0.05)。治疗后,观察组患儿CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)及IL-4水平均显著高于对照组[(69.54±2.74)%vs.(60.32±2.31)%,(41.36±2.95)%vs.(37.52±2.63)%,(1.52±0.32)vs.(1.04±0.12),(5.41±0.58)ng/ml vs.(3.96±0.65)ng/ml],差异均有统计学意义(t=16.673、6.297、9.102及10.787,均P<0.05),CD8^(+)、TNF-α、IFN-γ及IL-2水平显著低于对照组[(27.24±1.62)%vs.(36.54±2.18)%,(4.16±2.57)ng/ml vs.(7.52±4.03)ng/ml,(15.24±2.11)ng/ml vs.(18.14±2.65)ng/ml,(177.58±42.51)ng/ml vs.(242.36±45.12)ng/ml],差异均有统计学意义(t=22.191、4.556、5.548及6.772,均P<0.05)。观察组患儿肺部啰音、咳嗽、发热及气喘等临床症状消失时间[(6.62±1.23)d、(4.13±1.44)d、(2.11±1.16)d及(3.64±1.34)d]均短于对照组[(9.88±1.12)d、(6.15±1.53)d、(3.72±1.47)d及(5.56±1.52)d],差异均有统计学意义(t=12.700、6.231、5.572及6.141,均P<0.05)。结论应用盐酸氨溴索联合盐酸丙卡特罗治疗小儿肺炎支原体肺炎,临床效果显著,可改善患儿T淋巴细胞亚群和炎症细胞因子水平,缩短治疗时间,促进临床康复,治疗效果理想,值得应用。

关键词：盐酸氨溴索盐酸丙卡特罗小儿肺炎支原体肺炎 T淋巴细胞炎症细胞因子

反义寡核苷酸vMO调控Bcl-x剪接对人乳腺癌细胞侵袭转移的影响

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中国病原生物学杂志 2020年第5期15卷 527-532页

作者：李清祥廖志华张静刘勇白羽蒋沁炆朱春龙邬艳王小中刘静南昌市第三医院检验科江西南昌330009 江西省妇幼保健院检验科南昌大学第二附属医院检验科江西省检验医学重点实验室南昌市东湖区疾病预防控制中心

目的探讨靶向纠正Bcl-x基因异常剪接对人乳腺癌细胞侵袭转移等生物学行为的影响。方法人乳腺癌MDA-MB-231细胞和正常NIH3T3细胞均设转染组和空白对照组。实验组采用靶向Bcl-x基因的特异性Vivo-Morpholino Antisense Oligomer(vMO)进行转... 详细信息

目的探讨靶向纠正Bcl-x基因异常剪接对人乳腺癌细胞侵袭转移等生物学行为的影响。方法人乳腺癌MDA-MB-231细胞和正常NIH3T3细胞均设转染组和空白对照组。实验组采用靶向Bcl-x基因的特异性Vivo-Morpholino Antisense Oligomer(vMO)进行转染,空白对照组常规培养。采用qRT-PCR和Western Blot分别检测各组Bcl-x剪接体Bcl-xL和Bcl-xS mRNA和蛋白表达水平,通过流式细胞仪(FCM)、平板克隆形成试验、Transwell侵袭试验及划痕试验检测vMO对MDA-MB-231和NIH3T3细胞增殖、凋亡、侵袭及转移的影响。结果VMO能稳定高效转染细胞,荧光阳性率达99.17%,并能持续稳定存在7天以上;VMO能在胞内有效调节Bcl-x的剪接模式,MDA-MB-231细胞中Bcl-xL mRNA和蛋白较对照组显著降低,而Bcl-xS mRNA和蛋白较对照组显著升高(P<0.05);平板克隆形成试验和FCM结果显示,vMO转染前后,NIH3T3细胞克隆形成率分别为43%和35%,凋亡率分别为0.27%和0.53%,差异均无统计学意义;vMO转染MDA-MB-231细胞前后,穿膜细胞数分别为(67±1)和(47±1)个,发生迁移的细胞数分别为(106±2)和(78±1)个,差异具有统计学意义(P<0.05);划痕试验显示,转染组MDA-MB-231细胞划痕愈合能力较对照组减弱(P<0.05),平均迁移距离分别为(218±21)mm和(389±12)mm。结论vMO靶向结合Bcl-x pre-mRNA促使Bcl-xL向Bcl-xS转化,在抑制乳腺癌细胞侵袭及转移方面具有重要作用。

关键词：乳腺癌细胞 Bcl-x 反义寡核苷酸侵袭转移

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Klinefelter综合征的研究进展

中华生殖与避孕杂志 2024年第4期44卷 432-435页

作者：蒋沁睿全松南方医科大学南方医院妇产科生殖医学中心广州510515

Klinefelter综合征(Klinefelter syndrome,KS)是X染色体数目异常性疾病,可导致精子生成障碍、生殖细胞丢失,引起男性不育和生长发育异常。KS患者多余染色体造成的基因表达异常和睾丸微环境异常与生精障碍、生殖细胞丢失密切相关,其发病... 详细信息

Klinefelter综合征(Klinefelter syndrome,KS)是X染色体数目异常性疾病,可导致精子生成障碍、生殖细胞丢失,引起男性不育和生长发育异常。KS患者多余染色体造成的基因表达异常和睾丸微环境异常与生精障碍、生殖细胞丢失密切相关,其发病机制尚未阐明。精子冷冻、显微取精术、卵胞质内单精子注射等技术为KS患者生育力保存和生育提供了技术手段,尤其是人造配子技术可能成为KS不育的新疗法,但该技术尚未完全成熟,仍存在安全性和伦理问题。本文对KS的研究进展作一综述,为其诊治提供新的思路。

关键词： Klinefelter综合征染色体异常生育力保存生殖细胞丢失睾丸微环境异常

耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌的耐药基因检测及传播机制探讨

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山东医药 2018年第47期58卷 36-39页

作者：俞凤胡龙华蒋沁炆钟桥石陈艳慧方雪瑶南昌大学第二附属医院/江西省医学检验重点实验室南昌330006

目的检测耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌的耐药基因,并探讨其传播机制。方法临床分离的耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌3株,分别编码为DC10、DC44、DC52。用PCR法扩增筛查DC10、DC44、DC52的耐药基因,对扩增产物测序确定基因型别;通过接合... 详细信息

目的检测耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌的耐药基因,并探讨其传播机制。方法临床分离的耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌3株,分别编码为DC10、DC44、DC52。用PCR法扩增筛查DC10、DC44、DC52的耐药基因,对扩增产物测序确定基因型别;通过接合实验得到DC10、DC44、DC52与耐叠氮钠的大肠埃希菌J53的接合子,对接合子进行菌种鉴定、药敏试验、耐药基因检测及测序;采用多位点序列分析(MLST)确定DC10、DC44、DC52的基因序列型(ST型),并利用e BURST软件进行亲缘性分析。结果 DC10、DC44、DC52中bla NDM基因均阳性,其它碳青霉烯类耐药基因、喹诺酮类耐药基因均阴性。经测序确认DC10、DC52均携带bla NDM-1基因,其中DC52同时携带bla TEM-1基因; DC44携带bla NDM-3基因,同时携带bla TEM-1基因和bla CTX-M-15基因。DC10、DC44、DC52均与J53接合成功,接合子为大肠埃希菌。接合子除对替加环素、阿米卡星敏感外,对β-内酰胺酶类和碳青霉烯类抗生素均耐药,接合子均含有与DC10、DC44、DC52相同的碳青霉烯酶基因。DC10的MLST分型为ST744、DC44为ST7219、DC52为ST167。ST744和ST167同属于CC10克隆群,ST7219属于CC131克隆群。结论耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌的耐药基因为bla NDM基因,耐药基因bla NDM均能通过质粒水平传播。

关键词：耐药基因大肠埃希菌碳青霉烯酶碳青霉烯类抗生素

转型背景下XY民办高校教师胜任力提升策略研究

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转型背景下XY民办高校教师胜任力提升策略研究

作者：蒋沁希电子科技大学

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糖尿病视网膜病变的生物治疗研究最新进展

眼科新进展 2024年第4期44卷 317-323页

作者：李朵韩笑言蒋沁南京医科大学附属眼科医院江苏省南京市210029 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科国家卫生健康委员会近视眼重点实验室(复旦大学)中国医学科学院近视眼重点实验室上海市视觉损伤与重建实验室上海市200031

糖尿病视网膜病变(DR)是最常见的眼底血管性疾病,也是导致劳动适龄成年人视力丧失的主要原因。DR的发生发展涉及多种病理生理机制,包括代谢失调、氧化应激、炎症、神经血管单元功能减退等。常规的临床治疗方案如抗血管内皮生长因子药物... 详细信息

糖尿病视网膜病变(DR)是最常见的眼底血管性疾病,也是导致劳动适龄成年人视力丧失的主要原因。DR的发生发展涉及多种病理生理机制,包括代谢失调、氧化应激、炎症、神经血管单元功能减退等。常规的临床治疗方案如抗血管内皮生长因子药物、视网膜激光光凝,其治疗周期长且部分患者的治疗效果存在差异,病程后期有时需要联合玻璃体切割手术治疗。随着DR发病机制分子层面研究的深入,靶向治疗、基因治疗、免疫治疗、细胞治疗等多种生物治疗方式越来越受到研究者的重视。本综述总结了目前针对DR的多种生物治疗方式并概述了这些方法的益处和局限性,以期为研究者们提供参考。

关键词：糖尿病视网膜病变生物治疗免疫治疗靶向治疗基因治疗细胞治疗

公立医院院长经济责任审计研究 ——以F县中医院为例

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公立医院院长经济责任审计研究 ——以F县中医院为例

作者：陈炆重庆理工大学

学位级别：硕士

在中国共产党第二十次全国代表大会提出要“深化公立医院以公益为导向的改革”,“壮大医疗卫生人才队伍”,“推行绿色发展模式”。随着这些战略的稳步推进,公立医院在不断提升自身自主决策权的同时,其在医疗卫生体系中的核心地位愈发凸... 详细信息

在中国共产党第二十次全国代表大会提出要“深化公立医院以公益为导向的改革”,“壮大医疗卫生人才队伍”,“推行绿色发展模式”。随着这些战略的稳步推进,公立医院在不断提升自身自主决策权的同时,其在医疗卫生体系中的核心地位愈发凸显。公立医院综合改革制度激发了医院管理层思维方式的根本转变,对医院院长在其任期内肩负的经济责任提出了前所未有的高标准要求。对公立医院的院长进行经济责任审计是符合当前社会发展趋势的,这将有助于激励医院院长全心全意地履行其管理职责,从而推动公立医院的持续发展。本文从经济责任审计的理论价值和现实意义出发,深入剖析了公立医院院长经济责任审计的实务框架,并以此为基础,结合相关理论对F县中医院院长经济责任审计案例进行了详尽分析。文章分析出本次审计中存在的问题,如审计动员与宣传力度不足、审计力量配备有限、审计内容覆盖面不够全面、审计过程流于形式化、过分依赖量化指标、后续整改追踪不力等。为了给未来审计部门实施公立医院院长经济责任审计项目提供有益指导,本文提出如下建议:强化审计宣传与动员工作、增强经济责任审计的专业力量、密切关注医疗政策与重要规划的执行情况、充分考量被审计医院的独特性、构建更为科学严谨的评价体系、确保审计整改措施的及时跟进与落实。本文从政府审计视角出发,紧密结合公立医院高质量发展背景与中医药高质量发展政策,针对当前公立医院院长经济责任审计所面临的挑战进行深刻剖析。当前我国经济责任审计的对象主要集中于国有企业和高等院校,而公立医院的经济责任审计大多局限于内部审计范畴,分析问题和原因时多立足于内部审计视角。本文力求打破常规,从政府审计的宏观视野,为今后审计机关在公立医院院长经济责任审计领域的实践提供有力支撑。

关键词： F县中医院经济责任审计院长高质量发展