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联合磁珠与裂解酶LysGH15检测金黄色葡萄球菌方法的建立与评价

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联合磁珠与裂解酶LysGH15检测金黄色葡萄球菌方法的建立与评价

作者：康汉莉吉林大学

学位级别：硕士

联合磁珠与裂解酶Lys GH15检测金黄色葡萄球菌方法的建立与评价金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称***)简称金葡菌,是一种常见的人畜共患病原菌。它能够在空气、水、灰尘、物体表面以及动物和人类之间广泛传播,具有强大的生存... 详细信息

联合磁珠与裂解酶Lys GH15检测金黄色葡萄球菌方法的建立与评价金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,简称***)简称金葡菌,是一种常见的人畜共患病原菌。它能够在空气、水、灰尘、物体表面以及动物和人类之间广泛传播,具有强大的生存和适应能力,对细菌性疾病的防控构成了持续的挑战。因此,迫切需要建立一种能够快速、灵敏、有效检测金黄色葡萄球菌的方法。相较于抗体和适配体,噬菌体裂解酶体积小、易获取、成本低,在致病菌检测领域的应用日益广泛。本研究采用双位点识别方式,以金黄色葡萄球菌为检测对象,建立了一种联合磁珠与金黄色葡萄球菌噬菌体裂解酶Lys GH15,并利用绿色荧光指示来检测金黄色葡萄球菌的新方法。Lys GH15对金黄色葡萄球菌表现出特异性的裂解活性。本研究将裂解酶Lys GH15发挥细胞壁水解活性的关键氨基酸第54位半胱氨酸突变成丙氨酸得到Lys GH15-C54A,通过融合PCR技术将Lys GH15-C54A与增强绿色荧光蛋白EGFP进行串联表达成功构建重组质粒p GEX-4T-1-Lys GH15-C54A-EGFP,并使用带有GST-tag的p GEX-4T-1载体来增强目的蛋白的可溶性表达,通过优化诱导温度、IPTG浓度等条件获得纯化后的目的蛋白,利用激光共聚焦显微镜进一步验证了其特异性结合金黄色葡萄球菌并产生绿色荧光的能力。利用裂解酶Lys GH15的突变体Lys GH15-C54A制备了Lys GH15-C54A-MBs裂解酶偶联磁珠,特异性捕获金黄色葡萄球菌,形成二元复合物。构建了Lys GH15-C54A-EGFP重组蛋白,该蛋白可结合二元复合物中的金黄色葡萄球菌表面空位,利用这种双位点识别方式实现金黄色葡萄球菌的荧光检测。荧光强度变化作为检测金黄色葡萄球菌的指标:在没有检测到金黄色葡萄球菌时,重组荧光蛋白Lys GH15-C54A-EGFP自由存在于溶液中,荧光强度不低于磷酸盐缓冲液对照组;当检测到金黄色葡萄球菌时,荧光蛋白标记于细菌上,导致溶液中游离蛋白减少,荧光强度降低。对溶液中荧光强度的变化与细菌各浓度梯度之间的关系进行线性回归分析,建立一种金黄色葡萄球菌快速检测方法。本研究还探索了磁珠捕获细菌体系中磁珠加入量、Lys GH15-C54A包被量、捕获时间对检测性能的影响。结果显示,磁珠加入量60μL、Lys GH15-C54A包被量30μg、捕获时间25 min为该方法的最佳检测条件。在最优条件下,对不同浓度的金黄色葡萄球菌进行检测。表明该检测体系具有良好的特异性,在金黄色葡萄球菌浓度为9.9×10～2～1.0×10～6 CFU/m L范围内具有良好的线性关系,线性相关系数为0.99,该方法可在1 h内实现对金黄色葡萄球菌的快速检测。使用本研究建立的检测方法对100份生牛乳临床样本进行检测。结果显示,28份样品检出为阳性,72份为阴性,阳性检出率为28%(28/100)。用常规PCR方法检测到35份样品为阳性,65份为阴性,阳性检出率为35%(35/100)。使用Baird-Parker平板培养法检测到31份样品为阳性,69份为阴性,阳性检出率为31%(31/100),这与我国生牛乳中金葡菌的检出率主要在15%～38%的数据相符。通过Baird-Parker平板培养法复核检测,本研究建立的方法与Baird-Parker平板培养法的阳性符合率为90.3%、阴性符合率为95.8%,且本研究建立的方法未出现假阳性结果。综上所述,本研究成功建立了一种联合磁珠和裂解酶Lys GH15并利用荧光信号检测金黄色葡萄球菌的新方法,该方法操作简单,裂解酶易获取,且能在1h内完成对金黄色葡萄球菌的检测,在用于金黄色葡萄球菌检测方面显示出应用潜力,为金黄色葡萄球菌的快速检测提供了新的思路。

关键词：金黄色葡萄球菌裂解酶 LysGH15 磁珠检测方法

g-C3N4基Z型异质结光催化剂的构建及其对染料分子的降解行为研究

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g-C3N4基Z型异质结光催化剂的构建及其对染料分子的降解行为研究

作者：钱汉麟江西理工大学

学位级别：硕士

健身工作室创新创业模式研究——以汉松健身工作室为例

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中文科技期刊数据库（文摘版）社会科学

中文科技期刊数据库（文摘版）社会科学 2024年第9期 0194-0197页

作者：罗飞韦晓欣廖汉生广州体育职业技术学院广东广州510650

健身工作室是体育市场的一个细分,有着运营成本低、资金风险小、专业性和私密性更强等特点。文章通过对健身工作室的选址、经营模式、产品服务、团队人员素质等方面的研究,从而找到适合大学生群体健身工作室创新创业的优化模式,以期给... 详细信息

健身工作室是体育市场的一个细分,有着运营成本低、资金风险小、专业性和私密性更强等特点。文章通过对健身工作室的选址、经营模式、产品服务、团队人员素质等方面的研究,从而找到适合大学生群体健身工作室创新创业的优化模式,以期给大学生创业群体提供参考依据,希望更多的大学生理性创业,以创业带动就业,推动社会经济发展。

关键词：健身工作室创新创业模式研究

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研发操纵对审计投入的影响研究

研发操纵对审计投入的影响研究

作者：包汉卿北京化工大学

学位级别：硕士

为促进企业加大研发投入,支持科技创新的持续进步,2008年我国政府推出了《高新技术企业认定管理办法》,并于2016年进一步修订完善。该管理办法的实施在缓解高新技术企业的融资压力、促进高新技术产业的发展和成长方面取得了显著成效,但... 详细信息

为促进企业加大研发投入,支持科技创新的持续进步,2008年我国政府推出了《高新技术企业认定管理办法》,并于2016年进一步修订完善。该管理办法的实施在缓解高新技术企业的融资压力、促进高新技术产业的发展和成长方面取得了显著成效,但与此同时部分企业出于不同的动机通过调整会计处理方式、操纵实际业务活动等手段虚报研发投入,即研发操纵,试图将自身伪装成符合条件的高新技术企业。这不仅会导致高新技术企业市场竞争公平性的丧失,也不符合国家税收的目标和初衷。事务所审计作为企业外部治理监督的主体,对企业的会计合规性发挥监督作用。因此,有必要关注上市公司的研发操纵行为在审计市场的影响。然而,已有研究主要聚焦于研发操纵对企业自身发展的影响,甚少关注对审计市场的影响。为探究审计师是否能够有效识别和监督企业研发操纵,本文从审计投入视角开展企业研发操纵对审计市场的影响研究。通过梳理研发操纵、审计投入和知识溢出相关文献,本文基于信息不对称理论体系,提出了研发操纵影响审计投入的研究假设,同时提出知识溢出的调节效应假设。进而利用我国2011-2020年A股上市公司作为基础样本进行实证检验并得出:(1)企业研发操纵行为会使得审计师有减少审计投入的倾向;(2)包含技术溢出、地理溢出和市场竞争溢出三个维度的知识溢出,随溢出程度的增加,企业研发操纵使审计师减少审计投入的程度加剧;(3)进一步研究得出,企业通过研发操纵使自身呈现出高新技术企业的表象,进而误导审计师,使其有减少审计投入的倾向。这种倾向在非十大会计师事务所审计、不具备行业专长的事务所审计、事务所非首次进行审计以及被审计单位为成熟企业的样本中表现得更为显著。与此同时,审计师这种降低审计投入的倾向还会进一步导致审计质量的降低。本文从第三方审计视角探讨了企业研发操纵行为的经济后果,拓展了研发操纵领域的相关研究,丰富了审计投入的影响因素研究,同时为审计师识别企业研发操纵提供了理论路径。本文的研究结论对于提高审计质量和审计效率、确保企业会计合规性和提升会计信息透明度、推动维护市场秩序和税收公平性具有重要的参考意义。

关键词：研发操纵审计投入知识溢出

基于模态分析和声发射的玻璃幕墙多尺度损伤评价研究

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基于模态分析和声发射的玻璃幕墙多尺度损伤评价研究

作者：陆汉磊桂林理工大学

学位级别：硕士

有关Oregonator模型在一类随机扰动下回复性的研究

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有关Oregonator模型在一类随机扰动下回复性的研究

作者：杜汉铭长春工业大学

学位级别：硕士

化学界对振荡反应中具体发生的物质变化的研究由来已久,也有许多基于化学反应背景的数学模型不断提出,但在模型中加入随机扰动项的随机微分方程方向研究却是极少的。本文选择著名的别洛乌索夫—扎博廷斯基反应(Belousov-Zhabotinskii re... 详细信息

化学界对振荡反应中具体发生的物质变化的研究由来已久,也有许多基于化学反应背景的数学模型不断提出,但在模型中加入随机扰动项的随机微分方程方向研究却是极少的。本文选择著名的别洛乌索夫—扎博廷斯基反应(Belousov-Zhabotinskii reaction,简称BZ反应)Oregonator模型,选取合适的反应表达式,构造微分方程模型,并加入随机扰动项,运用Lyapunov函数对方程的解进行全局非负性与稳定性研究。在得到全局非负性的基础上进一步对模型解进行回复性研究,最后运用Euler–Maruyama方法进行数值模拟。第一章为绪论,重点介绍了非线性化学、别洛乌索夫—扎博廷斯基反应(BZ反应)、Oregonator模型、Lyapunov理论等相关研究的国内外现状,研究背景和意义以及本文的主要结构。第二章Oregonator动力学模型部分对经典的Oregonator模型进行了介绍,简要描述了有关概念、Oregonator动力学基础、动态方程与其数值积分,并对文章中使用到的基础知识进行了定义。第三章是关于随机Oregonator模型的回复性。在经典Oregonator模型的基础上,考虑实验误差、杂质等因素的影响,引入了随机扰动项,得到了随机Oregonator模型。基于随机微分方程理论与Lipschitz条件等,证明了模型解的全局非负性,又运用构造Lyapunov函数等方法,证明了模型解的回复性。第四章为数值模拟验证,运用Euler–Maruyama方法将原模型迭代为离散化方程,并根据反应客观情况设定若干组初值对方程的解进行数值模拟,作出模拟时序图,观察验证解的回复性。

关键词： BZ反应 Oregonator模型回复性 Lyapunov函数 Euler–Maruyama方法

绿色发展理念视域下内蒙古黄河流域能源产业绿色转型对策研究

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绿色发展理念视域下内蒙古黄河流域能源产业绿色转型对策研究

作者：乌丫汉内蒙古师范大学

学位级别：硕士

能源是工业的粮食,国民经济的命脉,是经济可持续发展的基本保障,关系国计民生和社会安全。随着能源革命的深入推进,推动能源生产利用方式变革,优化能源供给结构,提高能源利用效率,建设清洁低碳、安全高效的现代能源体系,维护国家能源安... 详细信息

能源是工业的粮食,国民经济的命脉,是经济可持续发展的基本保障,关系国计民生和社会安全。随着能源革命的深入推进,推动能源生产利用方式变革,优化能源供给结构,提高能源利用效率,建设清洁低碳、安全高效的现代能源体系,维护国家能源安全成为必然趋势。内蒙古黄河流域是国家重要的能源和战略资源基地。内蒙古黄河流域能源产业富集区域,矿产和新能源资源丰富。在黄河流域生态保护和高质量发展重大国家战略、“碳达峰、碳中和”战略、西部大开发战略、“一带一路”倡议的引领下,内蒙古黄河流域凭借着地理区位优势、自然资源优势、战略定位优势、产业基础优势,在传统能源产业和新能源产业发展方面成效显著。然而,面对“十四五”时期,能源产业全面绿色转型的要求,内蒙古黄河流域依然面临着能源产业发展与生态治理不相协调、新能源产业支撑能力不足、能源产业科技创新投入不足、体制机制改革有待深化等现实问题。习近平绿色发展理念为内蒙古黄河流域能源产业绿色转型提供根本遵循,以此为引领内蒙古黄河流域能源产业绿色转型不仅有利于促进黄河流域生态保护和高质量发展,也有利于保障国家能源安全。在绿色发展理念的引领下,本论文采用分析与综合,定性与定量相结合,理论联系实际等研究方法,分析内蒙古黄河流域能源产业绿色转型的机遇与优势,并研究内蒙古黄河流域能源产业发展现状以及面临的问题,最后针对问题提出相应的对策建议。本论文的主要观点和结论是:内蒙古黄河流域能源产业绿色转型,从根本上来说,是加快推进能源产业发展方式和生活方式的绿色转型,处理好开发与保护协同推进的问题。内蒙古黄河流域能源产业想要实现能源转型。第一,转变经济发展方式,实现黄河流域生态保护和高质量发展。第二,要通过传统能源产业转型升级和发展新能源产业来构建绿色低碳的能源产业体系,保障国家能源安全。第三,坚持能源产业科学技术创新驱动,促进传统能源产业高端化、绿色化、数字化转型。第四,通过强化外部约束和激发内生动力,推动形成绿色的生产方式和生活方式。

关键词：绿色发展理念内蒙古黄河流域能源产业绿色转型

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黑龙江省乡村振兴人才综合评价及对策研究

黑龙江省乡村振兴人才综合评价及对策研究

作者：姜汉杰哈尔滨商业大学

学位级别：硕士

乡村振兴是我国强国兴盛的关键战略,是开启复兴伟业进程的重要一步。民为邦本,本固邦宁。“乡村人才振兴”概念的提出虽然时间较晚,但自从三农以来,党和中央就一直高度重视农业农村人才的发展培养。党的二十大报告提出要加快建设社会主... 详细信息

乡村振兴是我国强国兴盛的关键战略,是开启复兴伟业进程的重要一步。民为邦本,本固邦宁。“乡村人才振兴”概念的提出虽然时间较晚,但自从三农以来,党和中央就一直高度重视农业农村人才的发展培养。党的二十大报告提出要加快建设社会主义现代化农业强国,扎实推进乡村人才振兴,对乡村人才振兴发展提出新要求。2024年的中央一号文件提出要实施乡村振兴人才支持计划,壮大乡村人才队伍,全面推进乡村人才振兴,体现了中央对于乡村人才的重视。随着我国脱贫攻坚工作取得全面胜利,乡村振兴进入新阶段,乡村发展不光要推进农村农业现代化,更要建设宜居宜业和美乡村,乡村人才振兴的重要性日益凸显。以乡村振兴为背景,依据人力资源优势理论、人本管理理论、责任政府理论、系统评价理论,运用层次分析法构建评价模型,从引才、育才、用才、留才四方面对黑龙江省乡村振兴人才建设情况进行深入分析,得出问题在于乡村振兴人才引进效果不显著、乡村振兴人才培育资源不充足、乡村振兴人才安排使用不合理、乡村振兴人才留居环境不完善等。主要原因在于人才进乡返乡就业意愿过低、乡村振兴人才培训不受重视、缺乏合理的乡村振兴人才任用机制、乡村振兴人才服务保障体系不完善等因素。通过借鉴日本、韩国、英国、德国以及国内的重庆市、湖北咸宁市、山东德州市、内蒙古呼和浩特市等地区在乡村振兴人才建设中的先进经验,提出建议要创新人才引进机制,突破地域户籍限制招揽人才,增批农业项目吸引高科技人才,立足本地鼓励当地人才回流。要构建人才培育机制,选择农民先进传授生产经验,通过田间学堂培养农村秀才,利用校企合作培育农业人才。要优化人才使用机制,分配人才工作岗位确保合理、对待本地外来人才一视同仁、选拔人才敢于破格唯才是举。要完善人才留居机制,城乡政策协同发展补偿人才,强化人才思想动态引导,构建人才的乡村社会互动网络以促进黑龙江省乡村振兴人才建设。

关键词：乡村振兴人才振兴人才评价

益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症的临床研究

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益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症的临床研究

作者：孟汉杰甘肃中医药大学

学位级别：硕士

目的:本研究旨在通过观察益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症的临床疗效,评价益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症的有效性及安全性。方法:本研究将2022年3月至2023年6月就诊于甘肃省中医院骨质疏松(老年骨)科符合试验标准的6... 详细信息

目的:本研究旨在通过观察益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症的临床疗效,评价益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症的有效性及安全性。方法:本研究将2022年3月至2023年6月就诊于甘肃省中医院骨质疏松(老年骨)科符合试验标准的65例血瘀气滞型骨质疏松症患者。按照随机分组原则分为治疗组和对照组,对照组患者予口服阿仑膦酸钠片+维D钙咀嚼片+骨化三醇胶丸(罗盖全),治疗组在对照组基础上加服益气活血壮骨方。两组均以治疗3月为一个疗程,在治疗2周、1月和3月后分别对两组患者的VAS评分,中医症候积分进行随访比较;在治疗前及治疗3月后对两组患者的骨转换指标,血钙、血磷和中医临床疗效等进行比较;在治疗前及治疗3月、6月后对两组患者的骨密度进行比较。在治疗结束随访6月后对比两组OPF发生率。采用SPSS25.0统计学软件对两组数据进行分析,评价益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症的临床疗效。结果:本研究共纳入65例患者,治疗组33例,3例脱落(1例因出现胃肠道反应退出研究,1例因不愿坚持服药退出研究,1例因疗效不明显要求退出研究)实际完成30例;对照组32例,2例脱落(1例因加服其他影响骨代谢的药物被剔除研究,1例因去外地后无法联系而失访)实际完成30例,两组实际共完成60例。1一般资料:对比两组受试者治疗前年龄、性别、病程、体重指数等基线数据,结果均显示无统计学差异(P>0.05),具有可比性;治疗前两组各观察指标比较,结果均显示无统计学差异,表明两组之间具有可比性(P>0.05)。2 VAS评分:与治疗前比较,两组患者VAS评分,在治疗2周、1月及3月后,VAS评分均下降(P0.05),治疗6月后组间比较,差异有统计学意义(P0.05)。7疗效评价:治疗组总有效率96.7%;对照组总有效率90.0%。治疗组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。9不良反应评估:两组患者服药期间,治疗组不良反应发生率为3.3%;对照组不良反应发生率为10%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益气活血壮骨方治疗血瘀气滞型骨质疏松症疗效确切,可以有效缓解血瘀气滞型骨质疏松症患者的疼痛症状,提高中医症候积分,改善骨密度,正向调控骨稳态,临床疗效显著,安全可靠,值得临床推广应用。

关键词：益气活血壮骨方血瘀气滞证原发性骨质疏松症