检索结果-南通市图书馆

RNA聚合酶Ⅱ重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF-Ⅱ基因siRNA表达载体的构建

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

RNA聚合酶Ⅱ重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF-Ⅱ基因siRNA表...

作者：王旷靖暨南大学

学位级别：硕士

目的：设计并筛选高效沉默IGF-II基因的小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）序列，并构建由RNA聚合酶II重组hAFP（人甲胎蛋白）和hTERT（人端粒酶逆转录酶）双启动子调控针对IGF-II基因siRNA表达载体。方法：①根据siRNA设... 详细信息

目的：设计并筛选高效沉默IGF-II基因的小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）序列，并构建由RNA聚合酶II重组hAFP（人甲胎蛋白）和hTERT（人端粒酶逆转录酶）双启动子调控针对IGF-II基因siRNA表达载体。方法：①根据siRNA设计原则，参照IGF-II mRNA序列设计3对siRNA序列（siRNA1、siRNA2、siRNA3）及1对阴性对照序列，分别以25nM、50nM、100nM浓度，通过脂质体法转染肝癌细胞Huh7，转染24h后采用实时荧光定量PCR检测Huh7细胞中IGF-IImRNA表达量变化，筛选出干扰效率最高的siRNA序列及其最佳干扰浓度。②采用PCR技术扩增出RNA聚合酶II依赖启动子hAFP及hTERT的核心序列，应用基因重组技术构建RNA聚合酶II重组hAFP及hTERT双启动子调控的针对IGF-II基因的siRNA表达载体。结果：①实时荧光定量PCR显示：转染siRNA1、siRNA2、siRNA3的Huh7细胞中IGF-II mRNA表达量均显著下降，干扰效率为67.18%-94.82%，其中siRNA3在25nM浓度时干扰效率最高，为94.82%。②成功扩增hAFP及hTERT启动子核心序列，片段长度分别为269bp、456bp;将hAFP及hTERT启动子核心序列分别克隆入pGL3-Basic载体，构建成重组pGL3-hAFP-hTERT载体;将siRNA3克隆至pGL3-hAFP-hTERT载体，构建成重组pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3载体。DNA测序结果显示：重组质粒中各插入片段方向及序列正确，未见突变、缺失。结论：①筛选出1对高效沉默IGF-II基因的siRNA序列，即siRNA3，其最佳干扰浓度为25nM;②成功构建RNA聚合酶II重组hAFP及hTERT双启动子调控针对IGF-II基因的siRNA表达载体，即pGL3-hAFP-hTERT-siRNA3。

关键词： RNA干扰肝细胞癌人胰岛素样生长因子II基因 RNA聚合酶II 重组hAFP/hTERT启动子

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

益生菌制剂治疗轻微型肝性脑病的荟萃分析

世界华人消化杂志 2011年第24期19卷 2587-2592页

作者：汤绍辉王旷靖吴小娟张嫚嫚暨南大学附属第一医院消化内科广东省广州市510632

目的:评价益生菌制剂治疗轻微型肝性脑病(minimal hepatic encephalopathy,MHE)的疗效.方法:检索PubMed、EMBASE、WebofScience、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库(维普)、万方数字化期刊全文数据库等关于益生菌制剂治疗MHE的临床随机对照试验(RCT),使用Cochrane图书馆提供的Review Manager4.3软件对入选试验进行荟萃分析.结果:共9项试验满足纳入标准而入选本研究,荟萃分析表明:与对照组相比,益生菌制剂可明显缩短数字连接试验(NCT)反应时间(WMD=13.60,95%CI:1.53-25.66,P=0.03),有效降低血氨水平(SMD=0.98,95%CI:0.25-1.71,P=0.008),减轻内毒素血症(SMD=1.03,95%CI:0.65-1.42,P<0.00001),改善ALT水平(WMD=11.72,95%CI:5.57-17.88,P=0.0002),并降低临床肝性脑病的发生率(RR=0.15,95%CI:0.05-0.41,P=0.0002).结论:益生菌制剂可改善MHE患者临床及部分生化指标,降低MHE发展为临床肝性脑病的几率,有可能成为MHE治疗的新选择.

关键词：益生菌轻微型肝性脑病 Meta分析

L-鸟氨酸-L-门冬氨酸治疗肝硬化肝性脑病的Meta分析

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国全科医学 2012年第30期15卷 3451-3454,3459页

作者：王旷靖宋汉明安徽省马鞍山市人民医院消化内科 243000

目的评价L-鸟氨酸-L-门冬氨酸(LOLA)治疗肝硬化肝性脑病(HE)的疗效和安全性。方法计算机检索MEDLINE、PubMed、EMBase、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国生物医学文献数据库、中国科技期刊数据库(维普)、中国... 详细信息

目的评价L-鸟氨酸-L-门冬氨酸(LOLA)治疗肝硬化肝性脑病(HE)的疗效和安全性。方法计算机检索MEDLINE、PubMed、EMBase、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国生物医学文献数据库、中国科技期刊数据库(维普)、中国期刊全文数据库和万方数字化期刊全文数据库。中文检索词为:L-鸟氨酸-L-门冬氨酸、肝硬化、肝性脑病、随机对照试验;英文检索词为:L-ornithine-L-aspartate,hepatic cirrhosis,hepaticencephalopathy,randomized controlled trial。检索LOLA治疗肝硬化HE的临床随机对照试验,采用Cochrane图书馆提供的Review Manager 3.4软件对纳入的研究进行Meta分析。结果共纳入6项研究,包括512例肝硬化HE患者。纳入研究的主要结局指标有:(1)疾病临床缓解率;(2)血氨值;(3)缩短数字连接试验A(NCT-A)反应时间;(4)药物不良反应发生情况。纳入研究的Jadad评分为3～5分,均为高质量临床随机对照研究。Meta分析结果显示:(1)LOLA组HE临床缓解率高于对照组〔RR=1.49,95%CI(1.10,2.01),P=0.010〕;亚组分析结果显示,LOLA组轻微肝性脑病(MHE)临床缓解率高于对照组〔RR=2.25,95%CI(1.33,3.82),P=0.003〕,显性肝性脑病(OHE)临床缓解率也高于对照组〔RR=1.31,95%CI(1.15,1.50),P<0.0001〕。(2)LOLA组血氨值下降程度大于对照组〔WMD=-10.22,95%CI(-13.70,-6.75),P<0.00001〕。(3)LOLA组NCT-A反应时间短于对照组〔WMD=-10.34,95%CI(-14.87,-5.80),P<0.00001〕。(4)LOLA组药物不良反应发生率(13.0%)低于对照组(10.6%)〔RR=1.22,95%CI(0.69,2.17),P=0.49〕。结论现有的临床研究证据表明,LOLA可提高肝硬化HE患者疾病临床缓解率,对MHE和OHE同样有效,可明显降低肝硬化HE患者血氨水平,缩短NCT-A反应时间,且不良反应发生率低、疗效肯定、安全性好。

关键词： L-鸟氨酸-L-门冬氨酸肝硬化肝性脑病 Meta分析

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂治疗肝硬化门静脉高压症疗效和安全性的荟萃分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华内科杂志 2011年第12期50卷 1013-1018页

作者：汤绍辉张嫚嫚吴小娟王旷靖暨南大学附属第一医院消化内科广州510630

目的评价血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（ ARB）降低肝硬化门静脉高压症（PHT）患者门静脉压力的疗效及安全性.方法检索PubMed、EMBASE、Web of Science、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科... 详细信息

目的评价血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂（ ARB）降低肝硬化门静脉高压症（PHT）患者门静脉压力的疗效及安全性.方法检索PubMed、EMBASE、Web of Science、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库（维普）、万方数字化期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库等关于ARB降低肝硬化门静脉压力的随机对照试验,使用RevMan4.2版软件对入选试验进行Meta分析.结果共8个随机对照试验包含282例患者符合入选标准,其中4个为ARB与安慰剂或空白对照对比的试验,另4个为ARB与普萘洛尔对比的试验.Meta分析显示：（1）ARB降低肝静脉压力梯度的幅度明显大于安慰剂或空白对照[加权均数差值（WMD） =1.87 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa）,95％ CI 0.86～2.87 mm Hg,P=0.00003],而与普萘洛尔相比差异无统计学意义[ WMD=0.92 mm Hg,95％ CI（ -0.41～2.26）mm Hg,P=0.17].（2）ARB降低平均动脉压幅度明显大于安慰剂或空白对照[WMD=8.89 mm Hg,95％ CI（7.16 ～ 10.62）mm Hg,P＜0.00001],而与普萘洛尔相比差异无统计学意义[WMD=0.41 mm Hg,95％ CI（ -4.46～5.28） mm Hg,P=0.87]；ARB与空白对照相似,对心率无明显影响（P＞0.05）,但普萘洛尔与ARB相比则可显著降低患者心率（WMD=- 21.25,95％ CI - 25.83 ～ 16.68,P＜0.000 01）.（3） ARB对患者血清胆红素及肌酐的影响与安慰剂或空白对照相比差异无统计学意义（P＞0.05）；ARB的其他不良反应发生率高于安慰剂（P=0.03）,而与普萘洛尔相比差异无统计学意义（P=0.72）.结论 ARB可有效降低肝硬化PHT患者的门静脉压力,其疗效及对血压的影响与普萘洛尔相似,对心率及肝肾功能无明显影响,不良反应相对较少,有可能成为肝硬化PHT治疗的一种新选择.

关键词：血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂高血压,门静脉随机对照试验 Meta分析

替比夫定与拉米夫定治疗慢性乙型肝炎疗效比较的Meta分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

解放军医学杂志 2011年第6期36卷 573-577页

作者：汤绍辉吴小娟张嫚嫚王旷靖暨南大学附属第一医院消化科广州510630

目的比较替比夫定与拉米夫定对慢性乙型肝炎患者的疗效。方法检索PUBMED、EMBASE、Web of Science、TheCochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库（维普）、万方数字化期刊全文数据库... 详细信息

目的比较替比夫定与拉米夫定对慢性乙型肝炎患者的疗效。方法检索PUBMED、EMBASE、Web of Science、TheCochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国科技期刊数据库（维普）、万方数字化期刊全文数据库等有关替比夫定与拉米夫定治疗慢性乙型肝炎的临床随机对照试验,采用RevMan 4.2.10软件对入选试验进行Meta分析。结果共7项随机对照试验包含2672例慢性乙肝患者符合入选标准。Meta分析结果显示：替比夫定组的HBV DNA阴转率、HBeAg消失率、HBeAg血清学转换率、治疗应答率均明显高于拉米夫定组,RR值分别为1.46（95%CI：1.35~1.57,P〈0.00001）1、.28（95%CI：1.13~1.45,P=0.0001）1、.31（95%CI：1.14~1.52,P=0.0002）1、.31（95%CI：1.23~1.40,P〈0.00001）,而病毒耐药率和病毒学突破率则显著低于拉米夫定组,RR值分别为0.58（95%CI：0.48~0.69,P〈0.00001）和0.52（95%CI：0.44~0.60,P〈0.00001）。替比夫定组的ALT复常率和一般药物不良反应率与拉米夫定组比较无统计学差异（RR=1.13,95%CI：0.99~1.27,P=0.06;RR=1.05,95%CI：1.00~1.11,P=0.07）。替比夫定组肌酸激酶（CK）升高率高于拉米夫定组,RR值为3.26（95%CI：2.28~4.67,P〈0.00001）。结论替比夫定可强效抑制乙肝病毒复制,对慢性乙型肝炎的疗效优于拉米夫定,且相对较为安全,但其引起CK值升高应予以注意。

关键词：替比夫定拉米夫定随机对照试验肝炎,乙型,慢性 Meta分析

内镜下乳头括约肌小切开联合柱状气囊扩张术治疗高龄高危胆总管结石

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床研究 2019年第6期32卷 755-758页

作者：王旷靖沈琳方青骝张燕黄锦沈颖洲安徽省马鞍山市人民医院消化内科

目的评价内镜下乳头括约肌小切开联合柱状气囊扩张术(ESBD)治疗高龄高危胆总管结石的临床有效性及安全性。方法将2015年1月至2018年6月马鞍山市人民医院消化内科收治的58例具有ERCP高危风险因素的高龄(年龄≥80岁)胆总管患者纳入试验组... 详细信息

目的评价内镜下乳头括约肌小切开联合柱状气囊扩张术(ESBD)治疗高龄高危胆总管结石的临床有效性及安全性。方法将2015年1月至2018年6月马鞍山市人民医院消化内科收治的58例具有ERCP高危风险因素的高龄(年龄≥80岁)胆总管患者纳入试验组,选取同期住院的具有ERCP高危风险因素的低龄(年龄0.05);但试验组住院时间较对照组有所延长,差异有统计学意义(P0.05)。试验组术中、术后发生心律失常、心衰、低氧血症不良事件10例,经对症治疗后缓解;对照组仅发生2例相关不良事件,差异有统计学意义(P0.05);两组均未出现胆总管结石复发。结论临床运用ESBD取石治疗高龄高危胆总管结石安全、有效,可作为一种临床治疗手段的选择。

关键词：内镜下乳头括约肌小切开柱状气囊扩张术高龄高危胆总管结石

吲哚美辛预防ERCP术后胰腺炎的Meta分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国妇幼健康研究 2017年第S2期28卷 458-459页

作者：张嫚嫚孙妍王旷靖徐州市中心医院江苏徐州221000 马鞍山市人民医院安徽马鞍山243000

目的:系统评价吲哚美辛对内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎(post-endoscopic retrograde cholangiopancreatography pancreatitis,PEP)的预防作用。方法:检索PubMed、EMBASE、Web of Science、The Cochrane Central Register of Controlled Trials、中国期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、万方数字化期刊全文数据库等关于吲哚美辛预防ERCP术后胰腺炎的临床随机对照试验(randomized controlled trial,RCT),使用Cochrane图书馆提供的Review Manager 4.3软件对入选试验进行荟萃分析。结果:共7项临床试验满足纳入标准而入选本研究,Meta分析表明:与对照组相比,吲哚美辛可以有效预防ERCP术后高淀粉酶血症的发生(RR=0.57,95%CI:0.42-0.76,P=0.0001),降低ERCP术后胰腺炎的风险(RR=0.46,95%CI:0.34-0.62,P<0.00001);亚组分析发现吲哚美辛还能改善PEP的严重程度,不仅减少轻度PEP的发生率(RR=0.56,95%CI:0.35-0.90,P=0.02),而且显著降低中重度PEP的发生率(RR=0.43,95%CI:0.23-0.78,P=0.006)。结论:现有的临床研究证据表明:吲哚美辛可以安全有效预防ERCP术后高淀粉酶血症及胰腺炎的发生,在临床上可作为一种药物干预选择。

关键词：吲哚美辛 ERCP术后胰腺炎 Meta分析

肾上腺素黏膜下注射治疗内镜下乳头括约肌切开术并发出血

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国微创外科杂志 2019年第6期19卷 509-511页

作者：刘富强黄锦霍春燕秦向荣黄丽洁沈颖洲王旷靖安徽省马鞍山市人民医院消化科马鞍山243000 江苏省常州市第二人民医院胃肠病中心常州243000

目的探讨肾上腺素黏膜下注射技术治疗内镜下乳头括约肌切开术(endoscopic sphincterotomy,EST)并发出血的效果。方法回顾性分析2015年1月~2017年12月2个内镜中心行1562例EST的病例资料,45例(2.9%)发生EST相关出血,其中即刻出血43例(95.6... 详细信息

目的探讨肾上腺素黏膜下注射技术治疗内镜下乳头括约肌切开术(endoscopic sphincterotomy,EST)并发出血的效果。方法回顾性分析2015年1月~2017年12月2个内镜中心行1562例EST的病例资料,45例(2.9%)发生EST相关出血,其中即刻出血43例(95.6%),迟发出血2例(4.4%);渗血42例(93.3%),搏动性出血3例(6.7%);少量出血44例(97.8%),中等量出血1例(2.2%),无大量出血病例。均采用内镜下肾上腺素黏膜下注射技术止血。结果内镜下肾上腺素黏膜下注射治疗均止血成功,无需要血管栓塞或手术止血,无死亡。结论内镜下肾上腺素黏膜下注射治疗EST并发出血效果显著,并且操作简单,成本低。

关键词：十二指肠乳头括约肌切开术并发症上消化道出血内镜治疗肾上腺素

抑制IGF2基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国药房 2015年第22期26卷 3059-3062页

作者：胡卫吴胜兰王旷靖张良鹏潘兹书汤绍辉武汉大学医院内科武汉430072 暨南大学附属第一医院消化内科广州510632 武汉大学生命科学院武汉430072

目的:研究抑制人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法:将重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-h AFP-hTERT-siRNA3(简称siRNA3)转... 详细信息

目的:研究抑制人胰岛素样生长因子2(IGF2)基因的siRNA表达载体对肝癌Huh-7细胞增殖的抑制作用。方法:将重组人甲胎蛋白(hAFP)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)双启动子调控抑制IGF2基因的siRNA表达载体pGL3-h AFP-hTERT-siRNA3(简称siRNA3)转染Huh-7细胞和正常肝L-02细胞,另设阴性对照(载体p GL3-hAFP-hTERT)组和空白对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组细胞转染48 h后IGF2 mRNA表达;酶标仪检测转染0、24、48、72 h后的细胞活性;流式细胞仪检测转染48h后细胞周期、细胞凋亡;Western blot法检测细胞IGF2、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin)E2、Cyclin D2、Cdc2、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与阴性对照组和空白对照组比较,转染siRNA3的Huh-7细胞中IGF2 mRNA表达明显减弱,转染48、72 h后Huh-7细胞活性明显降低,G1期Huh-7细胞明显增加,S期Huh-7细胞明显减少;Huh-7细胞早期、晚期及总凋亡百分比均明显增加,IGF2、PCNA、Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2和Bcl-2蛋白表达均明显减弱,以上差异具有统计学意义(P0.05)。结论:重组hAFP和hTERT双启动子调控针对IGF2基因的siRNA可特异性抑制Huh-7细胞IGF2表达及细胞增殖,其可能与下调IGF2 mRNA及蛋白表达,进而引起细胞增殖相关基因PCNA、细胞周期调控相关基因Cyclin E2、Cyclin D2、Cdc2及细胞凋亡调控相关基因Bcl-2蛋白表达下调有关。

关键词：重组hAFP/hTERT双启动子 RNA干扰人胰岛素样生长因子2基因肝癌Huh-7细胞