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固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法同时测定饲料中4种林可胺类药物

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动物营养学报 2023年第6期35卷 3978-3990页

作者：王凤芹开丽霞程远之汪以真浙江大学动物科学学院教育部动物分子营养学重点实验室农业农村部华东动物营养与饲料重点实验室浙江省饲料与动物营养重点实验室杭州310058

本研究旨在建立一种同时准确测定饲料中4种林可胺类药物(林可霉素、克林霉素、克林霉素磷酸酯和吡利霉素)的方法。饲料中林可胺类药物用甲醇-0.1 mol/L磷酸氢二钾(8∶2,体积比)缓冲溶液提取,提取液经混合型强阳离子交换固相萃取小柱净化... 详细信息

本研究旨在建立一种同时准确测定饲料中4种林可胺类药物(林可霉素、克林霉素、克林霉素磷酸酯和吡利霉素)的方法。饲料中林可胺类药物用甲醇-0.1 mol/L磷酸氢二钾(8∶2,体积比)缓冲溶液提取,提取液经混合型强阳离子交换固相萃取小柱净化,采用C18色谱柱分离,流动相为0.1%甲酸溶液和乙腈,梯度洗脱,以电喷雾离子源(ESI)正离子扫描方式,在多反应监测(MRM)模式下进行测定,外标法定量。结果表明:本研究建立的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱(SPE-UPLC-MS/MS)法对饲料中林可胺类药物检出限为10μg/kg,定量限为40μg/kg;4种林可胺类药物在1~200μg/L浓度范围内,线性关系良好,相关系数(R2)均大于0.99;在4个浓度水平(40μg/kg、400μg/kg、4 mg/kg和100 mg/kg)下进行添加试验,林可胺类药物的回收率为81.5%~107.6%,相对标准偏差(RSD)为1.4%~9.8%。由此可见,本研究建立的SPE-UPLC-MS/MS法灵敏、可靠,可应用于饲料中4种林可胺类药物的准确测定。

关键词：固相萃取超高效液相色谱-串联质谱法饲料林可胺类药物

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发酵饲料对猪肉品质的影响及机制研究进展

动物营养学报 2022年第10期34卷 6185-6192页

作者：王成靳明亮单体中汪以真浙江大学动物科学学院饲料科学研究所绿色饲料与健康养殖国家工程研究中心动物分子营养学教育部重点实验室农业部(华东)动物营养与饲料重点实验室浙江省饲料与动物营养重点实验室杭州310058

我国目前生猪养殖主要是外来品种如“杜长大”等,虽然其生长性能较高,但在肉的色香味上明显不如我国地方品种猪。如何通过饲料营养适度改善猪肉品质和风味,在满足消费者对优质美味猪肉的需求上具有较为重要的意义。近年研究表明,发酵饲... 详细信息

我国目前生猪养殖主要是外来品种如“杜长大”等,虽然其生长性能较高,但在肉的色香味上明显不如我国地方品种猪。如何通过饲料营养适度改善猪肉品质和风味,在满足消费者对优质美味猪肉的需求上具有较为重要的意义。近年研究表明,发酵饲料不仅能较好地提高饲料营养品质和利用率,同时在改善肉色、提高肌内脂肪含量、调控抗氧化能力和风味等方面也发挥着重要作用。本文将从发酵饲料的现状、发酵对饲料品质的改善作用、发酵饲料对猪肉品质和风味的影响及机制等方面进行综述,旨在为发酵饲料的研发及其在优质猪肉生产中的应用提供理论依据和技术支撑。

关键词：发酵饲料饲料营养猪肉品质风味生猪养殖

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中大观霉素

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动物营养学报 2023年第3期35卷 2004-2017页

作者：王凤芹开丽霞程远之汪以真浙江大学动物科学学院动物分子营养学教育部重点实验室农业农村部华东动物营养与饲料重点实验室浙江省饲料与动物营养重点实验室杭州310058

本研究旨在建立一种准确测定饲料中大观霉素的方法。试样中大观霉素用2%三氯乙酸水溶液(含0.4%乙二胺四乙酸二钠)提取,提取液经调节pH至(4.7±0.2),由混合型阳离子交换(MCX)小柱固相萃取净化,采用亲水相互作用液相色谱法(HILIC)色谱柱分... 详细信息

本研究旨在建立一种准确测定饲料中大观霉素的方法。试样中大观霉素用2%三氯乙酸水溶液(含0.4%乙二胺四乙酸二钠)提取,提取液经调节pH至(4.7±0.2),由混合型阳离子交换(MCX)小柱固相萃取净化,采用亲水相互作用液相色谱法(HILIC)色谱柱分离,流动相为0.01 mol/L甲酸铵水溶液(含0.4%甲酸)和0.01 mol/L甲酸铵乙腈-水溶液(含0.4%甲酸),梯度洗脱,以电喷雾离子(ESI)正离子扫描方式,在多反应监测(MRM)模式下进行测定,基质匹配外标法定量。结果表明:本试验建立的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法对饲料中大观霉素检出限为1.0 mg/kg,定量限为2.0 mg/kg。不同饲料基质中大观霉素在0.1~10.0μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数(R^(2))均大于0.99。在4个浓度水平(2.0、20.0、200.0和1000.0 mg/kg)进行添加试验,大观霉素的回收率为91.3%~104.2%,相对标准偏差(RSD)为1.5%~9.4%。由此可见,本试验建立的固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法灵敏、可靠,可应用于饲料中大观霉素的准确测定。

关键词：固相萃取超高效液相色谱-串联质谱饲料大观霉素

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毛细管电泳法测定猪体组织中甜菜碱含量

分析化学 2001年第11期29卷 1269-1272页

作者：胡彩虹汪以真许梓荣浙江大学饲料科学研究所浙江大学饲料科学研究所杭州310029

建立了毛细管电泳法快速测定猪体组织中甜菜碱含量的方法。甜菜碱首先转化为苯甲酰甲基酯后直接上样测定。pH为 3 .0的磷酸缓冲溶液使甜菜碱酯化物和甜菜碱结构类似物酯化物之间以及酯化物和酯化剂之间都能很好地分离 ,这也省去了反应... 详细信息

建立了毛细管电泳法快速测定猪体组织中甜菜碱含量的方法。甜菜碱首先转化为苯甲酰甲基酯后直接上样测定。pH为 3 .0的磷酸缓冲溶液使甜菜碱酯化物和甜菜碱结构类似物酯化物之间以及酯化物和酯化剂之间都能很好地分离 ,这也省去了反应混合液的前处理。该法标准曲线的线性范围为 4～ 6 0 0mg L ,相关系数r为 0 .9999,最低检测限为 1mg L ,相对标准偏差为 2 .2 %～ 4.7% ,标准加入回收率为 95 9%～ 98.4%

关键词：甜菜碱猪毛细管电泳体组织

RNA m^(6)A甲基化调控免疫稳态的机制及研究进展

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中国科学：生命科学 2023年第3期53卷 334-346页

作者：宗鑫付杰靳明亮汪以真浙江大学动物科学学院杭州310058 动物分子营养学教育部重点实验室杭州310058 浙江省饲料及动物营养重点实验室杭州310058

免疫系统的运行依赖于对基因表达的严格调控.近些年来,发现RNA修饰N6-甲基腺苷(m^(6)A)在维持机体免疫稳态过程中发挥着重要作用.本综述在介绍RNA m^(6)A修饰及其研究方法的基础上,总结了RNA m^(6)A调控免疫稳态的机制及研究进展,包括... 详细信息

免疫系统的运行依赖于对基因表达的严格调控.近些年来,发现RNA修饰N6-甲基腺苷(m^(6)A)在维持机体免疫稳态过程中发挥着重要作用.本综述在介绍RNA m^(6)A修饰及其研究方法的基础上,总结了RNA m^(6)A调控免疫稳态的机制及研究进展,包括免疫识别、抗病毒感染、抗细菌感染、获得性免疫应答以及肿瘤免疫.此外,讨论了该领域当前的一些挑战,并展望了m^(6)A甲基化修饰与免疫稳态相关研究的未来方向.

关键词：表观遗传 RNA m^(6)A甲基化免疫调控免疫稳态

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动物源抗菌肽的研究现状和展望

动物营养学报 2014年第10期26卷 2934-2941页

作者：汪以真浙江大学饲料科学研究所生物饲料安全与污染防控国家工程实验室动物分子营养学教育部重点实验室农业部华东动物营养与饲料重点实验室杭州310058

动物源抗菌肽是机体先天免疫系统的重要效应分子,因其具有广谱高效抗菌活性、细胞选择性及不易产生耐药性等特点,一直被人们认为是抗生素的理想替代品。此外,由于动物体自身分泌的抗菌肽远未达到抑制细菌所需浓度,因此其生物学功能不仅... 详细信息

动物源抗菌肽是机体先天免疫系统的重要效应分子,因其具有广谱高效抗菌活性、细胞选择性及不易产生耐药性等特点,一直被人们认为是抗生素的理想替代品。此外,由于动物体自身分泌的抗菌肽远未达到抑制细菌所需浓度,因此其生物学功能不仅局限于抗菌活性。大量研究表明,抗菌肽不仅具有抗细菌、抗病毒、抗真菌、抗肿瘤等效果,在体内还表现出抗炎症反应、招募免疫细胞、促进上皮损伤修复、促进细胞吞噬细菌等重要作用。然而抗菌肽在一些方面的研究尚不透彻或存在争议,如抗菌肽是否存在耐药性以及通过重组表达技术生产的抗菌肽是否能安全有效地应用。关于抗菌肽的一些生物学功能与分子机制还有待系统深入的研究,如抗菌肽的构效关系、抗菌肽对益生菌的影响、抗菌肽与抗生素的互作效应、抗菌肽的稳定性及其吸收与代谢情况、营养物质调控内源抗菌肽的表达等。因此本文旨在从动物源抗菌肽的生物学功能、作用机制、稳定性与吸收、表达规律与营养调控、分子改良以及重组表达6个方面进行综述,为研发新型、高效、环保型抗生素替代品提供重要信息和策略。

关键词：抗菌肽生物学功能稳定性表达规律分子改良重组表达

高效转化与肉质改良及资源开发型全价饲料研究

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2000年第4期26卷 359-360页

作者：汪以真许梓荣浙江大学饲料科学研究所农业部饲料与动物营养重点实验室浙江杭州310029

蛋白质资源短缺、饲料转化效率低和畜禽肉质的下降是制约我国饲料工业和养殖业持续高效发展的主要限制因素.在开发大宗、低廉的菜籽饼(粕)蛋白资源方面,国内外多采用体外脱毒法,但成本较高;在提高饲料转化效率研究上,我国与发达国家有... 详细信息

蛋白质资源短缺、饲料转化效率低和畜禽肉质的下降是制约我国饲料工业和养殖业持续高效发展的主要限制因素.在开发大宗、低廉的菜籽饼(粕)蛋白资源方面,国内外多采用体外脱毒法,但成本较高;在提高饲料转化效率研究上,我国与发达国家有较大的差距;在用天然、无毒害饲料添加剂提高畜禽肉的色、香和味方面,国内外还未见报道.本项目通过体内解毒法开发利用菜籽饼(粕)资源,通过研究高效转化饲料添加剂和肉质改良剂来研制高效转化、肉质改良和资源开发型畜禽全价饲料.

关键词：全价饲料开发高效转化肉质改良

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甜菜碱对猪肉品质的影响及机理探讨

中国农业科学 2000年第1期33卷 97-102页

作者：汪以真许梓荣冯杰杭州310029 浙江大学饲料科学研究所!农业部饲料与动物营养重点实验室

48头60kg杜长大三元杂交猪分成对照和试验2个处理组,每个处理设3个重复栏,每栏8头猪。对照组饲喂不含甜菜碱的饲粮,试验组饲喂含1000mg/kg甜菜碱的饲粮。结果表明,与对照组相比,饲粮中添加1000mg/kg甜菜碱使试验组猪的胴体脂肪率降低了1... 详细信息

48头60kg杜长大三元杂交猪分成对照和试验2个处理组,每个处理设3个重复栏,每栏8头猪。对照组饲喂不含甜菜碱的饲粮,试验组饲喂含1000mg/kg甜菜碱的饲粮。结果表明,与对照组相比,饲粮中添加1000mg/kg甜菜碱使试验组猪的胴体脂肪率降低了18.27%(P<0.01),胴体瘦肉率提高了5.71%(P<0.05);使试验组猪背最长肌中肌红蛋白、肌内脂肪和肌苷酸含量分别提高了14.88%(P<0.05)、17.66%(P<0.05)和21.79%(P<0.05);使试验组猪肝脏中甜菜碱-高半胱氨酸甲基转移酶的总活力和比活力分别提高了16.33%(P<0.01)和15.63%((P<0.01);使试验组猪肝脏中游离肉碱的含量提高了16.50%(P<0.05);使试验组猪肌肉中酸不溶肉碱的含量以及酸不溶肉碱与游离肉碱比例分别提高了35.21%(P<0.01)和29.41%(P<0.05)。

关键词：甜菜碱肌红蛋白肌内脂肪肌苷酸肉碱

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外源核苷酸对动物的营养作用

中国饲料 2002年第3期 27-28,30页

作者：陶新汪以真浙江大学饲料科学研究所

人们曾一度认为动物机体内存在核苷酸合成途径和补救途径,因此不需要从食物中补充.然而近几年的研究结果表明,动物对外源核苷酸也有需要,并视个体的生长发育阶段和特定的生理条件不同而有很大差异.幼龄动物细胞增殖分化快,核苷酸需要量... 详细信息

人们曾一度认为动物机体内存在核苷酸合成途径和补救途径,因此不需要从食物中补充.然而近几年的研究结果表明,动物对外源核苷酸也有需要,并视个体的生长发育阶段和特定的生理条件不同而有很大差异.幼龄动物细胞增殖分化快,核苷酸需要量增加;当动物处于肝损伤、疾病和饥饿等情况时,外源核苷酸更是不可缺少的营养成分.因此有些学者将其定为'半必需'营养素和'条件'营养素.日粮核苷酸具有保护肠粘膜,调节肠道菌群,增强肝脏再生能力,提高免疫功能和维持正常脂质代谢等多方面的功能.

关键词：外源核苷酸动物营养作用