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慢性乙型肝炎患者外周血Thl7/Treg平衡及其特异性转录因子(RORγt、Foxp3)水平的分析研究

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慢性乙型肝炎患者外周血Thl7/Treg平衡及其特异性转录因子(RORγt...

作者：张茹薏昆明医科大学

学位级别：硕士

目的：分析慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者外周血Th17/Treg平衡的变化及其分析他们的特异性转录因子RORγt、Foxp3水平变化,探讨Th17/Treg失衡的原因以及其引起乙型肝炎慢性化及持续感染的免疫学机制,为CHB患者治疗提供新... 详细信息

目的：分析慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)患者外周血Th17/Treg平衡的变化及其分析他们的特异性转录因子RORγt、Foxp3水平变化,探讨Th17/Treg失衡的原因以及其引起乙型肝炎慢性化及持续感染的免疫学机制,为CHB患者治疗提供新思路,进一步预防乙肝相关性肝硬化及肝癌。方法：本研究选取2013年10月到2014年7月期间来我科门诊就诊和住院的慢性乙型肝炎患者共61例,其中轻度慢性乙型肝炎组41例、中重度慢性乙型肝炎组20例,同时选取来我院体检的正常健康者20例作为健康对照组。采用ELISA法检测HBV-marker(包括HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb);采用实时荧光定量PCR (real-time PCR)分析仪检测HBV-DNA水平;采用全自动生化分析仪检测ALT、AST、TBIL等肝功能指标;流式细胞仪分析Th17细胞和Treg细胞的频率,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定外周血转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt (retinoid-related orphan nuclear receptor γt,RORγt)和叉头/翅膀状螺旋转录因子3 (forkhead family transcription factor 3, Foxp3)的mRNA表达水平,应用SPSS 17.0统计学软件对所有数据进行统计分析。结果：***患者外周血Th17细胞/CD4+T细胞百分率,RORγtmRNA水平高于对照组,差异有统计学意义;中重度组外周血Th17细胞/CD4+T细胞百分率,RORγtmRNA水平高于轻度组和对照组,差异有统计学意义,但轻度组与对照组相比,外周血Th17细胞/CD4+T细胞百分率,RORγtmRNA水平无明显差异。2. CHB患者外周血Treg细胞/CD4+T细胞百分率,Foxp3mRNA水平高于对照组,差异有统计学意义;中重度组外周血Treg细胞/CD4+T细胞百分率,RORγtmRNA水平高于轻度组和对照组,差异有统计学意义,轻度组外周血Treg细胞/CD4+T细胞百分率,高于对照组,差异具有统计学意义,但轻度组与对照组相比,Foxp3mRNA水平无明显差异。***患者Th17/Treg细胞百分率高于对照组,差异有统计学意义;中重度组外周血Th17/Treg细胞百分率高于轻度组,差异有统计学意义,但中重度组、轻度组与对照组相比,外周血Th17/Treg细胞百分率无明显差异。HBeAg(+)组和HBeAg(-)组相比Th17/CD4+T细胞百分率、Treg/CD4+T细胞百分率及Thl7/Treg细胞百分率无明显差异。***患者轻度组和重度组的Th17细胞/CD4+T细胞百分率分别与ALT水平、RORγtmRNA水平呈正相关,差异有统计学意义,但与AST、TBIL、HBV-DNA水平无明显相关关系;轻度组和重度组的Treg细胞/CD4+T细胞百分率分别与Foxp3mRNA水平呈正相关,差异有统计学意义,但与ALT、AST、TBIL、 HBV-DNA水平无明显相关关系。轻度组和重度组的RORγtmRNA水平和Foxp3mRNA水平分别与ALT水平呈正相关,差异有统计学意义。CHB患者Th17细胞与Treg细胞呈明显正相关。5. HBeAg(+)组Th17/Treg细胞百分率分别与ALT、AST水平呈正相关,差异有统计学意义,但与TBIL、HBV-DNA水平无明显相关关系;HBeAg(-)组Th17/Treg细胞百分率与TBIL水平呈正相关,差异有统计学意义,但与ALT、AST、HBV-DNA水平无明显相关关系;轻度组和重度组的Th17/Treg细胞百分率分别于ALT、AST、TBIL、HBV-DNA水平、RORγtmRNA/Foxp3mRNA比例无明显相关关系。结论：CHB患者外周血中Treg和Th17细胞频率及转录因子RORγt及Foxp3水平较对照组升高,但Treg细胞增加比例不及Th17细胞,Th17/Treg平衡被打破,Th17/Treg免疫格局向Th17细胞一侧漂移。增高的Th17细胞可能是造成肝脏炎症、肝细胞损伤的主要原因之一,并与CHB的重症化密切相关。CHB患者体内的Treg细胞水平的高表达可下调细胞免疫功能对HBV的清除能力,可能成为引起HBV慢性持续性感染的原因之一。慢性乙肝患者体内增殖的Th17细胞又可以避免Treg细胞对病毒的保护作用使病毒在体内持续存在,因此二者的平衡在慢性乙型肝炎疾病的发生、发展和转归中至关重要。认为Th17细胞和Treg细胞水平并不影响病毒复制。

关键词：慢性乙型肝炎 Th17细胞 Treg细胞 RORγtmRNA Foxp3mRNA 丙氨酸氨基转移酶天门冬氨酸氨基转移酶总胆红素 HBVDNA

Th17/Treg细胞与HBV感染相关肝病关系的研究进展

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实用医学杂志 2015年第7期31卷 1050-1052页

作者：饶少锋游晶张茹薏昆明医科大学第一附属医院感染性疾病科 650000

人体感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）后,约10%的成人和90%的儿童转为慢性乙型肝炎或HBV携带者,并可进一步发展为肝硬化和肝细胞癌。近年研究发现,辅助性Th17细胞（T help cell 17,Th17）和调节性T细胞（regulatory T cell,T... 详细信息

人体感染乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）后,约10%的成人和90%的儿童转为慢性乙型肝炎或HBV携带者,并可进一步发展为肝硬化和肝细胞癌。近年研究发现,辅助性Th17细胞（T help cell 17,Th17）和调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）在分化发育上既相互协调又相互制约,在功能上存在着协同与拮抗的关系,与HBV感染相关肝病的发生发展密切相关。

关键词： HBV感染 Th17/Treg 乙型肝炎病毒肝细胞癌携带者细胞分化细胞因子肿瘤微环境树突状细胞肝组织炎症

辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞平衡在乙型肝炎病毒感染相关肝脏疾病进展中的作用研究

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中国全科医学 2016年第18期19卷 2121-2125页

作者：刘怀鄂游晶陈红英李鲜丽陈晓兰青张茹薏昆明医科大学第一附属医院感染科云南省昆明市650032 昆明医科大学第一附属医院肿瘤治疗中心云南省昆明市650032

目的探讨辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)平衡在乙型肝炎病毒(HBV)感染相关肝脏疾病进展中的作用。方法选取2011年1月—2015年6月昆明医科大学第一附属医院收治的符合纳入与排除标准的HBV感染者111例,并依据《实用传染... 详细信息

目的探讨辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)平衡在乙型肝炎病毒(HBV)感染相关肝脏疾病进展中的作用。方法选取2011年1月—2015年6月昆明医科大学第一附属医院收治的符合纳入与排除标准的HBV感染者111例,并依据《实用传染病学》中乙型肝炎轻、中、重度的诊断标准将患者分为A组23例(无症状慢性HBV携带者)、B组42例(轻中度慢性乙型肝炎患者)、C组18例(重度慢性乙型肝炎患者)和D组28例(乙型肝炎肝硬化患者)。同期选取本院体检中心体检健康者11例作为对照组。采用实时荧光定量系统测定HBVDNA载量,采用流式细胞仪检测外周血中Th17、Treg表达率,计算Th17/Treg比值。结果 A、B、C、D组HBVDNA载量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。5组受试者Treg表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组Th17表达率、Th17/Treg比值及B组Th17/Treg比值均低于对照组(P<0.05);B、C、D组Th17表达率、Th17/Treg比值均高于A组(P<0.05);C组Th17表达率、Th17/Treg比值均高于B组(P<0.05)。HBV感染者Th17表达率为2.7%(3.2%),Treg表达率为1.0%(1.2%),HBV-DNA载量为66.0×104(1 206.7×104)copies/ml。Th17表达率与Treg表达率呈正相关(rs=0.201,P=0.026);HBV-DNA载量与Th17表达率(rs=0.137,P=0.257)、Treg表达率(rs=-0.019,P=0.878)、Th17/Treg比值(rs=0.120,P=0.324)无直线相关关系。结论慢性HBV感染者可能普遍存在Th17/Treg失衡,且Th17/Treg比值较单一的Th17、Treg表达率可能更能准确地反映HBV感染相关肝脏疾病的进展程度。

关键词：乙型肝炎病毒乙型肝炎,慢性 T 淋巴细胞,辅助 T 淋巴细胞,调节性

辅助性T淋巴细胞17/调节性T淋巴细胞平衡在乙型肝炎病毒感染相关肝纤维化进展过程中的作用研究

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中国全科医学 2016年第18期19卷 2126-2129页

作者：刘怀鄂游晶洪敏张艳梅张禄陆丽蓉张茹薏丁洁昆明医科大学第一附属医院感染科云南省昆明市650032 昆明医科大学第一附属医院肿瘤治疗中心云南省昆明市650032

目的探讨辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)平衡在乙型肝炎病毒(HBV)感染相关肝纤维化进展过程中的作用。方法选取2011年1月—2015年6月昆明医科大学第一附属医院收治的未经抗病毒治疗的HBV感染者104例为研究对象,依据肝... 详细信息

目的探讨辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)平衡在乙型肝炎病毒(HBV)感染相关肝纤维化进展过程中的作用。方法选取2011年1月—2015年6月昆明医科大学第一附属医院收治的未经抗病毒治疗的HBV感染者104例为研究对象,依据肝脏硬度测量值(LSM)将患者分为轻度肝纤维化组29例(LSM0.05);中度肝纤维化组、重度肝纤维化组患者年龄大于轻度肝纤维化组,ALT水平高于轻度肝纤维化组(P<0.05);重度肝纤维化组患者年龄大于中度肝纤维化组(P<0.05)。中度肝纤维化组患者Th17表达率、Th17/Treg比值高于轻度肝纤维化组(P<0.05);重度肝纤维化组患者Treg表达率低于轻度肝纤维化组,Th17/Treg比值高于轻度肝纤维化组(P<0.05)。Th17表达率为2.5%(3.6%),Treg表达率为1.0%(1.0%),ALT水平为47.2(36.2)U/L,LSM为12.8(6.9)k Pa。Th17表达率与Treg表达率呈正相关(rs=0.231,P=0.018);LSM与Th17表达率(rs=0.162,P=0.428)、ALT水平(rs=0.201,P=0.526)无直线相关关系;LSM与Treg表达率呈负相关(rs=-0.215,P=0.041);LSM与Th17/Treg比值呈正相关(rs=0.268,P=0.019)。结论在HBV感染致相关肝纤维化进程中,Th17调控作用不明确,Treg有明显的负向调控作用,Th17/Treg平衡具有重要意义。

关键词：乙型肝炎病毒肝纤维化 T 淋巴细胞,辅助 T 淋巴细胞,调节性

HIV/AIDS合并HBV/HCV感染病毒载量水平及与T淋巴细胞相关性的探讨

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重庆医学 2016年第7期45卷 912-914页

作者：张茹薏游晶杨微波饶少锋昆明医科大学第一附属医院感染性疾病科 650032

目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)/艾滋病(AIDS)合并乙型肝炎病毒(HBV)/丙型肝炎病毒(HCV)感染后病毒载量水平变化及对机体T淋巴细胞免疫机制的影响。方法分别测定HIV/AIDS单纯感染组,HIV/HBV合并感染组,HIV/HCV合并感染组3组的HIV RNA、H... 详细信息

目的探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)/艾滋病(AIDS)合并乙型肝炎病毒(HBV)/丙型肝炎病毒(HCV)感染后病毒载量水平变化及对机体T淋巴细胞免疫机制的影响。方法分别测定HIV/AIDS单纯感染组,HIV/HBV合并感染组,HIV/HCV合并感染组3组的HIV RNA、HBV DNA、HCV RNA、CD4+T淋巴细胞频数、CD8+T淋巴细胞频数、CD4/CD8比值,并分析各组T淋巴细胞与HIV RNA的关系,HBV DNA/HCV RNA与HIV RNA、CD4+T淋巴细胞、CD8+T淋巴细胞、CD4/CD8比值的相关性。结果 HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组及HIV/HCV合并感染组的CD4+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05);HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组的CD8+T淋巴细胞与各自组的HIV RNA呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05);HIV/AIDS单纯感染组、HIV/HBV合并感染组及HIV/HCV合并感染组的CD4/CD8与各自组的HIV RNA呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论合并感染HBV后,HIV/AIDS患者T细胞的数量下降更明显,致HIV RNA、HBV DNA高载量,加速了HIV病情进展;感染HBV后CD4+T细胞的数量下降比感染HCV更明显。

关键词：肝炎病毒,乙型肝炎病毒,丙型 HIV/AIDS HIV RNA T淋巴细胞

JAK/STAT/SOCS信号通路对肝病中Th17/Treg平衡的调节作用

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现代免疫学 2022年第6期42卷 516-521页

作者：张茹薏刘怀鄂游晶彭玉娟昆明医科大学第一附属医院感染性疾病和肝病科国家卫健委毒品依赖和戒治重点实验室昆明650032 云南省第一人民医院感染性疾病及肝病科昆明650100

Th17及Treg是CD4~+T细胞的2个亚群,在生理状态下,二者保持平衡,但在疾病状态下会发生Th17/Treg失衡。多条信号通路参与了Th17/Treg平衡的维持,其中JAK/STAT/细胞因子信号转导抑制因子信号(suppressor of cytokine signaling, SOCS)通路... 详细信息

Th17及Treg是CD4~+T细胞的2个亚群,在生理状态下,二者保持平衡,但在疾病状态下会发生Th17/Treg失衡。多条信号通路参与了Th17/Treg平衡的维持,其中JAK/STAT/细胞因子信号转导抑制因子信号(suppressor of cytokine signaling, SOCS)通路特别是JAK/STAT/SOCS1及SOCS3对维持Th17/Treg平衡非常重要。研究发现,在病毒性肝炎、自身免疫性肝病、非酒精性肝病中均存在Th17/Treg失衡,并与疾病严重程度相关,而SOCS1及SOCS3通过JAK/STAT信号通路参与了Th17/Treg的失衡。该文结合近年相关文献对JAK/STAT/SOCS信号通路对肝病中Th17/Treg平衡的调节作用作一综述。

关键词：辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡 Janus酪氨酸激酶/信号转导及转录激活因子/细胞因子信号转导抑制因子信号通路病毒性肝炎自身免疫性肝病非酒精性肝病

慢性乙型肝炎患者外周血SOCS3 mRNA的表达及其与Th17的关系

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中国感染控制杂志 2022年第9期21卷 870-876页

作者：赵寅洲张茹薏赵家洁李敏玥宋瑞游晶昆明医科大学第一附属医院感染性疾病和肝病科国家卫生健康委员会毒品依赖和戒治重点实验室云南昆明650032 云南省第一人民医院感染性疾病科与肝病科云南昆明650034

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)以及细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3) mRNA的表达状况,探索CHB患者SOCS3 mRNA表达与Th17的关系。方法选取2021年2—8月于某院门诊就诊的30例CHB患者为研究对象,并选取同期... 详细信息

目的研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)以及细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3) mRNA的表达状况,探索CHB患者SOCS3 mRNA表达与Th17的关系。方法选取2021年2—8月于某院门诊就诊的30例CHB患者为研究对象,并选取同期正常体检者15例为对照组。采用流式细胞术(FCM)检测外周血Th17细胞频数,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清细胞因子IL-17A和IL-23表达水平,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法测定外周血SOCS3、维甲酸相关孤儿核受体γt(RORγt) mRNA表达水平,并比较两组患者的检测结果。结果 CHB患者外周血Th17细胞频数及其效应分子IL-17A、IL-23表达水平高于对照组(均P<0.05),Th17细胞频数、IL-17A与HBV DNA水平之间存在正相关(r值分别为0.570、0.563,均P<0.005)。CHB患者外周血SOCS3、RORγt mRNA表达水平高于对照组(均P<0.05),两者与HBV DNA水平正相关(r值分别为0.662、0.561,均P<0.05)。CHB患者SOCS3 mRNA与RORγt mRNA、Th17细胞频数、IL-17A之间存在正相关(r值分别为0.552、0.626、0.826,均P<0.05)。结论 CHB患者外周血SOCS3 mRNA的异常高表达,可能通过调节RORγt mRNA的表达来影响Th17的分化及其效应分子的分泌。

关键词：慢性乙型肝炎 Th17细胞细胞因子信号转导抑制因子3 SOCS3 mRNA

SOCS1/3与慢性乙型肝炎疾病进展及抗病毒治疗疗效的关系

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现代医药卫生 2021年第22期37卷 3842-3846页

作者：张茹薏刘怀鄂彭玉娟(综述) 游晶(审校) 云南省第一人民医院感染性疾病科与肝病科云南昆明650100 国家卫生健康委员会毒品依赖和戒治重点实验室/昆明医科大学第一附属医院感染性疾病和肝病科云南昆明650032

慢性乙型肝炎(CHB)可进一步发展为肝硬化和肝癌,患病人数众多,是全球重大的公共卫生问题,其发病机制十分复杂。乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)感染机体后刺激机体产生大量各种细胞因子并参与了乙肝的发病。细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)蛋... 详细信息

慢性乙型肝炎(CHB)可进一步发展为肝硬化和肝癌,患病人数众多,是全球重大的公共卫生问题,其发病机制十分复杂。乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)感染机体后刺激机体产生大量各种细胞因子并参与了乙肝的发病。细胞因子信号传导抑制因子(SOCS)蛋白家族是细胞因子信号的负调节因子,细胞因子诱导的SH2蛋白和SOCS1~78个成员均拥有可变长度和高度可变氨基酸序列的N-末端区域,中心的SH2结构域及C-末端同源区域即SOCS盒,通过与磷酸化Janus激酶结合,从而抑制Janus激酶/信号转导与转录激活因子信号通路最终调节细胞因子信号。SOCS1/3是SOCS家族中结构及功能相似的成员,参与了大部分细胞因子信号的调节,其功能失调可导致感染性疾病、炎症性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤等发生。SOCS1/3水平异常可导致乙肝相关性肝炎、肝纤维化、肝硬化,甚至肝癌疾病进展,对HBV更易感,导致乙肝慢性化;其也可通过影响干扰素水平进而影响抗HBV疗效。该文主要对SOCS1/3与CHB疾病进展及抗病毒治疗疗效的关系进行综述。

关键词：慢性乙型肝炎细胞因子信号传导抑制因子肝硬化肝癌抗病毒治疗综述

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2型糖尿病患者幽门螺杆菌感染状况分析

云南医药 2016年第5期37卷 499-501页

作者：马红晶徐秀玲郭英曹磊艳张茹薏玉溪市第三人民医院内三科云南玉溪653100 云南省第一人民医院感染科云南昆明650031

目的探讨2型糖尿病住院患者幽门螺杆菌感染状况。方法选取我科2014年1月-2015年10月收治及门诊就诊的433例2型糖尿病住院患者为观察对象,并将其又分2个亚组:伴消化不良症状亚组,不伴消化不良症状亚组。同期行健康体检的171例健康人群为... 详细信息

目的探讨2型糖尿病住院患者幽门螺杆菌感染状况。方法选取我科2014年1月-2015年10月收治及门诊就诊的433例2型糖尿病住院患者为观察对象,并将其又分2个亚组:伴消化不良症状亚组,不伴消化不良症状亚组。同期行健康体检的171例健康人群为对照组。对2组及2亚组幽门螺杆菌感染情况进行比较。结果健康人群组幽门螺杆菌阳性率为34.56%(59/171),糖尿病组幽门螺杆菌阳性率为44.11%(191/433),2组比较差异有统计学意义,P<0.05;2型糖尿病伴消化不良症状亚组、不伴消化不良症状亚组幽门螺杆菌阳性率分别为77.45%(79/102)、41.09%(136/331),2组比较差异有统计学意义,P值<0.001。结论糖尿病患者较健康人群更易感染幽门螺杆菌,其感染率明显高于健康人群。2型糖尿病伴消化不良症状患者较不伴消化不良症状患者幽门螺杆菌感染率明显增高。

关键词： 2型糖尿病幽门螺杆菌感染率调查