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抗除草剂bar基因甜菜叶绿体遗传转化研究

抗除草剂bar基因甜菜叶绿体遗传转化研究

作者：孙璟晗哈尔滨工业大学

学位级别：硕士

PPT(Phosphinothricin)是一种非选择性的除草剂,作为谷氨酰胺合成酶(Glutaminesynthetase,GS)的一种不可逆抑制剂,PPT可引起多种代谢紊乱并导致植物死亡。bar基因编码的膦丝菌素乙酰转移酶(phosphinthricin acetyltransferase, PAT),可使PPT的自由氨基乙酰化从而对PPT解毒。甜菜是我国重要的糖料作物,但对包括PPT在内的除草剂十分敏感。因此,本研究选用了具有多种优点的叶绿体转化方式,通过构建甜菜叶绿体转化载体,优化甜菜遗传转化条件,拟获得转bar基因甜菜再生植株。这项研究可为今后选育抗除草剂甜菜品种提供亲本材料。通过对甜菜外植体分化再生研究,建立并优化了甜菜再生体系,获得了大量无菌苗用于后续实验。通过对甜菜离体叶柄的抗生素敏感性研究,确定了卡那霉素和壮观霉素的适宜筛选浓度,分别为50 mg/L和40 mg/L。统计学分析显示,壮观霉素的抑制作用要强于卡那霉素,由于壮观霉素是目前叶绿体转化中应用的最广泛的抗生素之一,因此,本研究采用壮观霉素作为筛选用抗生素,以40 mg/L作为筛选浓度。成功地构建了bar基因甜菜叶绿体表达载体pSARBar,其中含有bar基因表达盒、aadA筛选标记基因表达盒及同源片段atpB/rbcL,经酶切鉴定证明了其正确性。采用基因枪法将甜菜叶绿体表达载体pSARBar转化甜菜,经抗性筛选、诱导分化,获得一批抗性芽,多次继代后,最终获得26株抗性植株。对其中部分抗性植株进行PCR检测,结果证明:有3株叶绿体基因组中整合有bar基因。以bar基因为探针,采用PCR-Southern杂交证明PCR结果的可靠性,结果表明:PCR检测呈阳性的3株中有2株的叶绿体基因组中确实整合有bar基因。本研究结果表明:bar基因已被成功导入甜菜叶绿体基因组中,这一研究结果为今后进一步研究选育抗除草剂甜菜品种奠定了基础。

关键词： bar基因甜菜叶绿体转化基因枪法载体构建

“探究光对鼠妇分布的影响”的教学反思及改进

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中学生物教学 2018年第5期 52-54页

作者：孙璟晗中国人民大学附属中学朝阳分校

对“探究光对鼠妇分布的影响”实验涉及的鼠妇捕捉、鼠妇的暂养和分装、实验装置的改进、实验课习惯养成、科学观的初步形成、关注课堂生成和拓展实验等方面进行了反思，并提出了优化方案。

关键词：鼠妇探究实验反思改进

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研制膝跳反射模型实现思维可视化

中国教育技术装备 2019年第21期 44-45,50页

作者：孙璟晗北京市朝阳区人大附中朝阳分校 100028

将抽象的机制形象化、将内隐的思维可视化是培养学生科学思维的重要方法。以此为出发点,选择初中生物中抽象性较强的膝跳反射神经机制作为切入点,成功研发膝跳反射兴奋传导模型,实现思维过程的可视化。对该模型的研发、制作、使用等方... 详细信息

将抽象的机制形象化、将内隐的思维可视化是培养学生科学思维的重要方法。以此为出发点,选择初中生物中抽象性较强的膝跳反射神经机制作为切入点,成功研发膝跳反射兴奋传导模型,实现思维过程的可视化。对该模型的研发、制作、使用等方面进行介绍和归纳,以期利用该模型提升学生的理性思维。

关键词：膝跳反射教具初中生物学理性思维核心素养思维可视化模型

甜菜ATP合酶β亚基基因atpB的克隆、序列分析及进化

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植物研究 2006年第5期26卷 583-588页

作者：崔杰徐德昌李滨胜杨谦孙璟晗哈尔滨工业大学糖业研究院哈尔滨150086 黑龙江森林植物园哈尔滨150040 哈尔滨工业大学生命科学与工程系哈尔滨150001

atpB基因编码ATP合酶β亚基,是光合作用中的重要基因。ATP合酶是生物体内能量代谢的关键酶,参与氧化磷酸化和光合磷酸化反应。利用植物叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点,根据已知植物烟草、水稻和菠菜等的叶绿体基因组全序列,设... 详细信息

atpB基因编码ATP合酶β亚基,是光合作用中的重要基因。ATP合酶是生物体内能量代谢的关键酶,参与氧化磷酸化和光合磷酸化反应。利用植物叶绿体基因组在进化过程中高度保守的特点,根据已知植物烟草、水稻和菠菜等的叶绿体基因组全序列,设计并合成了一对引物,以甜菜叶绿体DNA为模板,PCR扩增得到包含atpB完整基因(GenBank登录号为DQ067451)在内的一段序列,测序与序列分析表明:该克隆片段全长2 293 bp,其中包括有1 497 bp的编码区序列,推测编码498个氨基酸。同源性比较,该克隆基因与烟草、菠菜、油菜、水稻atpB基因的核苷酸序列同源性分别为90.92%、95.79%、87.71%和86.37%,推测的氨基酸序列同源性分别为94.58%、97.19%、92.17%和91.97%。同时,建立了几种植物的氨基酸序列系统进化树。

关键词：甜菜叶绿体基因组 αtpB基因克隆与序列分析

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凋亡蛋白对Bcl-2家族几个基因表达影响

哈尔滨工业大学学报 2005年第9期37卷 1180-1182页

作者：国泰杨谦高洪雷孙璟晗王笑梅哈尔滨工业大学理学院黑龙江哈尔滨150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所黑龙江哈尔滨150001

凋亡蛋白(Apoptin)只诱导肿瘤细胞或转化的细胞凋亡,但其作用机制还不十分清楚.从鸡贫血病毒总DNA中克隆出凋亡蛋白基因,构建pcDNA3.1/CT-Apoptin-GFP-TOPO融合表达的载体.用该载体转染HHCC单层传代细胞24 h后,观察到绿色荧光蛋白表达,... 详细信息

凋亡蛋白(Apoptin)只诱导肿瘤细胞或转化的细胞凋亡,但其作用机制还不十分清楚.从鸡贫血病毒总DNA中克隆出凋亡蛋白基因,构建pcDNA3.1/CT-Apoptin-GFP-TOPO融合表达的载体.用该载体转染HHCC单层传代细胞24 h后,观察到绿色荧光蛋白表达,同时观察到细胞形态呈凋亡特征变化.提取细胞总RNA,按SuperArray芯片操作方法检测到实验组Bcl-2家族中的BimL,Bcl-2,Bax和Bak基因上调表达.Bcl-2家族在细胞凋亡的过程中作用重要.凋亡蛋白诱导HHCC细胞凋亡过程中,促凋亡的BimL,Bax 和Bak基因上调,抗凋亡的Bcl-2基因也上调.可能BimL与Bcl-2竞争性结合导致Bax或Bak释放,最终诱导细胞凋亡.揭示Bcl-2家族的基因参与凋亡蛋白诱导的HHCC细胞凋亡过程.

关键词：凋亡蛋白 HHCC细胞 Bcl-2 family genes

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两种抗生素对甜菜离体叶柄分化的影响

中国甜菜糖业 2006年第3期 18-20页

作者：孙璟晗李滨胜崔杰哈尔滨工业大学生命科学与工程系黑龙江哈尔滨150001 黑龙江森林植物园黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨工业大学食品科学与工程学院黑龙江哈尔滨150086

在培养基中添加不同浓度的卡那霉素和壮观霉素,观察抗生素对甜菜叶柄分化再生的影响。结果表明:一定浓度的卡那霉素和壮观霉素对甜菜叶柄的分化均具有抑制作用,当卡那霉素浓度为50mg/L时,叶柄分化率明显变化,当浓度达到100mg/L时,分化率... 详细信息

在培养基中添加不同浓度的卡那霉素和壮观霉素,观察抗生素对甜菜叶柄分化再生的影响。结果表明:一定浓度的卡那霉素和壮观霉素对甜菜叶柄的分化均具有抑制作用,当卡那霉素浓度为50mg/L时,叶柄分化率明显变化,当浓度达到100mg/L时,分化率为1.4%。当壮观霉素浓度为40mg/L和50mg/L时,分化率为5.7%和3.7%,当浓度为60mg/L时,基本无绿芽分化,统计学分析显示:壮观霉素的抑制作用要强于卡那霉素。结合实验结果讨论了这两种抗生素作为甜菜遗传转化研究的筛选标记的适宜浓度。

关键词：甜菜卡那霉素壮观霉素分化

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道路沥青紫外老化及抗老化材料研究综述

材料导报 2024年第1期38卷 44-56页

作者：孔令云席晗重庆交通大学土木工程学院重庆400074 重庆交通大学交通土建工程材料国家地方联合工程实验室重庆400074

道路沥青材料在使用过程中由于长期受到太阳光紫外辐射作用会产生紫外老化现象,并且这种现象在紫外辐射强度高的地区更明显。紫外老化会使沥青的物理特性和化学组成发生改变,从而导致沥青黏塑性上升、低温和疲劳性能下降、使用裂缝增加... 详细信息

道路沥青材料在使用过程中由于长期受到太阳光紫外辐射作用会产生紫外老化现象,并且这种现象在紫外辐射强度高的地区更明显。紫外老化会使沥青的物理特性和化学组成发生改变,从而导致沥青黏塑性上升、低温和疲劳性能下降、使用裂缝增加,进而劣化路面的耐久性、影响沥青路面的运营品质和服役寿命。为了防止和延缓紫外老化的产生和发展,可在道路沥青中添加抗老化材料以增强其抵御紫外老化能力,同时延长沥青路面的使用寿命并降低其性能的衰变速率。本文阐述了基于自由基和胶体理论的紫外老化机理;从处理方式、光源与辐射强度选择等方面介绍了室内模拟老化试验条件;总结了紫外老化对沥青物理和流变性能、组分构成、微观形貌、特征峰和官能团等宏微观特性的影响;归纳了现行抗老化材料的优缺点和使用情况。分析表明后期可在老化机理深度、试验方法标准化、室外老化监测、微观数值模拟、抗紫外老化剂针对性和抑制紫外老化措施等方面开展进一步研究。

关键词：道路沥青紫外老化老化机理室内模拟老化沥青特性影响抗紫外老化材料

司法专业化改革与企业短贷长投——来自破产法庭设立的证据

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外国经济与管理 2024年

作者：甄玉晗中国财政科学研究院

司法专业化是持续优化法治化营商环境的重要举措。本文利用2019年开始我国各地设立破产法庭作为准自然实验，实证考察司法专业化改革对企业短贷长投的影响。研究发现，破产法庭设立显著降低企业的短贷长投程度。具体来看，破产法庭设立... 详细信息

司法专业化是持续优化法治化营商环境的重要举措。本文利用2019年开始我国各地设立破产法庭作为准自然实验，实证考察司法专业化改革对企业短贷长投的影响。研究发现，破产法庭设立显著降低企业的短贷长投程度。具体来看，破产法庭设立通过降低企业的债务偿还风险，使企业更容易获得长期借款，从而降低短贷长投。同时，该改革还通过提高企业面临的控制权转移风险，以及缓解股东与债权人之间的代理冲突，减少了企业的过度投资，最终降低短贷长投。异质性分析发现，破产法庭设立对企业短贷长投的负向影响主要存在于地区法治环境好、行业竞争不激烈、企业破产风险大、非国有企业的样本。经济后果表明，破产法庭设立通过降低企业短贷长投进一步促进了企业创新，尤其是提升了创新质量而非创新数量。本文为司法专业化改革带来的经济效益提供了实证证据，也为理解和减少企业短贷长投现象的发生提供了新的视角。

关键词：司法专业化改革短贷长投长期借款过度投资企业创新

浅谈抖音短视频在初中道德与法治课堂教学中的运用——以九年级“拓展空间”为例

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安徽教育科研 2024年第2期 115-117页

作者：孙璟庐江第四中学安徽合肥231500

短视频作为一种多媒体形式具有很强的互动性,将抖音短视频应用于初中道德与法治课程,有助于学生综合能力的培养。道德与法治课在义务教育阶段承担着立德树人的重要任务,在国家“双减”大背景下,教师在进行道德与法治课堂教学活动时,应... 详细信息

短视频作为一种多媒体形式具有很强的互动性,将抖音短视频应用于初中道德与法治课程,有助于学生综合能力的培养。道德与法治课在义务教育阶段承担着立德树人的重要任务,在国家“双减”大背景下,教师在进行道德与法治课堂教学活动时,应该融入新媒体新技术,充分整合教学资源,运用抖音短视频辅助教学,在师生交流和互动中拓展知识,引导学生主动挖掘、发现、思考问题。本文对抖音短视频在初中道德与法治课堂教学应用中存在的问题进行了分析,就如何利用抖音短视频挖掘“拓展空间”资源、丰富初中政治课堂教学提出了一些看法和建议,最后总结了抖音短视频融入初中道德与法治课堂教学的重要意义。

关键词：抖音短视频 “拓展空间” 教学资源道德与法治