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作者：卢一艳中国医科大学

学位级别：硕士

前言埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白(Ezrin-Radixin-Moesin,ERM)蛋白家族通过组成膜细胞骨架相关复合体和特殊膜结构对细胞活动进行调节,在肿瘤的侵袭转移中起了重要的作用。细胞骨架连接蛋白ezrin属于ERM家族成员之一,定位于6q25.2-6q26编... 详细信息

前言埃兹蛋白/根蛋白/膜突蛋白(Ezrin-Radixin-Moesin,ERM)蛋白家族通过组成膜细胞骨架相关复合体和特殊膜结构对细胞活动进行调节,在肿瘤的侵袭转移中起了重要的作用。细胞骨架连接蛋白ezrin属于ERM家族成员之一,定位于6q25.2-6q26编码基因为villin2。新近研究发现ezrin高表达与多种恶性肿瘤的侵袭转移呈正相关。细胞内ezrin通过N端与C端相互作用,形成头尾连接的折叠状态遮蔽了分子表面的结合位点,处于失活状态。Fievet等发现Thr567磷酸化和PIP2共同参与ezrin活化,活化的ezrin通过连接F-肌动蛋白丝与胞膜的CD44,E-钙黏附蛋白(E-cadherin),细胞间黏附分子1/2(Intercellular adhesion molecule1/2,ICAM1/2)等发挥功能。探讨ezrin上下游调控分子,这些与调控有关的分子将会成为治疗肿瘤转移的关键。丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen Activated Protein Kinase,MAPK)是细胞的主要信号传导系统之一,p38MAPK属于MAPK的一个亚族,它通过磷酸化作用改变下游因子的表达,参与多种胞内信息传递过程。多种生长因子、炎症因子和应激反应可激活p38MAPK,p38MAPK激活后可使多种转录因子活化,影响基因转录、蛋白合成,细胞能动性和细胞骨架结构改变,在细胞侵袭、转移方面具有重要的调控功能。综上p38和ezrin只有都磷酸化后才能行使后续功能,目前关于p-p38,p-ezrin两者在介导乳腺癌转移方面的研究,国内外鲜有报道。 Mengdong Lan等研究发现小鼠永生性肝细胞系中ezrin蛋白通p38MAPK信号通路的磷酸化参与微绒毛的形成,这说明p38与ezrin可能存在着一定的联系,但是作者认为:1:转染raf-1基因的小鼠肝细胞中snail表达上调E-caherin,ezrin表达下调,微绒毛缩短,小鼠肝细胞发生上皮间质转,细胞间黏附变弱而易发生转移。2:加入p38抑制剂SB203580后,ezrin,p-ezrin,E-cadherin表达上调,微绒毛变长变粗,而snail表达下调,不易发生转移。然而我们认为:p38MAPK信号通路可能参与ezrin C端(Thr567)的磷酸化,使p-ezrin上调,微绒毛变长变粗,从而增强肿瘤的侵袭转移能力。为此本实验在回顾乳腺癌中p-ezrin和p-p38表达的基础上,着重研究两者在乳腺癌细胞系中的关系。探讨p38MAPK通路是否参与ezrin C端(Thr567)的磷酸化,影响p-ezrin蛋白表达,微绒毛的形成。为乳腺癌复发转移的治疗提供新的理论依据。材料和方法 1、材料 (1)临床资料80例乳腺癌组织,取自于中国医科大学附属第一医院2001年1月至2007年5月手术切除标本。所有患者术前未经任何治疗。80例均为乳腺浸润性导管癌(IDC),TNM分期Ⅰ-Ⅱ期51例,Ⅲ-Ⅳ期29例。有淋巴结转移33例;收集50例外科手术切除新鲜乳腺组织标本,标本取出后立即置-70℃冰冻保存。其中30例为IDC,有淋巴结转移为13例,20例为乳腺纤维腺瘤。 (2)细胞系三种人乳腺细胞系(MCF-10A为乳腺正常上皮细胞系,MCF-7为低侵袭低转移癌细胞系,MDA-MB-435s为高侵袭高转移癌细胞系)原购自北京协和基础医学院细胞中心,本实验由中国医科大学已有的细胞复苏而得。 (3)主要试剂抗人p-p38单克隆抗体(#9216)和兔抗人p-ezrin单克隆抗体(#3149)购自Cell signaling公司。p38MAPK特异性抑制剂SB203580(#559398)购自美国Calbiochem公司,于-20℃保存待用。异硫氰四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽(TRITC-Phalloidin)购自Sigma公司,Transwell小室(孔径8um)购自Corning公司。 2、方法 (1)免疫组织化学技术80例标本经10%中性福尔马林固定,常规石蜡包埋,4μm厚连续切片,采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法(Streptavidin-peroxidase,S-P)按说明书行免疫组化染色。p-p38稀释比例为1∶200,p-ezrin稀释比例为1∶50;以PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性乳腺癌切片作阳性对照。 (2)Western blot技术总蛋白从组织、生长到对数期收集的细胞及不同浓度的SB203580(0、5、10、20umol/L)处理24小时后的435s细胞中提取。用Bradford法测定蛋白浓度。取等量蛋白,进行SDS-PAGE和转印,分别孵育一抗(p-p38 1∶400,p-ezrin1∶400稀释)4℃过夜,相应二抗(1∶4000)37℃孵育,ECL发光,

关键词： p-p38 p-ezrin 乳腺癌转移

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混合痔伴可疑Whipple病1例并文献复习

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世界华人消化杂志 2015年第14期23卷 2351-2354页

作者：孟庆成卢一艳康春博曲军航天中心医院普通外科北京市100049 航天中心医院病理科北京市100049

为提高对罕见病种Whipple病(Whipple disease,WD)的进一步认识,增强临床疑难疾病的诊断及鉴别诊断能力.本文对1例可疑直肠WD患者的病史特点、临床症状、手术后的病理资料进行分析,并进行文献复习.WD临床表现复杂多样,可累及多系统,尤其... 详细信息

为提高对罕见病种Whipple病(Whipple disease,WD)的进一步认识,增强临床疑难疾病的诊断及鉴别诊断能力.本文对1例可疑直肠WD患者的病史特点、临床症状、手术后的病理资料进行分析,并进行文献复习.WD临床表现复杂多样,可累及多系统,尤其是消化系统,起病隐匿,症状可不典型,易被临床医生忽视,确诊有赖于活体组织病理检查.

关键词： Whipple病诊断外科治疗

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实时CEUS评估甲状腺乳头状癌侵袭性及其与病理微血管密度的关系

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中国医学影像技术 2019年第7期35卷 993-996页

作者：周易梁蕾孟晓暄卢一艳郭君北京大学航天临床医学院航天中心医院超声科

目的探讨CEUS评估甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的价值及其与病理微血管密度(MVD)的关系。方法分析52例经手术病理证实的PTC的CEUS特征,并对术后病理切片进行MVD计数,分析MVD计数与CEUS特征的关系。结果 PTC结节周边区计数高于中心区(t=0.0... 详细信息

目的探讨CEUS评估甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的价值及其与病理微血管密度(MVD)的关系。方法分析52例经手术病理证实的PTC的CEUS特征,并对术后病理切片进行MVD计数,分析MVD计数与CEUS特征的关系。结果 PTC结节周边区计数高于中心区(t=0.024,P=0.041),同时有颈部淋巴结转移PTC患者结节周边区MVD计数高于无颈部淋巴结转移的PTC患者(P=0.039)。PTC结节周边区时间-强度曲线AUC与结节周边区、结节总体MVD计数呈正相关(r=0.45、0.41,P均<0.05)。结论 PTC的CEUS表现差异与病理MVD计数相关;CEUS定量分析对评估PTC侵袭性具有重要价值。

关键词：甲状腺肿瘤超声检查造影剂微血管密度

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细胞HE染色涂片与细胞蜡块检测晚期非小细胞肺癌胸腔积液标本中表皮生长因子受体基因突变

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中南大学学报（医学版） 2022年第1期47卷 35-44页

作者：侯芳齐长海卢一艳李方郝志红航天中心医院病理科北京100049

目的:伴发胸腔积液的晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者已失去手术机会,表皮生长因子受体(epithelial growth factor receptor,EGFR)酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)是EGFR敏感突变的晚期NSCLC患者的一线用药。但EGFR-TKIs治疗时或治疗后出现的疾病进展以及药物的更新迭代给临床诊治带来了挑战,需要对存档的胸腔积液细胞样本进行EGFR复检或比对研究。本研究采用细胞HE染色涂片与细胞蜡块两种制作方法对NSCLC胸腔积液样本的EGFR突变基因进行检测,分析两种保存方式、保存时间对胸腔积液细胞DNA质量的影响,以期探索出一条保存细胞学资料及充分利用细胞学档案资料的可靠途径。方法:选取2014年10月—2021年4月航天中心医院病理科接收的胸腔积液样本57例,所有样本同时制作细胞HE染色涂片与细胞蜡块。将57例配对的细胞HE染色涂片与细胞蜡块采用扩增阻碍突变系统-聚合酶链反应(amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction,ARMS-PCR)技术进行EGFR基因突变检测。DNA检测浓度为2 ng/μL,细胞HE涂片与配对细胞蜡块DNA样本并排进行扩增。结果判读按试剂说明书要求,待测样本的8号孔外控循环阈值(cycle threshold,Ct值)在13~21之间为样本合格,EGFR基因突变Ct值一致率为100%;细胞HE染色涂片的ΔCt值小于配对细胞蜡块的ΔCt值(t=4.526,P0.05)。57例配对细胞蜡块与细胞HE染色涂片的外控Ct值均在13~21之间。2014—2015年、2016—2017年的细胞蜡块与细胞HE染色涂片的外控Ct值均高于2018—2019年、2020—2021年(均P一致性,且细胞HE染色涂片的DNA质量优于细胞蜡块,但细胞HE染色涂片的局限在于不可复制性,建议在胸腔积液标本制作中进行多张涂片,以满足多次检测的需求。

关键词：表皮生长因子受体非小细胞肺癌胸腔积液细胞HE染色涂片细胞蜡块

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女性腹膜假黏液瘤的临床病理特征及预后影响因素分析

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中华妇产科杂志 2013年第8期48卷 595-601页

作者：卢一艳郭爱桃刘爱军石怀银解放军总医院病理科北京100853 海南分院病理科

目的探讨女性腹膜假黏液瘤的临床病理特征及预后影响因素。方法回顾性分析解放军总医院1982年1月至2011年12月间收治的48例女性腹膜假黏液瘤患者的临床病理及随访资料，探讨腹膜假黏液瘤的临床病理特征。采用Kaplan—Meier法计算患者生... 详细信息

目的探讨女性腹膜假黏液瘤的临床病理特征及预后影响因素。方法回顾性分析解放军总医院1982年1月至2011年12月间收治的48例女性腹膜假黏液瘤患者的临床病理及随访资料，探讨腹膜假黏液瘤的临床病理特征。采用Kaplan—Meier法计算患者生存率，并采用log—rank检验、Cox风险比例模型分别对预后影响因素进行单因素及多因素分析。结果（1）临床病理特征：48例患者的平均年龄为58．8岁（24～79岁）；症状：以腹胀、腹部不适为主；影像学检查：多数提示腹盆腔有非特异性占位性病变。治疗：48例患者均行剖腹探查及外科肿瘤细胞减灭术（CRS），其中肿瘤切除的完整性（CCR）分级为CCR－1者15例（31％）、CCR－2者24例（50％）、CCR－3者9例（19％）；6例（12％）患者术中行顺铂腹腔热灌注化疗（HIPEC），20例（42％）术后行不同方案的辅助化疗。病理类型：分为3型，即腹膜弥漫性黏液性腺瘤病、腹膜黏液性腺癌病以及伴有中间型形态的腹膜黏液性腺癌病，分别为22例（46％）、9例（19％）、17例（35％）；阑尾肿瘤类型：44例（92％）患者行阑尾切除术，其中阑尾肿瘤38例（包括低级别阑尾黏液性腺瘤20例、阑尾黏液性腺癌18例）、阑尾炎2例、不详4例，另4例（8％）未行阑尾切除术的患者，分别于首次手术后1、11、32和85个月出现腹腔肿瘤复发并发现阑尾黏液性肿瘤；实质脏器累及：卵巢累及者34例（71％，其中右侧累及者15例、双侧均累及者13例、左侧累及者6例），卵巢以外的其他实质脏器累及者10例（21％）。（2）预后影响因素：48例患者中随访期内（随访1～479个月），11例死亡、31例存活、6例失访，患者总生存时间为1～312个月，中位总生存时间为99个月，3、5和10年总生存率分别为73．3％、68．0％和46．6％。单因素分析显示，年龄、病理类型及其他实质脏器累及与患者的预后有关（P〈0．05）；而手术次数、阑尾肿瘤类型、卵巢累及、CCR分级、术中HIPEC及术后辅助化疗均与患者的预后无关（P〉0．05）。多因素分析显示，病理类型与年龄是影响患者预后的独立因素（P〈0．05）。结论腹膜假黏液瘤的临床表现无特异性，治疗宜行CRS联合HIPEC，并应常规探查双侧卵巢、行阑尾切除术。腹膜假黏液瘤的10年总生存率低，年龄、病理类型及卵巢以外的其他实质脏器累及与患者预后相关，且病理类型和年龄为影响患者预后的独立因素。

关键词：假黏液瘤腹膜阑尾肿瘤卵巢肿瘤预后

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法尼醇X受体在结直肠肿瘤组织中的表达及其临床意义

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肿瘤研究与临床 2021年第8期33卷 579-584页

作者：何秋凤李琳卢一艳张彩丽朱元民航天中心医院北京大学航天临床医学院消化科北京100049 航天中心医院北京大学航天临床医学院病理科北京100049 青岛大学附属医院输血科青岛266000

目的探讨法尼醇X受体(FXR)在正常肠黏膜、结直肠腺瘤(CRA)、结直肠癌(CRC)演变进程中的表达变化,以及FXR表达与结直肠肿瘤患者临床病理特征及预后的关系。方法应用UALCAN网站工具分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中CRC以及正常结直肠组织... 详细信息

目的探讨法尼醇X受体(FXR)在正常肠黏膜、结直肠腺瘤(CRA)、结直肠癌(CRC)演变进程中的表达变化,以及FXR表达与结直肠肿瘤患者临床病理特征及预后的关系。方法应用UALCAN网站工具分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中CRC以及正常结直肠组织中FXR基因转录本的表达水平。选取2019年1月至2020年9月于航天中心医院行肠镜检查及治疗的患者,采用免疫组织化学法检测100例CRA组织、47例CRC组织以及11名健康人正常结肠黏膜组织(健康对照)中FXR蛋白表达情况;结合临床资料,分析FXR蛋白表达与结直肠肿瘤患者临床病理特征之间的关系。依据Kaplan-Meier Plotter在线数据库分析CRC患者FXR基因转录本中位表达水平,将患者分为FXR低表达组和高表达组,分析FXR基因表达与CRC患者预后的关系。结果对TCGA数据库数据分析显示,CRC组织中FXR基因转录本表达水平低于正常结直肠组织(P0.05);不同性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤长径、分化程度、TNM分期及是否有脉管癌栓的CRC患者间FXR蛋白阳性率差异均无统计学意义(均P>0.05)。依据Kaplan-Meier Plotter在线数据库生存分析显示,FXR高表达的CRC患者无复发生存优于FXR低表达患者(P=0.003)。结论FXR在健康人、CRA、CRC人群肠道组织中表达水平依次降低。FXR低表达的CRC患者预后不良。

关键词：结直肠肿瘤腺癌腺瘤法尼醇Ⅹ受体生物学标记预后

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乳腺癌分子分型研究进展

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中国实验诊断学 2011年第6期15卷 1130-1133页

作者：陈桂秋卢一艳王丽萍牛春波张秀茹吉林大学中日联谊医院病理科吉林长春130033 北京航天中心医院病理科北京100039

长期以来,组织病理学诊断是肿瘤诊断的＂金标准＂和临床治疗的基础,但组织学类型、TNM分期都相同的肿瘤如采取相同的治疗方案,患者对治疗的反应和预后并不一致。事实上,恶性肿瘤（包括乳腺癌）是一类分子水平上高度异质性的疾病,组织学... 详细信息

长期以来,组织病理学诊断是肿瘤诊断的＂金标准＂和临床治疗的基础,但组织学类型、TNM分期都相同的肿瘤如采取相同的治疗方案,患者对治疗的反应和预后并不一致。事实上,恶性肿瘤（包括乳腺癌）是一类分子水平上高度异质性的疾病,组织学形态相同的肿瘤,其分子遗传学改变不尽一致,从而导致肿瘤治疗反应和预后的差别。传统病理形态学诊断已不能适应现代肿瘤诊治的需要。

关键词：乳腺癌分子分型组织病理学诊断分子遗传学改变肿瘤诊断临床治疗治疗反应组织学类型

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CK7 CK20 CA125及TTF-1在液基细胞学腺癌细胞中的表达及意义分析

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河北医学 2017年第2期23卷 190-193页

作者：齐长海卢一艳侯芳刘芸航天中心医院病理科北京海淀区100049

目的:研究CK7、CK20、CA125及TTF-1在液基细胞学腺癌细胞中的表达情况并分析其临床意义。方法:选取从2015年2月至2016年3月,我院病理科经组织学确诊为腺癌的浆膜腔积液标本137例,利用液基薄层细胞学制片技术以及免疫细胞化学染色方法,... 详细信息

目的:研究CK7、CK20、CA125及TTF-1在液基细胞学腺癌细胞中的表达情况并分析其临床意义。方法:选取从2015年2月至2016年3月,我院病理科经组织学确诊为腺癌的浆膜腔积液标本137例,利用液基薄层细胞学制片技术以及免疫细胞化学染色方法,观察不同组织来源腺癌细胞的CK7、CK20、CA125及TTF-1等抗体的表达情况。结果:CK7在肺腺癌的阳性率100%,卵巢浆液性癌大部分表达,肠道腺癌个别阳性;CK20在肠道腺癌中的表达阳性率为88.89%(32/36),在肺腺癌及卵巢浆液性癌中未见表达;CA125在卵巢浆液性癌中表达率为70.45%(31/44),在肺腺癌以及肠道腺癌中表达较少;TTF-1在肺腺癌中的表达阳性率为80.70%(46/57),在卵巢浆液性癌及肠道腺癌中未见表达,差异均有统计学意义(均P<0.05)。低分化肺腺癌中TTF-1表达阳性率显著低于中高分化,差异均有统计学意义(均P<0.05)。低分化卵巢浆液性癌中CA125表达阳性率显著低于中高分化,差异有统计学意义(P<0.05)。低分化肠道腺癌中CK20表达阳性率显著低于中高分化,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:CK7、CK20、CA125及TTF-1在液基细胞学腺癌细胞中的表达情况有利于鉴别浆膜腔积液中来自肺、卵巢以及肠道的腺癌。

关键词：液基细胞学检查免疫细胞化学染色腺癌浆膜腔积液

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CDCA3在食管癌中的表达及其对食管癌细胞增殖与凋亡的影响

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国际检验医学杂志 2020年第5期41卷 583-587,591页

作者：方兰卢一艳刘金楠航天中心医院病理科北京100049 中国人民解放军总医院病理科北京100039

目的研究细胞周期相关因子(CDCA3)在食管癌组织和细胞中的表达及其对食管癌细胞增殖与凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测50例食管癌组织及其配对的癌旁组织中CDCA3 mRNA的表达水平,同时检测CDCA3 mRNA在不同食管癌细胞系(Eca10... 详细信息

目的研究细胞周期相关因子(CDCA3)在食管癌组织和细胞中的表达及其对食管癌细胞增殖与凋亡的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)检测50例食管癌组织及其配对的癌旁组织中CDCA3 mRNA的表达水平,同时检测CDCA3 mRNA在不同食管癌细胞系(Eca109、Kyse-170、TE1)和人食管鳞状上皮细胞系Het-1A中的表达水平;采用si-CDCA3-1、si-CDCA3-2转染Eca109和TE1细胞,另转染si-NC作为阴性对照,MTS法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡变化;Western blot检测CDCA3、CyclinD1和cleaved caspase-3蛋白的表达变化。结果食管癌组织中CDCA3 mRNA的表达高于癌旁组织(P<0.05),Eca109、Kyse-170和TE1细胞中CDCA3 mRNA表达高于人食管鳞状上皮细胞(P<0.05)。沉默CDCA3表达后,Eca109细胞和TE1细胞的增殖率降低,G0/G1期细胞比例增加(P<0.05)。沉默CDCA3表达后,Eca109细胞和TE1细胞的凋亡率增加(P<0.05)。沉默CDCA3表达可降低CyclinD1蛋白表达和增加cleaved caspase-3蛋白表达(P<0.05)。结论CDCA3 mRNA在食管癌组织和细胞系中均高表达,干扰CDCA3的表达可能通过降低CyclinD1蛋白表达抑制细胞增殖,增加cleaved caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡,提示CDCA3可能为食管癌的潜在治疗靶标。

关键词：食管癌 CDCA3 增殖凋亡

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不同程度继发性甲状旁腺功能亢进的超声及剪切波弹性成像特征研究

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中国超声医学杂志 2018年第5期34卷 399-403页

作者：孟晓暄梁蕾卢一艳郝志红张鹏飞郭君北京大学航天临床医学院超声科北京大学航天临床医学院病理科

目的探讨不同全段甲状旁腺激素(iPTH)水平的慢性肾脏病(CKD)引起的继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)的超声及剪切波弹性成像(SWE)特征。方法根据iPTH不同将54例患者分为4组,分析甲状旁腺的大小、回声、血流和杨氏模量值,其中115枚甲状旁腺... 详细信息

目的探讨不同全段甲状旁腺激素(iPTH)水平的慢性肾脏病(CKD)引起的继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)的超声及剪切波弹性成像(SWE)特征。方法根据iPTH不同将54例患者分为4组,分析甲状旁腺的大小、回声、血流和杨氏模量值,其中115枚甲状旁腺与病理结果进行对照。结果不同iPTH水平患者甲状旁腺的超声特征不同。随着iPTH升高,患者碱性磷酸酶(ALP)升高,甲状旁腺增大、回声减低且不均匀,出现钙化及局部无回声区,血流丰富,SWE表现为腺体硬度增加且分布不均,但B组和C组有交错。弥漫性增生的腺体超声表现回声均匀,超声与病理符合率为100%(28/28),结节性增生的腺体超声表现为不均匀回声,可出现钙化及局部无回声区,超声与病理符合率为83.9%(73/87)。结论不同iPTH水平患者的甲状旁腺在超声及SWE具有不同成像特征,SWE可以反映甲状旁腺的硬度变化,但在iPTH水平处于300～2 000pg/ml之间的患者存在一定交错。超声及SWE成像特征对SHPT程度判断、增生阶段识别具有重要的临床价值。

关键词：继发性甲状旁腺功能亢进甲状旁腺超声剪切波弹性成像

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