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地锦草提取物通过miR-106-5p/TLR4信号通路改善非酒精性脂肪性肝炎

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天然产物研究与开发 2022年第12期34卷 2026-2033页

作者：刘明靓陈叶梓张磊刘朝奇周永芹袁成福何毓敏三峡大学医学院三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室宜昌443002

研究地锦草(Euphorbia humifusa Willd.)提取物对高脂饲料联合葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)诱导的非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholic steatohepatitis,NASH)的改善作用及其干预的分子机制。将SPF级别C57BL/6小鼠雌雄对半随机分为正常对照组,NASH模型组,地锦草提取物低、高剂量组(n=10)。对照组给予正常饮水和食物。模型组和药物组在实验全程的14 d中均给予高脂饲料喂养,在此期间药物组进行灌胃给药,从第8 d开始给予持续饮用2%DSS水7 d。实验结束后杀小鼠,检测小鼠血清中甘油三酯(TG),谷丙转氨酶(ALT)含量;H&E染色法观察小鼠肝组织病理学变化;根据生物信息学及前期研究预测靶向调节TLR4的miRNA;采用RT-qPCR法检测小鼠肝组织中miR-106-5p、Toll样受体4(TLR4)、IL-6及TNF-α基因的相对表达情况;Western blot法分析小鼠肝脏中TLR4、IL-1β蛋白水平表达变化。与正常组相比,模型组小鼠TG、ALT均有升高。H&E染色结果显示肝脏出现明显脂肪变性和炎症反应。RT-qPCR结果显示TLR4和炎性因子(IL-6、TNF-α)表达明显升高,而靶向调节TLR4的miR-106-5p表达降低(P<0.05)。Western blot结果显示模型组肝脏中TLR4、IL-1β蛋白表达水平升高(P<0.05)。经药物干预后,小鼠TG、ALT均有所下降;肝组织中TLR4和炎性因子mRNA相对表达水平达降低,miR-106-5p表达上升;TLR4、IL-1β蛋白表达水平下降(P<0.05)。地锦草提取物可有效改善高脂饲料联合DSS诱导的NASH的炎症情况及脂肪沉积,其机制可能与调控miR-106-5p/TLR4信号通路有关。

关键词：地锦草提取物非酒精性脂肪性肝炎 Toll样受体4 miR-106-5p

木瓜发酵物通过miR-350-3p/TLR4信号通路改善小鼠非酒精性脂肪性肝炎

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中药新药与临床药理 2022年第4期33卷 419-425页

作者：李晓晓魏承亮刘朝奇刘明靓陈叶梓袁丁张长城袁成福三峡大学肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443002 三峡大学医学院湖北宜昌443002

目的研究木瓜发酵物(CSF)对高脂饲料(HFD)联合葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的改善作用,探讨木瓜发酵物对非酒精性脂肪性肝炎小鼠miR-350-3p/Toll样受体4(TLR4)信号通路的调控机制。方法采用益生菌发酵皱皮木瓜... 详细信息

目的研究木瓜发酵物(CSF)对高脂饲料(HFD)联合葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的改善作用,探讨木瓜发酵物对非酒精性脂肪性肝炎小鼠miR-350-3p/Toll样受体4(TLR4)信号通路的调控机制。方法采用益生菌发酵皱皮木瓜,应用高脂饲料联合葡聚糖硫酸钠诱导小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型。将SPF级雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组及木瓜发酵物低、高剂量组,每组10只。灌胃给药,每天1次,连续20 d。其间,正常组给予正常饲料,模型组和木瓜发酵物组均给予高脂饲料,模型组及木瓜发酵物组在最后5 d连续给予2.5%葡聚糖硫酸钠。计算小鼠肝指数;检测小鼠血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)含量;HE染色法观察小鼠肝脏组织病理学变化;采用RT-qPCR法检测小鼠肝脏组织中miR-350-3p、TLR4、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达情况;Western Blot法分析小鼠肝脏中TLR4、TNF-α蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠肝指数、甘油三酯和胆固醇均有升高(P<0.05),HE染色结果显示肝脏出现明显脂肪变性和炎症反应,RT-qPCR结果显示TLR4和炎性因子(IL-6、TNF-α)表达明显升高(P<0.05),而miR-350-3p表达降低(P<0.05);与模型组比较,木瓜发酵物可使小鼠肝指数、肝脏甘油三酯和胆固醇明显降低(P<0.05),TLR4和炎性因子(IL-6、TNF-α)表达降低(P<0.05),而miR-350-3p表达升高(P<0.05)。结论木瓜发酵物可有效改善高脂饲料联合葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠非酒精性脂肪肝炎的炎症反应,其机制可能与调控miR-350-3p/TLR4信号通路有关。

关键词：木瓜发酵物(CSF) 非酒精性脂肪性肝炎(NASH) Toll样受体4(TLR4) miR-350-3p 小鼠

分子伴侣对白喉毒素无毒突变体CRM197重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的促进作用

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生物工程学报 2021年第4期37卷 1368-1375页

作者：杨梦婷李晓晓林晨刘明靓陈叶梓赵云刘朝奇三峡大学医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443002 三峡大学医学院湖北宜昌443002

为了获得有活性的白喉毒素突变体蛋白(Cross-reactingmaterial197,CRM197),本研究利用分子伴侣pG-KJE8与重组质粒pET28a-CRM197在大肠杆菌原核表达系统中进行共表达,来促进目的蛋白的正确折叠,进而提高CRM197蛋白的可溶性表达。将质粒... 详细信息

为了获得有活性的白喉毒素突变体蛋白(Cross-reactingmaterial197,CRM197),本研究利用分子伴侣pG-KJE8与重组质粒pET28a-CRM197在大肠杆菌原核表达系统中进行共表达,来促进目的蛋白的正确折叠,进而提高CRM197蛋白的可溶性表达。将质粒转化至大肠杆菌后并诱导其表达目的蛋白,再通过SDS-PAGE胶染色、Western blotting等技术对所得蛋白进行检测分析。结果发现:利用体外重组技术成功得到了pET28a-CRM197重组蛋白原核表达质粒,且CRM197重组蛋白在原核表达系统中主要以包涵体形式表达;通过探索和优化,确定了诱导蛋白的最佳浓度和温度,当加入终浓度为1.0 mmol/L IPTG、0.5 mg/mL L-阿拉伯糖、5.0 ng/mL四环素,在20℃条件下诱导16h时,目的蛋白的可溶性表达得到显著提高;可溶性表达的CRM197重组蛋白可以与CRM197一抗发生特异性结合,免疫反应性良好。因此,研究发现分子伴侣pG-KJE8可以促进CRM197重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达,且能很好地与CRM197一抗发生特异性结合,证实CRM197重组蛋白具有良好的免疫反应性,为CRM197蛋白的工业化生产及应用奠定了一定的基础。

关键词：白喉毒素突变体蛋白原核表达分子伴侣可溶性蛋白

广东省1036家医疗机构性病实验室梅毒血清学检测能力验证结果

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中国艾滋病性病 2022年第12期28卷 1440-1443页

作者：覃晓琳李晓晓刘明靓欧江丽方铭恒许巧珍吴兴中薛耀华黄进梅郑和平南方医科大学皮肤病医院广州市性传播疾病精准防控重点实验室广州510091

目的调查评估广东省不同医疗机构性病实验室梅毒血清学检测能力,为提高全省性病实验室梅毒检测水平提供依据。方法统一制备发放梅毒血清样本,包括梅毒非特异性血清和梅毒特异性血清,各级别性病实验室按要求分别进行梅毒非特异性血清学定... 详细信息

目的调查评估广东省不同医疗机构性病实验室梅毒血清学检测能力,为提高全省性病实验室梅毒检测水平提供依据。方法统一制备发放梅毒血清样本,包括梅毒非特异性血清和梅毒特异性血清,各级别性病实验室按要求分别进行梅毒非特异性血清学定性/定量和梅毒特异性血清学定性试验,通过省性病实验室管理信息系统上报结果,试验结果与靶值一致为正确。结果2021年,全省1036家实验室参加本次能力验证,1031家回报结果,其中33家回报部分结果,平均94.55分,合格率97.39%(972/998)。3种梅毒血清学检测中,梅毒非特异性定性和定量试验平均分分别为93.98分和90.97分,梅毒特异性定性平均分为98.33分。总得分位于全省平均分以上实验室占73.35%(732/998),不合格占2.61%(26/998)。规范化性病实验室成绩平均分(96.52分)和合格率(99.07%)均显著高于普通实验室的92.25分和95.43%。结论我省梅毒血清学检测能力处于较高水平,但不同医疗机构和实验室检测能力具有一定差异,普通实验室梅毒血清学检测能力有待加强,加强性病实验室规范化建设可促进梅毒实验室检测水平的提高。

关键词：性病实验室梅毒检测能力评价

淋球菌MlaA重组蛋白表达及多克隆抗体的制备与应用

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中国病原生物学杂志 2023年第1期18卷 19-22,29页

作者：李晓晓刘明靓江银波唐三梅吴兴中廖仪文余煜奇谢庆辉刘朝奇覃晓琳郑和平南方医科大学皮肤病医院广东广州510000 三峡大学医学院

目的原核表达、纯化淋球菌MlaA蛋白,制备并鉴定其多克隆抗体。方法构建原核表达载体pET-28a-MlaA,转化BL21(DE3)大肠埃希菌,经IPTG诱导重组蛋白的表达。通过亲和层析法纯化目的蛋白,并进行Western blot鉴定。以纯化的重组蛋白作为抗原... 详细信息

目的原核表达、纯化淋球菌MlaA蛋白,制备并鉴定其多克隆抗体。方法构建原核表达载体pET-28a-MlaA,转化BL21(DE3)大肠埃希菌,经IPTG诱导重组蛋白的表达。通过亲和层析法纯化目的蛋白,并进行Western blot鉴定。以纯化的重组蛋白作为抗原,与佐剂乳化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,3次免疫后取小鼠静脉血并分离血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定抗体效价,用Western blot、间接免疫荧光试验(IFA)和流式细胞术(FCM)检测MlaA多克隆抗体的反应性和特异性。结果 Western blot显示,pET-28a-MlaA转化BL21后表达相对分子质量为35×10^(3)的淋球菌MlaA重组蛋白。ELISA检测MlaA免疫小鼠血清抗体效价为1∶8 000~1∶32 000。Western blot、IFA和流式细胞术检测制备的抗体能识别淋球菌变性和非变性MlaA蛋白。结论成功表达并纯化淋球菌MlaA重组蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,将制备的抗体血清作为一抗对淋球菌及其他不同类菌株进行Western Blot检测后发现,制备的多克隆抗体可以特异性识别淋球菌中的MlaA蛋白。经IFA及FCM检测,结果均表明制备的多克隆抗体与淋球菌MlaA有良好的反应性。

关键词：淋球菌 MlaA蛋白重组表达蛋白纯化多克隆抗体

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重大突发公共卫生事件防控策略计算实验分析

系统工程理论与实践 2024年第6期44卷 1950-1964页

作者：刘明开吉曹杰南京理工大学经济管理学院徐州工程学院管理工程学院

本文借鉴外来物种入侵管理思想,构建一类重大突发公共卫生事件防控策略计算实验分析模型.该模型综合考虑了病毒传播扩散过程中的多重异质性,不仅为重大突发公共卫生事件的当前和未来演变构建演化情景,分析不同非医疗干预措施对事件发展... 详细信息

本文借鉴外来物种入侵管理思想,构建一类重大突发公共卫生事件防控策略计算实验分析模型.该模型综合考虑了病毒传播扩散过程中的多重异质性,不仅为重大突发公共卫生事件的当前和未来演变构建演化情景,分析不同非医疗干预措施对事件发展的影响,提供升级防控措施的最优时空节点和最小化总感染人数的策略,而且通过病毒检测约束设计,将常见的几种疫情防控策略进行了有机统一刻画.计算实验结果表明,在重大突发公共卫生事件应急响应初期,采取动态清零策略具有其独特的价值,在感染者人数、重症率、危重症率等方面都显著优于其它策略;研究同时发现病毒检测效率、接触系数等均存在明显的边际递减效应,而强软社交距离政策联合使用效果更优.

关键词：重大突发公共卫生事件防控策略计算实验入侵物种管理资源配置

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建党译者群体：行为、身份与思想

外语导刊 2024年第3期 140-147+157+161页

作者：郭靓靓吴赟同济大学外国语学院

建党译者群体是中国共产党建立时期开展相关翻译活动的译者集体。他们的译者行为具有务实性求真的共性，包括创新术语、区隔译撰、类型繁杂、选本现实；其身份是原籍为我国中东部地区，以中国共产党上海和北京早期组织成员为主的新式知... 详细信息

建党译者群体是中国共产党建立时期开展相关翻译活动的译者集体。他们的译者行为具有务实性求真的共性，包括创新术语、区隔译撰、类型繁杂、选本现实；其身份是原籍为我国中东部地区，以中国共产党上海和北京早期组织成员为主的新式知识分子，在翻译动机与能力的导引下，译者行为表征受到职业归属与组织关系规约；其秉持思想建党翻译观，强调翻译的思想性、政治性，这主要源于李大钊和陈独秀的翻译理念以及译者群体对翻译的体认。

关键词：建党译者群体译者行为务实性求真译者身份翻译思想

金属增材制造医疗器械生产环节关键控制点与案例研究

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中国医疗器械杂志 2024年第1期48卷 94-98页

作者：姜歆周敏靓上海市医疗器械化妆品审评核查中心上海市200020

该研究从监管的角度归纳总结了金属增材制造医疗器械在生产质量管理中的关键控制点,包括人员、硬件、设计开发、采购控制、生产管理和质量控制等方面,并重点分析了典型案例,为医疗器械监管部门和企业提供参考。

关键词：金属增材制造医疗器械生产质量管理案例研究

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中国数字消费发展水平及演变测度

理论月刊 2024年第5期 80-95页

作者：庞靓华锐湖北科技学院经济与管理学院湖北科技学院数学与统计学院

在国内国际双循环的新发展格局下,扩大消费既是促进国内大循环的战略基点,也是顺畅国际外循环的关键要素,数字消费的健康发展成为顺畅双循环的重要抓手。数字消费发展水平的统计评价对明确发展短板、挖掘新型消费潜力、促进数字经济与... 详细信息

在国内国际双循环的新发展格局下,扩大消费既是促进国内大循环的战略基点,也是顺畅国际外循环的关键要素,数字消费的健康发展成为顺畅双循环的重要抓手。数字消费发展水平的统计评价对明确发展短板、挖掘新型消费潜力、促进数字经济与实体经济高度融合进而实现高质量发展具有重要意义。基于2015—2020年中国省级面板数据,采用熵权TOPSIS法定量评价数字消费发展水平,利用Dagum基尼系数、非参数核密度估计等探讨时空演化特征的研究结果表明:我国数字消费发展水平逐年提升,“东高西低”的空间格局十分明显,地区间差异仍然是主要因素;数字消费发展水平呈现分散化趋势,极化现象逐渐减弱,各省份的绝对差异逐渐缩小。为此,应着力提升数字消费发展质量,进一步缩小区域差距;重视新基建对数字消费的推动作用,建立健全数字消费制度保障,优化发展环境;鼓励数字产业融合创新,拓展数字消费市场边界。

关键词：数字消费发展实力发展活力发展潜力