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桑蚕丝素—RGD融合蛋白的固态结构及其细胞粘附性分析

桑蚕丝素—RGD融合蛋白的固态结构及其细胞粘附性分析

作     者:姚菊明 祝永强 李媛 励丽 

作者单位:浙江理工大学 教育部先进纺织材料与制备技术重点实验室 浙江省中医药研究院 

会议日期:2007年

学科分类:08[工学] 080501[工学-材料物理与化学] 0805[工学-材料科学与工程(可授工学、理学学位)] 080502[工学-材料学] 

基  金:国家自然科学基金(20101011) 浙江省自然科学基金青年人才培养项目(R404066) 人事部留学回国人员择优资助项目 教育部留学回国人员科研启动基金 

关 键 词:桑蚕丝素蛋白 RGD 融合蛋白 核磁共振 细胞粘附性 

摘      要:利用基因工程方法把含有短肽 RGD 的氨基酸序列连接到桑蚕丝素蛋白的结晶序列 GAGAGS 上,通过调节 DNA 的聚合度,合成了具有[TGRGDSPA(GVPGV)GG(GAGAGS)AS] 一级结构、不同分子量的桑蚕丝素一 RGD 融合蛋白,并且通过在 M9培养基中添加[3—C]Ala 的方法进行融合蛋白的稳定同位素标记。C CP/MAS NMR 结果显示,融合蛋白中的 GAGAGS 部分具有与天然桑蚕丝素结晶部分相同的分子结构,即 Silk Ⅰ处理后为均一的分子结构.而 Silk Ⅱ处理后为不均一的分子结构,它包含了3种不同的结构成分。另一方面,对小鼠成纤维细胞 BALB/3T3在不同蛋白材料载体上的粘附和增殖性能的测定结果显示,融合蛋白对细胞的增殖性能与天然胶原蛋白相近,表现出了比胶原蛋白更好的细胞粘附性能。该研究结果显示,如果对桑蚕丝素-RGD 融合蛋白进行适当加工,可能适合于组织工程支架材料的应用。

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