直接灸对胃癌大鼠胃组织树突状细胞的影响及其免疫机制探讨

作     者：马舒雅 

作者单位：河北中医学院 

学位级别：硕士

导师姓名：潘丽佳

授予年度：2022年

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

主      题：胃癌 直接灸 足三里 树突状细胞 免疫 

摘      要：目的:观察直接灸对胃癌(Gastric Cancer,GC)大鼠的治疗效果并检测胃组织中树突状细胞(Dendritic Cells,DC)相关因子,揭示直接灸治疗对GC大鼠胃组织DC的影响,为艾灸治疗肿瘤的相关免疫机制研究提供实验依据。 方法:60只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、空白治疗组、模型组、模型治疗组4组,模型组、模型治疗组大鼠采用浓度为20mg/ml的N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N-ni-tro-N-nitrosoguanidine,MNNG)灌胃造模,灌胃剂量为10ml/kg,每日1次,给予空白治疗组、模型治疗组大鼠足三里穴、中脘穴和胃俞穴直接灸治疗,持续16周。实验期间观察并记录各组大鼠一般状态,并对其体重、24小时食水量进行记录,实验结束后制备胃组织标本,HE染色观察胃黏膜病理组织学情况,TUNEL法检测胃黏膜细胞凋亡情况,免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)和Western Blot法检测大鼠胃组织中CD80和CD86的表达量。实验数据采用SPSS 23.0统计学软件进行处理。 结果:1.实验期间空白组、空白治疗组大鼠整体状态良好,体重稳步上升,模型组较空白组、空白治疗组大鼠体重下降明显且饮水量减少(P0.05)。2.肉眼观察大鼠胃黏膜情况可见:空白组、空白治疗组大鼠胃黏膜光滑,皱襞完整且走向清晰规律,未见异常增生;模型组大鼠胃组织弹性变差,黏膜皱襞走向紊乱,可见一个甚至多个菜花样或颗粒状增生;模型治疗组大鼠胃黏膜皱襞走向紊乱,可见颗粒状或菜花样增生。***染色结果显示,空白组和空白治疗组大鼠胃黏膜分层清晰,结构完整,未观察到增生和角化;模型组胃黏膜结构排列紊乱,鳞状上皮被破坏,鳞状上皮细胞增殖和角化,并向下扩散到肌肉层,提示鳞状细胞癌样病变发展到浸润癌阶段;模型治疗组胃黏膜观察到上皮乳头状增生和乳头状瘤,但鳞状上皮没有侵入肌肉层,提示鳞状细胞癌样病变处于原位癌阶段。***法检测各组大鼠胃黏膜细胞凋亡情况,结果显示模型治疗组细胞凋亡率高于其他三组(P0.05)。***结果显示模型组大鼠胃黏膜中的CD80、CD86表达较空白组降低(P0.05),模型治疗组大鼠胃黏膜中的CD80、CD86表达较模型组升高(P0.05)。*** Blot结果显示模型治疗组胃组织内的CD80、CD86蛋白表达较模型组升高(P0.05)。 结论:直接灸大鼠“足三里、“中脘和“胃俞可以改善MNNG模型大鼠一般状态,延缓GC病理进程,促进GC组织凋亡,其机制可能与直接灸可刺激DC的活化、提高MNNG模型大鼠免疫功能有关。