基于BDNF/TrkB、GAP-43的表达探讨头针带针运动改善卒中大鼠运动功能的作用及机制

作     者：庞道宽 

作者单位：长春中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张为民

授予年度：2024年

学科分类：1005[医学-中医学] 100512[医学-针灸推拿学] 10[医学] 

主      题：头针 缺血性脑卒中 脑源性神经营养因子 肌肽相关激酶B 生长相关蛋白-43 

摘      要：目的:利用大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠,探讨头针带针运动对缺血性脑卒中后运动功能障碍(Post-stroke motor Impairment,PSMI)大鼠BDNF、TrkB和GAP-43的影响。 方法:选用40只Sprague-Dawley雄性大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、康复训练组(RT组)、头针带针运动组(SART组),每组大鼠10只。Model组、RT组、SART组均选用Zea-Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型。RT组大鼠采取康复训练(网屏训练、平衡木训练、滚笼训练)进行治疗,SART组采用头针结合康复训练进行治疗。各组均治疗7d。采用m NSS评分法评定大鼠神经功能缺损情况;TTC染色法观察脑缺血面积;HE染色法、尼氏染色法观察大鼠脑组织病理变化;实时定量基因扩增荧光检测技术(RT-qPCR)检测脑源性神经营养因子(BDNF)、肌肽相关激酶B(TrkB)和生长相关蛋白-43(GAP-43)mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测BDNF、TrkB和GAP-43蛋白表达。 结果: 1.m NSS:Sham组大鼠没有出现神经功能异常,其它3个小组大鼠在疗前都有不同程度的神经功能障碍问题,并且3组对比差异不大,P0.05;经过一周后,和Model组对比,RT组、SART组的神经功能障碍问题有所缓解,P0.05,与RT组相比,SART组神经功能障碍问题逐步缓解,神经功能障碍问题,P0.05。 ***染色:Sham组染色后,大脑左右半球呈现为均匀的红色;Model组染色后,手术侧大脑半球呈现为未染状白色;RT组与SART组较Model组比较,白色区面积减少(P0.01)。SART组脑梗死面积进一步降低(P0.01)。 ***染色:Sham组大鼠神经元组织构造完整;Model组则呈现出疏松无序状,偶有一些细胞出现不同程度的萎缩异变、浓染、肿胀、破损等;其它2组也发现形态非规则细胞组织结构,不过和Model组相比,明显缩减。 4.尼氏染色:Sham组大鼠尼氏体数量丰富,结构完整,染成紫色,细胞核结构完整,染成淡紫色;MCAO组大鼠尼氏体数量减少,胞体皱缩,胞浆变性,细胞轮廓不清晰,呈不规则排列;与MACO组相比,RT组、SART组大鼠细胞结构趋于完整,且尼氏体数量增加,染色较深。 ***-qPCR:和Sham组对比,Model组大鼠脑组织中BDNF、TrkB、GAP-43m R NA等指标水平大幅度减小,差异大,P0.01;与Model组相比,RT组的BDNF、GA P-43mRNA的表达水平显著提高(P0.05),TrkBmRNA的表达水平显著提高(P0.01),SART组的BDNF、TrkB和GAP-43mRNA的表达水平显著提高(P0.01);与RT组相比,SART组的BDNFmRNA表达水平显著提高(P0.05),TrkB、GAP-43mRNA的表达水平显著提高(P0.01)。 *** Blot:和Sham组对比,Model组大鼠脑组织BDNF、TrkB、GAP-43蛋白等指标水平大幅度减少,差异大,P0.01;和Model组对比,RT、SART组的BDN F、TrkB、GAP-43蛋白等指标水平大幅度提升,差异大,P0.01;和与RT组对比,S ART组BDNF、TrkB和GAP-43蛋白表达均显著提高差异大,P0.01。 结论: 1.头针带针运动可以改善MCAO大鼠的神经功能障碍程度,促使脑梗死范围缩减,调整患侧脑组织结构,证实头针带针运动适用脑缺血疾病治疗,能够发挥神经保护功能。 2.头针带针运动适用脑缺血疾病治疗,能够发挥神经保护功能,其机理可能与促进正常大鼠大脑皮质神经元内源性BDNF、TrkB局部蛋白的合成或分泌,调节GAP-43的表达水平,影响神经元突起变化,调控突触可塑性、促进神经网络构建和突触损伤修复等有关。