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凹凸棒石对青脚麻鸡肠道健康、免疫功能和抗生素抗性基因丰度影响的研究

作     者:靳蕊 

作者单位:南京农业大学 

学位级别:硕士

导师姓名:周岩民

授予年度:2021年

学科分类:090502[农学-动物营养与饲料科学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 

主      题:凹凸棒石 青脚麻鸡 肠道健康 免疫功能 抗生素抗性基因 

摘      要:抗生素抗性基因(ARGs)已被公认为是新型的环境污染物,严重威胁人类健康和养殖业发展,ARGs的产生、传播和扩散已经成为公共卫生事件引起广泛的关注。抗生素进入动物肠道中会诱导产生抗性菌株,这些抗性菌株随着畜禽粪便被排泄到环境中,畜禽粪便成为抗生素和ARGs的重要储存库和重要来源之一,其中鸡粪中ARGs污染最为严重,且鸡肠道中ARGs比猪等更加丰富。寻求控制ARGs的产生和扩散的有效方法已成为热点,但通过饲料调控方法减少ARGs产生的研究甚少。凹凸棒石是一种具有独特链层晶体结构的天然水合镁铝硅酸盐粘土矿物,作为原料应用于饲料可以改善动物肠道的屏障功能,增强免疫功能,调节盲肠菌群结构,并且对于抗生素和大肠杆菌均具有良好的吸附作用。为此,本文研究了凹凸棒石对青脚麻鸡肠道健康、免疫功能及四环素抗性基因丰度的影响,全文包括以下3个试验:试验一:旨在探究凹凸棒石对青脚麻鸡生长性能、血清生化、血清抗氧化能力和免疫功能的影响。试验采用2×2双因子完全随机试验设计,将256只1日龄青脚麻鸡随机分为4组,每组8个重复,每个重复8只鸡,饲喂以下4种日粮:(1)对照组:基础日粮;(2)金霉素组:基础日粮+50 mg/kg金霉素;(3)凹凸棒石组:基础日粮+10 g/kg凹凸棒石;(4)金霉素-凹凸棒石组:基础日粮+50 mg/kg金霉素+10 g/kg凹凸棒石,试验期为50天。结果表明,与对照组相比,日粮中添加凹凸棒石对青脚麻鸡平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)均无显著影响,显著降低了 21日龄、50日龄青脚麻鸡血清中丙二醛(MDA)的含量(P0.05),同时显著提高了 50日龄青脚麻鸡血清总抗氧化能力(T-AOC)(P0.05)和免疫球蛋白G(IgG)的含量(P0.05),显著降低了 50日龄麻鸡血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量(P0.05)。日粮中添加金霉素显著降低了试验后期和全期青脚麻鸡的平均日采食量(ADFI)(P0.05),显著降低了 21日龄青脚麻鸡的脾脏指数(P0.05),胸腺指数也有一定的降低趋势(P=0.098),同时显著提高了 21日龄青脚麻鸡血清中IL-1β的含量(P0.05)。试验二:旨在探究凹凸棒石对青脚麻鸡肠道黏膜抗氧化能力、肠道形态、免疫以及肠道屏障功能的影响。试验设计同试验一。结果表明,与对照组相比,日粮中添加凹凸棒石显著提高了 21日龄青脚麻鸡空肠和回肠黏膜T-AOC水平(P0.05);显著降低了 21日龄麻鸡空肠、回肠隐窝深度(CD)(P0.05)以及50日龄麻鸡回肠隐窝深度(P0.05),显著提高了 21日龄及50日龄青脚麻鸡回肠的绒毛隐窝比(VH:CD)(P0.05);显著降低了 21日龄、50日龄青脚麻鸡血清D-乳酸(D-LA)含量(P0.05),显著提高了 50日龄麻鸡空肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(SIgA)、IgG和免疫球蛋白M(IgM)含量(P0.05),同时显著降低了 21日龄麻鸡空肠黏膜白介素-6(IL-6)、回肠IL-1β的mRNA表达量(P0.05)和50日龄空肠黏膜TNF-α和IL-1β的mRNA表达量(P0.05)。日粮中添加金霉素显著提高了 21日龄青脚麻鸡回肠VH:CD(P0.05)和50日龄空肠VH:CD(P0.05),显著提高了麻鸡50日龄血清D-LA含量(P0.05)和21日龄回肠黏膜IL-6的mRNA表达量(P0.05),显著降低了50日龄麻鸡空肠黏膜闭锁小带蛋白1(ZO1)的表达水平(P0.05)。试验三:旨在探究凹凸棒石对青脚麻鸡盲肠菌群结构及盲肠微生物抗生素抗性基因丰度的影响。试验设计同试验一。结果表明,与对照组相比,日粮中添加凹凸棒石和金霉素均显著提高了 50日龄青脚麻鸡盲肠菌群的Chao1、香农指数(Shannonindex)、PD-whole tree及观察物种数数值(P0.05)。日粮中添加凹凸棒石对于麻鸡盲肠菌群结构有显著调节作用,在门水平上,凹凸棒石组中青脚麻鸡盲肠菌群厚壁菌门(Firmicutes)的丰度显著提高(P0.05),变形菌门(Proteobacteria)的丰度有提高趋势(P=0.074);在属水平上,凹凸棒石显著提高了另枝菌属(Alistipes)所占比例(P0.05)。与对照组相比,日粮中添加凹凸棒石显著降低了 50日龄麻鸡盲肠内容物中 tet(K)的相对丰度(P0.05),并有降低 tet(E)(P=0.086)、tet(M)(P=0.054)和intI1(P=0.058)相对丰度的趋势。综上所述,得出以下结论:1.日粮中添加凹凸棒石显著改善了青脚麻鸡血清抗氧化能力和免疫功能。2.日粮中添加凹凸棒石对青脚麻鸡肠道黏膜抗氧化能力

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