外泌体LncRNA-ST20-AS1在冠状动脉疾病中的表达及作为诊断标志物的价值研究

作     者：彭文君 

作者单位：广州医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：冯永文

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：外泌体 循环lncRNA 生物标志物 冠状动脉疾病 ST20-AS1 

摘      要：研究背景和目的:循环外泌体长非编码RNA(lncRNA)在多种疾病中具有重要作用。然而,关于它们在冠状动脉疾病(CAD)中的作用却知之甚少。本研究的目的是研究循环外泌体lncRNA和冠状动脉疾病之间的关系,并确定异常表达的lncRNA作为诊断冠状动脉疾病的生物标志物。方法:1.研究对象:本研究纳入了168名就诊于深圳市龙岗中心医院接受冠状动脉造影的诊断为冠状动脉疾病组共98例;和冠状动脉造影显示冠状动脉正常的受试者,共70例。所有研究均已详细记录临床资料。通过使用随机数表分别选择3名CAD患者和3名对照,然后在筛选阶段用于基因芯片分析。2.荧光定量聚合酶链式反应(reverse transcriptase polymerase chain reaction,q RT-PCR):还通过使用随机数表分别选择了20名CAD患者和20名对照患者,使用商业试剂盒从血浆外泌体沉淀中提取RNA,使用实时定量PCR(q RT-PCR)测量目的LncRNA,对目标LncRNA进行相对定量处理,以测定其在不同样本中的相对表达量。3.构建受试者工作特征(area under the receiver operating characteristic,ROC)曲线,分析血浆循环外泌体lncRNA-ST20-AS1的诊断效能。4.收集患者的临床资料,应用卡方检验分析血浆循环外泌体lncRNA-ST20-AS1与临床特征的关系。5.统计学分析:应用统计学软件IBM SPSS 22.0及Graph Pad Prism对所得数据进行统计处理、分析、作图。计量资料数据用均数±标准差表示,比较使用t检验。计数资料比较使用χ2检验。P0.05)。与对照组相比,冠状动脉疾病患者具有较低的高密度脂蛋白水平(P=0.003)、较高的低密度脂蛋白水平(P=0.043),差异具有统计学意义。2.利用Affymetrix基因芯片技术检测CAD患者与正常对照者外周血外泌体差异表达的基因,筛选出在CAD患者中差异表达显著的48个上调lncRNA和60个下调lncRNA。4.循环外泌体lncRNA-ST20-AS1用于诊断冠状动脉疾病的曲线下面积是0.643(95%CI=0.607–0.801,P%0.001)3.循环外泌体lncRNA-ST20-AS1在CAD患者中表达下上调,有望作为CAD的新型生物标志物。。5.循环外泌体lncRNA-ST20-AS1与临床指标的相关性分析:血浆外泌体包裹的ST20-AS1水平与脂蛋白a和低密度脂蛋白呈正相关,余其他临床特征的相关性无统计学意义。结论:1.循环外泌体lncRNA-ST20-AS1可能是诊断冠状动脉疾病的潜在分子生物学标志物。2.循环外泌体lncRNA-ST20-AS1可能在冠状动脉疾病的诊断中具有一定意义。