百蕊草化学成分及体外活性研究

作     者：刘振振 

作者单位：安徽医科大学 

学位级别：硕士

导师姓名：李宁

授予年度：2023年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：百蕊草 化学成分 抗氧化活性 抗炎活性 抗肿瘤活性 

摘      要：【目的】中药百蕊草药用历史悠久,早于1000多年前宋代就有民间广泛用于治疗炎症等相关疾病的记载,且疗效确切。现我国百蕊草药用资源十分丰富,但现代对其化学成分及药理活性研究较少。为进一步阐明百蕊草的药效物质基础,及推动百蕊草“老药新用进程。本课题实验鉴于前人对百蕊草化学成分研究的基础上,进一步分离其中的化学成分,以期发现活性较好的单体化合物,初步筛选乙醇提取物及单体化合物体外抗氧化、抗炎和细胞毒活性,研究结果为中药百蕊草资源合理开发利用提供依据。【方法】以百蕊草(Thesium chinense Turcz)干燥全草为研究对象,对其采取乙醇进行提取,选取石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对乙醇提取物进行萃取,之后采用硅胶层析柱,MCI层析柱,Sephadex LH-20层析柱,ODS层析柱,RP-8层析柱等各种纯化分离手段,分离纯化出单体化合物。随后利用有机波谱(NMR)结构解析技术对单体化合物进行结构鉴定,并结合Gaussian量子化学NMR计算,DP4+分析对新化合物1进行结构认证。采用DPPH法评价单体化合物的体外抗氧化能力,以LPS诱导的RAW264.7小鼠巨噬细胞为炎症模型,Griess NO法评价百蕊草乙醇提取物及单体化合物的体外抗炎能力,以及选用CCK-8法评价百蕊草乙醇提取物和单体化合物对NCI-H292,Si Ha,A549和MKN45四种人源肿瘤细胞的体外细胞毒活性。【结果】从百蕊草中共分离鉴定出57个单体化合物,依次为:Thesiumin A(1),Thesiumin B(2),(Z)-3-hexenyl-O-β-D-glucopyranosyl-(1′′→2′)-β-D-glucopyanoside(3),perlplogemn(4),periplocin(5),2-hydroxy-5-(2-hydroxy-ethyl)phenyl-β-Dglucopyranoside(6),3,5-dihydroxy-phenethyl alcohol 3-O-β-D-glucopyranoside(7),phenethyl alcoholβ-sophoroside(8),samsesquinoside(9),pinoresinol-4-O-β-Dglucoside(10),syringaresinol-4 -O-β-D-glucopyranoside(11),dihydrodehydro diconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucoside(12),(7S,8R)9 -methoxy-dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside(13),picraquassioside C(14),citrusin A(15),citrusin B(16),(erythro,erythro)-1-[4-[2-hydroxy-2-(4-hydroxy-3-methoxy-phenyl)-1-(hydroxymethyl)ethoxy]-3,5-dimethoxy phenyl]-1,2,3-propanetriol(17),1-(4-hydroxy-3-methoxy)-phenyl-2-[4-(1,2,3-trihydroxy propyl)-2-methoxy]-phenoxy-1,3-propandiol(18),lariciresinol-4-O-β-D-glucoside(19),ficusal(20),3-O-ethyl ferulate(21),pcoumaric acid(22),feruloylquinic acid(23),syringin(24),coniferin(25),alatusol D(26),scopolin(27),scopoletin(28),sinapaldehyde glucoside(29),kaempferol(30),kaempferol 3-O-β-D-glucopyranoside(31),quercetin 3-O-β-D-glucoside(32),nicotiflorin(33),loganic acid(34),paederosidic acid(35),oleuropein(36),3,5,6-trihydroxy-7-megastigmen-9-one(37),zizybeoside(38),β-adenosine(39),5 -deoxy-5 -methylsulphinyl-adenosine(40),pyrimidine-2,4-dione(41),adenine(42),cytidine(43),glaucobiose(44),ethyl-β-D-glucopyranoside(45),1,3-