门静脉高压下胃幽门螺杆菌加重小鼠肝脏损伤的机制初探

作     者：冯泽东 

作者单位：兰州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈昊

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：幽门螺杆菌 门静脉高压 细胞焦亡 

摘      要：目的:建立小鼠门静脉高压和幽门螺杆菌感染相关模型,探究门静脉高压下胃幽门螺杆菌是否加重肝脏损伤及其可能的机制。方法:(1)建立小鼠门静脉高压和幽门螺杆菌感染相关模型,24只雄性SPF级C57BL/6J小鼠随机分为4组:a.空白对照组(Sham组,n=6);b.门静脉高压组(PHT组,n=6):将肝门静脉分离裸露,部分阻断肝门静脉;c.幽门螺杆菌感染组(Hp组,n=6):小鼠连续7天接种幽门螺杆菌(1×10CFU/ml Hp菌液,0.3m L/只);d.门静脉高压组+幽门螺杆菌(PHT-Hp组,n=6):建立如上所述的PHT模型后,连续7天在PHT模型基础上接种幽门螺杆菌(1×10CFU/ml Hp菌液,0.3 m L/只);(2)4周后,所有实验小鼠吸入异氟醚实施安乐死,抽取小鼠血液,取出肝脏组织、胃组织;(3)血清学检测小鼠肝功能指标(ALT、AST)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ);(4)对肝、胃组织进行HE染色,观察病理变化。免疫组化检测幽门螺杆菌和细胞毒素相关蛋白(Cag A)的表达;(5)Western blot、免疫组化检测肝组织、胃组织中焦亡相关蛋白的表达。结果:(1)模型建立情况:4组不同模型中,Sham组成功建模6只(成功率100%),PHT组成功建模6只(成功率100%),Hp组成功建模4只(成功率66.7%),PHT-Hp组成功建模3只(成功率50%);(2)Hp组、PHT-Hp组小鼠的促炎介质IL-6、IFN-γ和肝功能指标AST、ALT均高于Sham组和PHT-Hp组,且PHT-Hp组高于Hp组(*P0.05,(?)P0.05,(?)P0.05);(3)Hp组、PHT-Hp组小鼠肝脏炎症细胞浸润及肿胀程度较Sham组、PHT组更为严重;Hp组、PHT-Hp组肝脏细胞炎症评分、气球样变评分明显高于Sham组、PHT组,且PHT-Hp组高于Hp组(*P0.05,(?)P0.05,(?)P0.05);(4)Sham组和PHT组中胃组织、肝脏组织Cag A表达阴性;Hp组与PHT-Hp组的胃组织、肝组织中均观察到Cag A阳性表达;(5)Hp组、PHT-Hp组小鼠胃组织、肝脏组织中与焦亡相关的NLRP3蛋白、ASC蛋白、Cleaved Caspase-1、GSDMD,肝脏组织中IL-1β、IL-18表达情况均显著高于Sham组和PHT组,且PHT-Hp组高于Hp组(*P0.05,(?)P0.05)。结论:(1)幽门螺杆菌感染小鼠后,会引起肝脏炎症,导致肝脏损伤;(2)门静脉高压下,幽门螺杆菌可以加重肝脏损伤;(3)细胞焦亡途径NLRP3-Caspase-1-GSDMD可能参与到门静脉高压下幽门螺杆菌加重肝脏损伤的病理过程。