分泌性中耳炎中性粒细胞弹性蛋白酶、IL-8和黏蛋白5B的相关性研究

作     者：杨志强 

作者单位：兰州大学 

学位级别：硕士

导师姓名：张小兵

授予年度：2022年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100213[医学-耳鼻咽喉科学] 10[医学] 

主      题：分泌性中耳炎 中性粒细胞弹性蛋白酶 白介素-8 黏蛋白5B 

摘      要：背景与目的分泌性中耳炎(otitis media with effusion,OME)是以中耳积液及听力下降为主要特征的一类疾病。OME好发于儿童,平均发病率约14.7%,是儿童听力下降的最常见的原因。约50%的患者听力损失20d B,20%的患者听力损失超过35d B,极大地影响了患儿的言语发育。部分患者的病程过长,最终导致粘连性中耳炎、胆脂瘤等病变,形成不可逆的听力损害。OME的病理机制尚不完全明确,近年来的研究表明中性粒细胞胞外诱捕网络(neutrophil extracellular traps,NETs)及其相关蛋白的表达在OME中发挥着重要作用;而黏蛋白5B(mucin 5B,MUC5B)与OME的炎症进展密切联系;并且白介素8(Interleukin-8,IL-8)与二者具有明显的相关性,但三者在OME患者中耳渗液中相关性研究较少。因此本课题旨在研究NETs主要蛋白中性粒细胞弹性蛋白酶(Neutrophil Elastase,NE)与IL-8、MUC5B及三者与病程长短的相关性,明确感染和NETs在OME中的病理机制。方法1.收集临床OME患者未经治疗前听力学资料,根据病程长短分为3月内、3月-6月及6月以上3组,3组之间两两比较,探究OME患者听力水平的改变。2.收集临床OME患者中耳积液,并对其进行免疫荧光染色,对中耳积液中NETs、NE、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)以及MUC5B进行定性分析。3.检测不同病程组别OME患者中耳积液游离DNA进行NETs定性及半定量分析:利用Pico Green DNA检测试剂盒检测患者游离DNA水平差异。同时分析游离DNA含量与病程之间的关系。4.检测不同病程组别OME患者NE、MPO、IL-8及MUC5B的表达差异:利用westernblot检测不同组别中NE、MPO、IL-8及MUC5B表达差异并分析其与病程相关性。结果1.中耳积液中存在NETs的特异性结构,网状结构的主要成分如NE、MPO、游离DNA含量随病程延长而增加(P值均0.05)。2.OME患者中耳积液中IL-8随病程增加而呈整体上升的趋势,与NE、MPO表达呈正相关,具有显著统计学意义(P均0.05)。3.OME患者中耳积液中MUC5B随病程延长而增加(P0.05)。结论1.NETs及其相关蛋白NE、MPO参与慢性OME病理过程,其含量的增加和IL-8的增加有关。2.慢性OME患者中耳积液中的MUC5B含量随病程延长而增多。