基于社区的肾结石发病横断面调查及肾结石患者尿液成分分析

作     者：陶晓阳 

作者单位：中国人民解放军海军军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：郁胜强

授予年度：2021年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：高效液相色谱 草酸 枸橼酸 横断面调查 流行病学特征 24h尿液分析 结石成分预测 

摘      要：第一部分液相色谱检测法在尿液草酸、枸橼酸中的应用目的本研究旨在建立一种同时测定尿中草酸、枸橼酸的含量的简便可靠高效液相色谱法,应用于肾结石患者尿液样品中的测定。方法对空白样品按样品前处理步骤操作后进样,观察待测物的保留时间内是否存在干扰;选取6份不同来源的尿液样品,按样品前处理操作后进样,观察干扰化合物与待测物的保留时间是否存在重叠。按照标准曲线与标准添加的步骤对样品进行测定,以待测物浓度为横坐标,待测物峰面积为纵坐标进行线性拟合。测定低、中、高三种不同浓度的质控样品,每批相同浓度样品于每日平均测定5份,并连续测定3个批次。根据每批次而绘制的标准曲线计算样品浓度,并与实际添加浓度进行对比,计算三种浓度的准确度,批内和批间的精密度。结果在专属性方面,尿液样本中草酸、枸橼酸的保留时间分别为9.7±0.2min和10.9±0.2min,空白样品中,草酸、枸橼酸在保留时间内均未见干扰,且尿液样品中的草酸、枸橼酸可与杂质基线分离(分离度1.5),表明该检测方法专属性良好。在灵敏度方面,草酸的检测限与定量限分别为0.6mg/L、3.1mg/L,线性范围3.1-50mg/L;枸橼酸的检测限与定量限分别为7.1mg/L、156mg/L,线性范围156-2500mg/L。结果表明该检测方法灵敏度良好,线性范围能够满足尿液中草酸、枸橼酸的日常检测需求。在检测线性时,草酸与枸橼酸的标准曲线与标准添加曲线相关系数r2均大于0.999,结果表明二者在其范围内均具有良好的线性。在准确度与精密度方面,草酸、枸橼酸的批内、批间精密度均在5%以内,符合ICH方法学验证指导原则中精密度小于15%的要求;草酸、枸橼酸的准确度在97.1-101.8%范围内,符合ICH方法学验证指导原则中准确度为85-115%的要求;该方法展现出了良好的准确度与精密度,表明该测定方法具有良好的可靠性。结论本研究建立了尿液中草酸、枸橼酸液相色谱检测法,该方法操作简便,具有良好的专属性、灵敏度、准确度与精密度,在泌尿系统结石的诊断与结石成分预测中具有良好的应用前景。第二部分海南某社区常住居民上尿路结石横断面调查及危险因素分析目的探究海南省儋州市某镇常住居民上尿路结石的流行病学特征及影响因素,并进一步分析可用于预测上尿路结石发生的指标。方法本研究采取横断面调查研究的方式,将海南省儋州市某镇常住居民作为研究对象,按照纳入标准和排除标准进行筛选,并使用自制的问卷表格进行资料的采集。调查内容主要包括膳食情况调查、一般人口学特征调查、病史采集等;同时进行体格检查、实验室检查和超声学检查,对研究对象的生理生化指标进行测量。结果本研究共纳入388名受试者,研究开始后5名受试者自愿退出,最终共收回有效调查问卷383份,其中379人接受了B超检查。共查出138例上尿路结石患者,患病率为36.4%;其中77例单侧肾结石,19例双侧肾结石,2例输尿管结石,40例肾结晶/钙化,这四个部位的结石患病率分别为20.3%、4.9%、0.5%、10.6%。调查显示该地区常住居民中,上尿路结石的男性患病率为47.3%(69/146),女性患病率为29.6%(69/233),男性明显高于女性(2x=12.072,P=0.001)。不同年龄上尿路结石患病率存在差异,其中最高年龄段为609岁,患病率为42.4%。对受试者的既往史进行回顾发现,结石组较对照组在既往上尿路结石病史(P=0.000)、自发排石史(P=0.015)方面比例更高,差异具有统计学意义。在实验室检查方面,结石组的血尿酸水平较对照组高(P=0.010),结石组24h尿量较对照组偏低(P=0.030),结石组的24h尿Ca/Cr(P=0.008)、24h尿Ca/Cit(P=0.017)均较对照组高。将差异显著的单因素指标以及具有临床意义的指标进行多因素Logistic回归分析后发现,24h尿Ca/Cit较高者发生上尿路结石的风险增加(OR=6.437,95%CI:1.226-33.784),既往有上尿路结石病史者再次发生上尿路结石的风险增加(OR=2.751,95%CI:1.492-5.072)。应用EQUIL2软件进行尿液相对过饱和度分析发现,与对照组相比,结石组草酸钙相对过饱和度(SSCa Ox)更高(P=0.021),结石组草酸钙晶体偏向于呈过饱和状态,而对照组草酸钙晶体则偏向于呈溶解状态(DGCa Ox,P=0.008)。进一步对SSCa Ox和DGCa Ox与24h尿液生化指标之间进行相关性分析和线性回归分析发现,24h尿钙、尿草酸、尿量、尿枸橼酸、尿p H、尿磷、尿钠、尿氯是SSCa Ox的显著影响因素,24h尿钙、尿量、尿草酸、尿p H、尿枸橼酸、尿磷是DGCa Ox的显著影响因素。结论本研究针对海南省儋州市某镇常住居民进行调查,发现该地区上尿路