穿山龙提取物薯蓣皂苷对PDPN小鼠坐骨神经抗氧化作用影响的研究

作     者：初阳 

作者单位：辽宁中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：冷锦红

授予年度：2020年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：穿山龙提取物薯蓣皂苷 痛性糖尿病周围神经病变 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛 

摘      要：目的:探讨穿山龙提取物薯蓣皂苷对痛性糖尿病周围神经病变小鼠坐骨神经中氧化应激相关指标表达的影响及其作用机制,为单味中药治疗痛性糖尿病周围神经病变奠定理论基础,为临床诊疗用药找到新的方向。材料与方法:选取SPF级C57BL/6雄性小鼠（周龄6-8周,体重20-25g）83只,在适应性喂养一周后随机选取12只设定为正常对照组,其余71只高脂饲料喂养8周后连续两日进行腹腔内单次注射1%的链脲佐菌素溶液（Streptozotocin,STZ）70mg/kg（PH4.2的0.1mol/L枸椽酸缓冲液配制）,每次注射前均禁食12小时。第二次注射后72h测血糖,血糖大于16.7 mmol/L的小鼠证明糖尿病小鼠模型制备成功。6周后用Von Frey纤维丝测定机械痛阈,机械痛阈值下降超过50%者为PDPN小鼠成模,将它们随机分为模型对照组、薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组和α-硫辛酸组。分别按照0周、2周、4周、6周、8周五个时间点观察各组小鼠的一般情况（包括毛色、精神状态、摄食、体重、尿量及日常活动情况等）和血糖,于0周、4周、8周三个时间点监测小鼠痛阈水平,于8周时采用比色法检测穿山龙提取物薯蓣皂苷对小鼠坐骨神经匀浆样本中SOD、GSH-Px酶活性及MDA表达的影响。结果:1.模型组小鼠的精神状态不佳,出现多饮、多食、多尿及消瘦症状,毛色枯萎无光泽,并出现蜷卧拱背、行动迟缓、气味较重等症状;治疗组小鼠也均出现上述症状,但程度较模型组轻,其中薯蓣皂苷高剂量组和α-硫辛酸组的小鼠上述症状的改善程度相对明显。2.造模组血糖水平与正常组小鼠相比均有明显提高（P0.01）;治疗组2周、4周、6周、8周血糖水平与模型组相比有明显降低（P0.05）。3.造模组体重水平与正常组小鼠相比均有明显降低（P0.01）;治疗组4周、6周、8周体重水平与模型组相比有明显升高（P0.01）。4.造模组热痛阈和机械痛阈水平与正常组小鼠相比均有明显降低（P0.01）;治疗组4周、8周热痛阈和机械痛阈水平与模型组相比有明显升高（P0.01）。5.8周时,各组小鼠坐骨神经组织匀浆中的SOD、GSH-Px酶活性、MDA水平比较:模型组及薯蓣皂苷低剂量组小鼠坐骨神经组织匀浆中SOD的水平明显低于正常组（P0.01）,薯蓣皂苷高剂量组及α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中SOD的水平低于正常组但其差异无统计学意义（P0.05）;薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中SOD的水平均明显高于模型组（P0.05）。模型组、薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组和α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中GSH-Px酶活性的水平均明显低于正常组（P0.05）,薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中GSH-Px酶活性的水平均明显高于模型组（P0.01）。模型组及薯蓣皂苷低剂量组小鼠坐骨神经组织匀浆中MDA的水平明显高于正常组（P0.05）,薯蓣皂苷高剂量组及α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中MDA的水平高于正常组但其差异无统计学意义（P0.05）;薯蓣皂苷低剂量组、薯蓣皂苷高剂量组、α-硫辛酸组小鼠坐骨神经组织匀浆中MDA水平明显低于模型组（P0.01）。结论:穿山龙提取物薯蓣皂苷能够抑制氧化应激的发生发展,缓解痛性糖尿病周围神经病变小鼠的疼痛症状,减轻痛性糖尿病周围神经病变小鼠的神经损伤。