壳聚糖改性玻璃离子水门汀对人牙龈成纤维细胞相容性的研究——附20例临床病例汇报

作     者：周佳 

作者单位：青岛大学 

学位级别：硕士

导师姓名：吉秋霞

授予年度：2019年

学科分类：08[工学] 0805[工学-材料科学与工程（可授工学、理学学位）] 080502[工学-材料学] 

主      题：壳聚糖 玻璃离子水门汀 人牙龈成纤维细胞 根面覆盖术 

摘      要：目的牙龈退缩是临床常见问题,手术治疗进行根面覆盖是治疗牙龈退缩的有效方法。牙龈退缩所导致的根面暴露常常伴发根面龋性或非龋性疾病,是根面覆盖手术的治疗难点。因此寻找一种生物相容性良好的材料充填根面后再行根面覆盖术,增加材料与牙龈组织间的结合能力,提高根面覆盖效果成为研究热点。本实验以壳聚糖改性玻璃离子水门汀作为根面充填材料,从细胞水平初步探讨人牙龈成纤维细胞与材料之间的细胞相容性及材料对细胞粘附、增殖的影响,以评价壳聚糖改性玻璃离子水门汀作为根面充填材料后与根面覆盖的牙龈组织间的结合能力,为后续的体内试验及临床应用奠定理论基础。方法将1wt%、2wt%、4wt%的壳聚糖(30KDa,DD=90%)加入到玻璃离子水门汀液中,充分反应后,按厂家建议的粉液比制备圆柱形水门汀样本。傅里叶红外光谱分析整合情况;扫描电镜观察材料的表面微结构;万能试验机检测材料第1、3、5天的抗压强度、径向抗张强度,并使用扫描电镜观察分析材料的断面特点;制备不同浓度的材料浸提液,检测浸提液的pH值;CCK-8实验检测不同浓度的材料浸提液对人牙龈成纤维细胞的毒性及增殖影响;钙黄绿素-AM荧光指示剂和扫描电镜同时观察细胞在材料表面的粘附、生长情况,并使用阿尔玛蓝试剂对材料表面的细胞增殖情况进行定量分析。结果傅里叶红外光谱发现,壳聚糖改性后的玻璃离子水门汀在1716cm处出现了新的特征峰;另外,2 wt%壳聚糖改性玻璃离子水门汀比其他实验组表现出了更好的性能:扫描电镜下可见其表面有最少量的微裂纹;到孵育的第5天时可见,2 wt%壳聚糖改性玻璃离子水门汀能有效提高水门汀的抗压强度(P0.05),且不会改变材料基本的断裂模式;在100%、50%的浸提液浓度下,2 wt%壳聚糖改性玻璃离子水门汀能显著降低水门汀浸提液的酸度(P0.01),降低材料的细胞毒性(P0.01),并有效地促进人牙龈成纤维细胞在材料表面的生长(P0.05)。当壳聚糖浓度为1wt%和4 wt%时,材料的机械性能并没有得到加强,材料浸提液的pH值改善不明显,并对人牙龈成纤维细胞的生长也未见明显的促进作用。结论本实验的研究结果表明,壳聚糖可以成功地整合到玻璃离子水门汀中,影响水门汀的理化性能和细胞相容性能;2wt%壳聚糖改性玻璃离子水门汀能有效地提高玻璃离子水门汀的机械性能和细胞相容性,能有效促进人牙龈成纤维细胞在材料表面的增殖,有望作为根面充填材料,实现根面覆盖术后的牙龈组织在其表面粘附、生长。同时,本实验的研究结果也为后续的动物试验和临床研究奠定了细胞学基础。