黑果腺肋花楸果实活性成分的提取、纯化及体外活性研究

作     者：宋健刚 

作者单位：吉林化工学院 

学位级别：硕士

导师姓名：钟方丽

授予年度：2019年

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

主      题：黑果腺肋花楸 高效液相色谱法 质量研究 黄酮 花青素 

摘      要：黑果腺肋花楸果营养丰富,含有大量的黄酮类、花青素、以及花色苷等营养成分,具有抗炎、抗辐射、降血糖、保肝等多种保健功能,可加工制作保健饮料、果汁、果酒和果酱等食品。本文对黑果腺肋花楸果总黄酮和花青素提取工艺、纯化工艺、质量研究、体外活性等方面进行了探索、研究,为黑果腺肋花楸果的进一步开发应用提供试验依据。本文首先通过多种提取方法对黑果腺肋花楸果总黄酮的提取工艺进行了考察,通过单因素与正交试验方法优化了提取工艺,其总黄酮最佳提取工艺为:离子液体用量0.03 g/g(离子液体量/生药量)、体积分数为30%的乙醇水溶液、料液比1:15(g/mL)、微波功率450 W、提取时间35 min、超声功率100 W、超声时间20 min,在优化工艺条件下其总黄酮提取率为4.95 mg/g;对离子液体辅助提取黑果腺肋花楸果中的花青素的工艺条件进行了探索,结果表明在离子液体的辅助下可以明显提高花青素的提取率,辅助提取效果最理想的离子液体为溴化-1-丁基-3-甲基咪唑、其最佳浓度为0.5 mol/L,通过单因素和正交试验对其它各因素对提取率的影响进行了考察,确定最佳的工艺条件为:提取溶剂为80%的乙醇水溶液、料液比为1:25(g/mL)、提取时间为3 h、提取温度为65℃,超声功率为70 W,在上述条件下花青素的提取率可以达到8.82 mg/g。其次,采用静态吸附与解吸的方法,通过单因素试验,优化了黑果腺肋花楸果活性成分的纯化工艺。其总黄酮的最佳纯化工艺为:上样量0.17 mg/g(生药量/树脂量),供试液浓度为40.00μg/mL,供试液pH为7.0,吸附流速为1.5 mL/min,洗脱溶媒选用70%的乙醇水溶液,洗脱液体积为3 BV,经LSA-21型树脂纯化后黑果腺肋花楸果提取物中总黄酮的含量由10.5 mg/g提高到56.8 mg/g,提高了5.5倍左右;其花青素的最佳纯化工艺为:上样量0.45 mg/g(生药量/树脂量),供试液浓度为55.77μg/mL,吸附流速为1.5 mL/min,洗脱溶媒选用50%的乙醇水溶液,洗脱液体积为1 BV。经LSA-10型树脂纯化后黑果腺肋花楸果提取物中花青素的含量由2.4 mg/g提高到19.7 mg/g,提高了8.3倍左右。再次,采用UV法测定了黑果腺肋花楸果提取物中总黄酮、花青素、原花青素含量,并对其总黄酮的含量测定方法进行了方法学研究;通过HPLC法测定了黑果腺肋花楸果中金丝桃苷的含量及黑果腺肋花楸果提取物中氯化矢车菊素的含量,试验结果表明,黑果腺肋花楸果中金丝桃苷的含量27.37μg/g、其提取物中氯化矢车菊素的含量为1.86 mg/g。然后,通过体外抗氧化试验,探索了黑果腺肋花楸果提取物的抗氧化能力,试验结果表明:黑果腺肋花楸果提取物对DPPH·,·OH,·O,ABTS·均具有清除活性,其IC值分别为2.65、2.42、0.48、0.66 mg/mL。最后,通过单因素与正交试验筛选了黑果腺肋花楸果提取物颗粒剂处方中辅料的种类、配比、用量及最佳成型工艺,并对制得的颗粒剂进行相关质量检查,制得的颗粒剂粒度、流动性与溶化性等项目检查均符合《中国药典2015版》要求,该成型工艺简单可行、稳定性好。