合成化合物神经保护作用及机制研究

作     者：张峻榕 

作者单位：吉林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：滕利荣

授予年度：2016年

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：神经保护 L-谷氨酸 6-OHDA 合成化合物 

摘      要：中枢神经系统退行性疾病,主要包括阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿氏病等,以目前患病人数的数目来看,将逐渐超过癌症会成为世界第二大死因的疾病。阿尔兹海默病又称为老年痴呆,中国是世界上人口老化基数最大的国家,患有阿尔兹海默病的人数和增长速度位居世界第一,由于阿尔兹海默症发病率高且治疗率低的原因,使得在开发关于老年痴呆性药物方面引起了世界范围的关注;帕金森病又称震颤麻痹,为世界第二大中枢神经退行性疾病,已严重困扰许多患者的日常生活质量,至今还未研发出彻底根治的药物,因此在未来研发预防和治疗帕金森病的药物将成为十分紧迫的问题。吡啶类衍生物作为一类重要的氮杂环化合物,广泛存在于天然产物和活性药物中,在药物、农药化学等领域的应用前景很广阔;而作为自然界中一类小分子化合物的萘醌类具有多种生物学活性,在医药、农药、染料等制作方面起着至关重要的角色,因其特殊的化学性质,还可作为防腐剂和杀菌剂。本论文中对吡啶类衍生物及萘醌类化合物进行了新型的合成,其中,所合成的新型二氢吡啶类化合物,产率可达77%,命名为5zou;合成的新型萘醌类化合物产率达95%,命名为3h8b。大量实验证明,作为神经毒素的谷氨酸与6-OHDA分别与阿尔兹海默症及帕金森病的部分病理机制有着密切的联系,因此本论文给药25m M的L-谷氨酸对阿尔兹海默症进行建模损伤处理以及100?M的6-OHDA诱导帕金森病模型;建模成功后,采用MTT方法检测细胞凋亡比例;Hochest 33342观察凋亡细胞的数量及现象;Fluo-4-AM荧光染色法检测钙离子含量;JC-1荧光探针法分析细胞内线粒体膜电位的变化;DCFH-DA荧光染色法检测活性氧的积累;Western blot方法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bcl-x L的表达。经结果证明,合成的新型化合物5zou及3h8b可以显著降低神经毒素所诱发的细胞凋亡率,抑制L-谷氨酸及6-OHDA所致的细胞内钙离子浓度的增加,减少线粒体跨膜电位的降低,缓解建模药物所诱发的PC12细胞胞内ROS的过量积聚,并提高细胞中Bcl-2、Bcl-x L的表达,由此可证明论文中所合成的新型化合物对6-OHDA和L-谷氨酸诱导的PC12细胞具有明显的保护作用,可作为治疗或预防中枢神经退行性疾病药物的首选。