定向迁移细胞前沿α4整合素对Rac局部化激活的分子调控机制

作     者：李思锐 

作者单位：湖南师范大学 

学位级别：硕士

导师姓名：郭向荣

授予年度：2015年

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

主      题：激光共聚焦显微镜技术 Rac蛋白激活 免疫印迹 FRET探针 荧光双定位 

摘      要：本研究项目根据已发表的,激活的整合素α4在细胞尾部、两侧,负调控Rac活性的信号转导通路的研究结果,结合相关信号分子的结构、功能,提出在细胞前沿,整合素正调控Rac活性的信号转导通路,即当α4胞内区域磷酸化进而抑制其与paxillin结合时,paxillin、GIT1,与PIX、PAK形成信号分子复合物。由于PAK为Rac的效应分子,PIX为Rac的转换分子,构成了paxillin-GIT1-PIX-PAK信号转导通路,从而促使Rac1在细胞前沿持续的局部化激活,导致片状足的形成,产生细胞向前迁移推动力的全新构想。首先我们将验证hFN对Rac蛋白的激活,然后我们将采用免疫印迹实验,初步证明这些蛋白在细胞前沿存在两两相互作用,即该处存在这样的信号分子复合物,进而通过荧光双定位验证这些分子间的相互作用可以发生在细胞前沿,最后通过FRET单分子探针,实时、定量高分辨率的监测Rac的激活时空变化图像。