慢性间歇低氧对大鼠炎症反应和血管内皮损伤的影响

作     者：张幼芬 

作者单位：吉林大学 

学位级别：硕士

导师姓名：文连姬

授予年度：2018年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100213[医学-耳鼻咽喉科学] 10[医学] 

主      题：慢性间歇低氧 阻塞性睡眠呼吸暂停 炎症反应 血管内皮功能障碍 

摘      要：研究背景:阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructive sleep apnea-hypopnea syndrome,OSAHS)是最具代表的一种睡眠呼吸障碍疾病,睡眠时上呼吸道反复塌陷造成的呼吸暂停及低通气能引起多器官多系统的损害。OSAHS已经被公认为是中风、高血压、冠心病等多种心、脑血管疾病的独立危险因素,威胁着人们的健康与生命。慢性间歇低氧(Chronic intermittent hypoxia,CIH)是OSAHS病理生理学损伤的重要机制。CIH引起机体氧化应激、炎症反应、交感神经兴奋性增高等致使血管内皮损伤,但其具体机制目前还未全面了解。研究目的:本实验通过建立CIH大鼠模型,研究CIH和TNF-α、IL-10、YKL-40、NF-κB等炎症相关因子及血管内皮损伤的关系,初步探讨CIH对炎症反应、血管内皮损伤的影响,为临床中预防和治疗OSAHS及其相关的并发疾病提供实验数据与理论依据。方法:第一部分:CIH大鼠模型的建立与验证20只Wistar大鼠随机分为2组,分别给予常氧与CIH刺激,CIH组、常氧组各10只,于实验进行8周后麻醉处死所有大鼠,取大鼠血清和主动脉待用。第二部分:酶联免疫吸附法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)检测大鼠血清IL-10、YKL-40、TNF-α含量;应用HE染色的方法观察大鼠主动脉血管内皮病理改变;应用免疫组化法检测主动脉血管YKL-40、NF-κBp65的表达。结果:第一部分:血气分析结果:在一个间歇低氧周期内,CIH组PO2,SaO2先下降后上升的,且趋势几乎与间歇低氧舱氧浓度的变化一致;而常氧组PO2,Sa O2基本保持不变。第二部分:1.ELISA结果示:与常氧组相比,CIH组大鼠血清IL-10含量明显降低,且差异具有统计学意义(P0.05);CIH组及常氧组血清中均未检测出TNF-α。2.大鼠主动脉HE染色示:常氧组大鼠主动脉血管内皮连续光滑无剥脱,内膜、中膜、外膜分层清楚无紊乱。CIH组大鼠主动脉血管内皮不光滑,内皮细胞局部剥脱缺失。3.大鼠主动脉免疫组化结果示:相较于常氧组,CIH组NF-κBp65蛋白在血管内皮表达棕褐色颗粒较多且颜色较深。积分值CIH组高于常氧组,P0.05,差异有统计学意义。常氧组及CIH组主动脉YKL-40蛋白的表达水平均很低或几乎无表达。结论:1.本实验中的慢性间歇低氧大鼠模型成功模拟了OSAHS的致病过程。2.慢性间歇低氧可以引起血管内皮损伤,其机制可能与血清IL-10表达降低及主动脉内膜NF-κBp65表达增高有关。