金银花提取物活性成分对甲型流感病毒肺炎小鼠免疫细胞因子表达影响的实验研究

作     者：奚清 

作者单位：辽宁中医药大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王雪峰

授予年度：2008年

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

主      题：金银花 提取物 甲型流感病毒 病毒性肺炎 免疫细胞因子 TNF-α IL-1β 

摘      要：目的: 通过金银花提取物对甲型流感病毒肺炎小鼠的治疗作用和对免疫细胞因子TNF-α、IL-1β表达影响的实验研究,探讨中药金银花在免疫调节过程中对细胞因子的影响机制。 方法: 1.鼻腔接种甲型流感病毒鼠肺适应株(FM1),诱导小鼠形成肺炎模型。用聚合酶链反应技术(RT-PCR)复制肺组织中流感病毒(IV)RNA并检测其表达,结合组织形态学、肺指数等指标,鉴定小鼠肺炎模型。 2.金银花提取物灌胃给药以治疗小鼠流感病毒性肺炎。观察各组小鼠一般状态、肺指数、肺组织形态学和IV RNA的表达情况,阐明金银花对流感病毒性肺炎的治疗作用。 3.采用双抗体夹心ABC显色-ELISA法检测各组小鼠血清中免疫细胞因子TNF-α、IL-1β的表达情况,初步探讨金银花提取物活性成分对免疫调节过程中细胞因子的调控作用。 结果: 1.模型复制:感染5天后,模型组的肺组织中检测到IV RNA大量表达,肺指数增高,病理改变呈间质性肺炎病变。 2.金银花提取物对肺炎小鼠的治疗作用: (1)肺炎小鼠的一般状态改善,治疗作用明显。 (2)在保护肺组织病理性改变方面:金银花组和病毒唑组肺指数均低于模型组,有显著性差异(P0.05)。光镜下观察肺组织形态表明,金银花组和病毒唑组肺组织病变较模型组均明显减轻。(3)在抑制病毒复制方面:正常组肺组织中未检测到IV病毒核酸;模型组在感染后第 5天检测到大量IV RNA表达;金银花组和病毒唑组均低于模型组,且差异具有显著性(P0.01);金银花组较病毒唑组略高,存在差异(P0.05)。 3.金银花提取物对肺炎小鼠血清中免疫细胞因子的调控: 正常组可检测到少量TNF-α、IL-1β表达;模型组较正常组TNF-α、IL-1β表达明显增强,有显著性差异(P0.01);金银花组和病毒唑组均低于模型组,且差异有显著性(P0.01);金银花组较病毒唑组略高,存在差异(P0.05)。结论: 1.幼龄昆明种小鼠鼻腔接种甲型流感病毒FM1株,可形成流感病毒性肺炎模型。用组织形态学观察,计算肺指数和RT-PCR复制病毒核酸并检测其表达可鉴定流感病毒性肺炎模型。 2.金银花提取物有一定程度的抗流感病毒性肺炎作用。 3.流感病毒性肺炎小鼠血清中免疫细胞因子TNF-α、IL-1β表达明显上调;金银花提取物对流感病毒性肺炎小鼠血清中免疫细胞因子TNF-α、IL-1β表达有调控作用。