重组人粒细胞集落刺激因子对HL-60细胞的作用及其对阿糖胞苷毒性作用影响的研究

作     者：王鈜 

作者单位：青岛大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孙立荣

授予年度：2005年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：重组人粒细胞集落刺激因子 阿糖胞苷 凋亡 MTT NBT 

摘      要：目的 研究人重组粒细胞集落刺激因子(rhuG-CSF)对人类早幼粒细胞性白血病细胞株(HL-60)的作用,及其对阿糖胞苷(Ara-c)对HL-60细胞的毒性作用的影响。 方法 一:取对数生长期的HL-60细胞为实验对象,设空白对照组和实验组,实验组加入不同浓度的rhuG-CSF,培养48小时分别进行瑞氏染色形态学观察、吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染色观察细胞凋亡、MTT实验观察细胞增殖活性、NBT实验、CD测定检测细胞分化成熟。二:另取HL-60细胞分别加入Ara-c、Ara-C+rhuG-CSF、rhuG-CSF,分别进行瑞氏染色形态学观察、MTT实验、AO/EB双染色,观察HL-60细胞的凋亡和增殖的变化。 结果 一:与rhuG-CSF培养48小时后,实验组HL-60细胞出现不同程度的变形、体积变小、出泡,小泡和细胞仍保持膜的完整性。瑞氏染色可见细胞核浓缩,紫兰色的核染色质聚集成块,有的沿核膜分布呈边集现象,可见典型的凋亡小体。MTT实验中对照组OD值与各实验组相比差别均有统计学意义(P0.05)。CD阳性率各组间差别亦无统计学意义(P0.05)。二:各实验组细胞形态变化显著,细胞变小,出泡明显。瑞氏染色细胞核浓缩、核染色质边集显现多见。MTT实验各组之间差别均有显著性统计学意义(P0.01)。AO/EB双染色细胞凋亡率各组差别有显著性统计学意义(P0.01),其中HL-60+Ara-c+ rhuG-CSF组凋亡率最高。HL-60+Ara-c组与HL-60+Ara-c+ rhuG-CSF组凋亡率比较差别亦有显著性统计学意义(P0.01)。 结论 ***-CSF有抑制HL-60细胞增殖并促进其凋亡的作用。 ***-CSF无诱导HL-60细胞分化成熟的作用。 ***-CSF可以促进Ara-c诱导HL-60细胞凋亡的作用。