par-4与2型糖尿病胰岛功能障碍关系及其机制研究

作     者：甘霞光 

作者单位：第三军医大学 

学位级别：硕士

导师姓名：陈兵

授予年度：2016年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：胰岛β细胞 凋亡 par-4 内质网应激 2 型糖尿病 

摘      要：目的:通过检测2型糖尿病患者血清par-4(Prostate Apoptosis Response-4,前列腺凋亡反应因子-4)浓度及干扰高糖高脂模拟糖尿病环境中胰岛细胞par-4的表达,观察并初步探讨Par-4对2型糖尿病胰岛β细胞凋亡和分泌功能的影响及其机制。方法:收集2型糖尿病患者组(T2DM组,n=30)及健康对照者组(N组,n=30)的临床基本资料;采集样本空腹静脉血液,采用ELISA法检测血清par-4浓度。培养NOD小鼠胰岛β细胞株NIT-1细胞,随机分为正常对照组、Par-4干扰组、高糖高脂组、高糖高脂+Par-4干扰组,采用ELISA(n=6)法检测各组par-4分泌浓度和葡萄糖刺激后的胰岛素分泌浓度;TUNEL法(n=8)检测各组细胞凋亡率;MTT法(n=10)检测各组细胞增殖能力;Western blot(n=3)检测各组细胞par-4和GRP78(Glucose Regulated Protein 78,葡萄糖糖调节蛋白78)表达水平。结果:2型糖尿病组和健康对照组两组患者临床基本资料无明显差异,2型糖尿病组患者血浆FBG(fasting blood-glucose空腹血糖)、HbA1c(Hemoglobin A1C糖化血红蛋白)和TG(Triglyceride,甘油三酯,3.73±3.44mmol/L)明显高于正常对照组,HDL(high density lipoprotein高密度脂蛋白,1.23±0.40mmol/L)、CP(C-peptide,C肽,1.29±0.41 nmol/L)及HOMA-β指数(48.9±27.08%)低于正常对照组,差异均有统计学意义(P0.05),T2DM组患者血清par-4水平(17.44±3.65ng/ml)明显高于N组(14.08±2.94 ng/ml),差异有统计学意义(P0.05);与C组比较,高糖高脂组(D组)胰岛β细胞凋亡率(33.82±3.15%)、par-4分泌浓度(388.18±18.43 ng/ml)、par-4和GRP78表达明显增加,胰岛素分泌浓度(3.59±0.20 m IU/L)和胰岛细胞增殖功能(0.36±0.10)明显减少,,差异均有统计学意义(P0.05),高糖高脂+par-4干扰组(T组)胰岛素分泌功能(4.48±0.25 mIU/L)、细胞增殖功能(0.50±0.17)降低,par-4分泌浓度(164.58±16.62 ng/ml)升高,差异均有统计学意义(P0.05);与D组比较,T组细胞凋亡率(18.34±2.11%)、par-4分泌浓度、par-4和GRP78蛋白表达下降,胰岛素分泌浓度和细胞增殖功能升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:2型糖尿病患者较之正常组胰岛细胞功能降低,血清par-4浓度明显升高且与HOMA-β指数负相关,干扰par-4表达可以但不能完全改善高糖高脂诱导的胰岛β细胞凋亡和功能障碍,其机制可能与降低了β细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)水平有关。