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par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK_(1/2)的下调作用及其抗凋亡作用

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中华医学杂志 2005年第11期85卷 777-780页

作者：陆超陈吉庆吴升华赵非池霞潘晓勤费莉郭梅黄松明郭锡熔陈荣华南京医科大学第一附属医院儿科 210029

目的研究par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK1/2活性的下调作用及其抗凋亡作用。方法利用脂质体将par4反义寡核苷酸转染入PC12细胞。谷氨酸诱导PC12细胞凋亡。利用吖啶橙/溴化乙锭荧光染色观察PC12细胞形态,流式细胞分析评价... 详细信息

目的研究par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK1/2活性的下调作用及其抗凋亡作用。方法利用脂质体将par4反义寡核苷酸转染入PC12细胞。谷氨酸诱导PC12细胞凋亡。利用吖啶橙/溴化乙锭荧光染色观察PC12细胞形态,流式细胞分析评价凋亡百分率。Western印迹测定par4的蛋白质表达量和磷酸化的ERK1/2的蛋白表达量。结果(1)谷氨酸诱导PC12细胞中par-4蛋白表达上调,par4反义寡核苷酸呈剂量依赖性地拮抗其上调(组间比较,P4)的ERK1/2蛋白水平下调,par-4反义寡核苷酸拮抗其上调(组间比较,Ppar-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,如予ERK1/2阻断PD98059预处理,则其拮抗作用被下调(组间比较,Ppar-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与ERK的活化有关。

关键词： par-4 反义寡核苷酸 ERK1/2 PC12细胞拮抗谷氨酸诱导抗凋亡作用磷酸化溴化乙锭

par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中蛋白激酶Akt_1磷酸化的下调作用及其抗凋亡意义

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中华儿科杂志 2005年第3期43卷 205-206页

作者：陆超陈吉庆吴升华赵非池霞潘晓勤费莉郭梅黄松明郭锡熔陈荣华南京医科大学第一附属医院儿科 210029 南京市儿童医院肾科南京医科大学儿科研究所

前列腺凋亡反应基因4(prostate apoptosis response-4, par-4)是近年来发现的促凋亡基因,可能参与了多种病理因素诱导的神经细胞的凋亡[1].我们在2003年1月至12月进行的实验研究中,发现par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,... 详细信息

前列腺凋亡反应基因4(prostate apoptosis response-4, par-4)是近年来发现的促凋亡基因,可能参与了多种病理因素诱导的神经细胞的凋亡[1].我们在2003年1月至12月进行的实验研究中,发现par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与蛋白激酶Akt1的磷酸化有关.

关键词： par-4 反义寡核苷酸蛋白激酶A 抗凋亡 PC12细胞磷酸化拮抗发现神经细胞

par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶3酶活性的影响及其抗凋亡作用

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中华医学杂志 2008年第6期88卷 411-415页

作者：陆超陈吉庆周国平吴升华管亚飞袁传顺黄松明郭锡熔陈荣华南京医科大学第一附属医院儿科 210029 南京医科大学儿科研究所

目的研究par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞（hBMSC）中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶（Caspase）3酶活性的影响及其抗凋亡作用。方法原代培养hBMSC。谷氨酸诱导hBMSC凋亡。设计和合成两对针对par-4基因mRNA的小RNA干扰（siRNA）... 详细信息

目的研究par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞（hBMSC）中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶（Caspase）3酶活性的影响及其抗凋亡作用。方法原代培养hBMSC。谷氨酸诱导hBMSC凋亡。设计和合成两对针对par-4基因mRNA的小RNA干扰（siRNA）序列（par-4-SiRNA-1、2），构建真核细胞表达载体，用脂质体介导转染hBMSC，利用G418筛选稳定表达细胞株。实时荧光定量PCR法检测par-4 mRNA表达水平。流式细胞术测定细胞凋亡百分率。Western印迹测定Smac蛋白表达量。比色法测定Caspase-3酶的活性。结果设计的par-4-SiRNA-1、2可显著诱导hBMSC中par-4基因沉默，par-4 mRNA水平分别被降低88％、67％，谷氨酸诱导hBMSC凋亡，凋亡百分率为（58．9±8．9）％。par-4-SiRNA-1可显著拈抗谷氨酸的诱导凋亡作用，凋亡百分率降为（37．2±6．3）％（F=58．26，P〈0．01）。par-4-SiRNA-1对谷氨酸诱导的hBMSC中Smac蛋白表达上凋（P〈0．01）和Caspase-3酶活性上调（P〈0．01）有显著的抑制作用（P〈0．01）。结论par-4基因沉默能拈抗谷氨酸对hBMSC凋亡的诱导作用。其机制可能与Smac基因表达和Caspase-3酶活性被抑制有关。

关键词： RNA 干细胞脱噬作用基因 par-4

par-4 Sensitizes Human Colon Cancer Cells to Chemoradiotherapy

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Journal of Cancer Therapy 2011年第4期2卷 542-547页

作者： Daniel Contract Heath Mackley Rosalyn Bryson Irby 不详

Despite aggressive treatment and recent advances, cancers of the colon and rectum remain a leading cause of death worldwide. In the case of rectal cancer, chemo-radiotherapy (CRT) is given prior to surgery to provide a greater chance of sphincter sparing surgery and lower the incidence of local recurrence. However, toxicity of CRT remains a problem. The tumor suppressor, par-4, serves to sensitize tumor cells to chemotherapy and radiation therapy. This study tested the effects of increased par-4 expression in HT29 human colon cancer cells. The results show the success of par-4 in sensitizing the tumor cells to both radiation and chemo therapies. In addition, the presence of increased par-4 caused a positive response to lower doses of both therapies. This supports the idea that par-4 may be a viable target for gene therapy in cancer treatment, particularly in the case of accessible tumors such as rectal cancers, serving to reduce the required doses of CRT, and consequent side effects, for a successful treatment of rectal cancer.

关键词： par-4 Colorectal Cancer Radiation Therapy 5-Fluorouracil

癌症相关促凋亡蛋白par-4的信号转导途径预测研究

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中山大学学报（自然科学版） 2010年第6期49卷 83-88页

作者：赵艳超张淑波陈维田何淼中山大学生命科学学院广东广州510275 香港理工大学屋宇设备工程系

利用支持向量机(SVM)技术构建par-4关联的蛋白质相互作用网络,预测出与par-4有相互作用的蛋白质82个;这些蛋白质按照功能划分为8大类,主要包括:蛋白激酶、泛素化蛋白酶、死亡受体相关因子、与细胞周期或DNA复制相关蛋白质、调节蛋白质... 详细信息

利用支持向量机(SVM)技术构建par-4关联的蛋白质相互作用网络,预测出与par-4有相互作用的蛋白质82个;这些蛋白质按照功能划分为8大类,主要包括:蛋白激酶、泛素化蛋白酶、死亡受体相关因子、与细胞周期或DNA复制相关蛋白质、调节蛋白质、与疾病相关蛋白质、具有特定结构域结合蛋白质和其他蛋白质等。结合文献挖掘和数据库检索信息,推断出了par-4的2条可能新的信号转导途径。首次预测到par-4与一大类泛素化蛋白有密切的关系。研究发现,par-4与多种蛋白质具有复杂的相互作用,并且,在多个细胞凋亡途径中扮演了重要角色。

关键词： par-4 SVM 蛋白质相互作用细胞凋亡信号转导

原花青素对β-淀粉样肽25-35诱导PC12细胞par-4和bcl-2基因表达的影响

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中草药 2006年第3期37卷 405-408页

作者：梅寒芳谢朝阳杨红祝其锋广东药学院生物化学教研室广东广州510006 广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023

目的探讨原花青素(PC)对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA的表达,W... 详细信息

目的探讨原花青素(PC)对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA的表达,Westernblotting检测PC12细胞par-4和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量(5、10、20、30mg/L)PC预处理PC12细胞1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡,提高PC12细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的PC12细胞核固缩、凝聚和碎裂,降低par-4基因mRNA表达及蛋白表达,增加bcl-2基因mRNA表达及蛋白表达。结论PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因par-4和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。

关键词：原花青素(PC) (Aβ(25-35)) PC12细胞细胞凋亡 par-4 bcl-2

沉默par-4基因表达可抑制肺泡上皮细胞凋亡

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中华急诊医学杂志 2011年第3期20卷 269-272页

作者：秦晓虹薛梅陆超泰州市人民医院儿科江苏省泰州225300 南京医科大学第一附属医院儿科

目的研究促凋亡基因par-4沉默对氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549细胞。利用过氧化氢诱导细胞凋亡。利用小RNA干扰（siRNA）技术，靶向诱导par4基因沉默。设立正常对照组（常规培养细胞）、过氧... 详细信息

目的研究促凋亡基因par-4沉默对氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法培养人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549细胞。利用过氧化氢诱导细胞凋亡。利用小RNA干扰（siRNA）技术，靶向诱导par4基因沉默。设立正常对照组（常规培养细胞）、过氧化氢组（1．0mmol／L过氧化氢处理细胞）、过氧化氢＋par-4-siRNA组（1．0mmol／L过氧化氢和par4-siRNA转染的细胞）。设非抑制序列转染的对照组。流式细胞术测定各组细胞凋亡百分率。Western blot检测促凋亡基因Smac蛋白表达量。凝胶迁移率改变试验测定转录因子E2F1的DNA结合力。比色法检测Caspase-3酶活性。实验结果采用单因素方差分析（F检验和q检验）。结果过氧化氢＋par4-siRNA组细胞凋亡百分率（29．74±2．3）％显著低于过氧化氢组（54．24±4．1）％，q=8．91，P〈0．01。par-4-siRNA的转染显著抑制过氧化氢诱导的肺泡上皮细胞中Smac蛋白表达、E2F1DNA结合力和caspase-3活性上调。结论采用siRNA诱导par-4基因沉默，可减少氧化应激导致的肺泡上皮细胞凋亡。其分子机制可能和抑制Smac蛋白表达、抑制E2F1 DNA结合力和抑制caspase-3活性有关。

关键词： par-4 小RNA干扰氧化应激肺泡上皮细胞凋亡

远志总皂苷干预β-淀粉样蛋白致伤神经干细胞Caspase-3及par-4的表达

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中国组织工程研究与临床康复 2011年第23期15卷 4282-4286页

作者：张晓梅孙光涛黄作义吴成吉戚询中朱晓峰佳木斯大学神经科学研究所黑龙江省佳木斯市154007

背景:远志总皂苷具有良好的神经保护作用。目的:分析远志总皂苷对β-淀粉样蛋白致伤海马神经干细胞的保护作用及机制。方法:自昆明小鼠海马分离培养神经干细胞,取第3代神经干细胞,用含不同质量浓度远志总皂苷与β-淀粉样蛋白致伤体外培... 详细信息

背景:远志总皂苷具有良好的神经保护作用。目的:分析远志总皂苷对β-淀粉样蛋白致伤海马神经干细胞的保护作用及机制。方法:自昆明小鼠海马分离培养神经干细胞,取第3代神经干细胞,用含不同质量浓度远志总皂苷与β-淀粉样蛋白致伤体外培养的神经干细胞共孵育。结果:应用免疫组织化学法检测Caspase-3阳性神经干细胞,与对照组相比,远志总皂苷组Caspase-3阳性细胞率及par-4的表达明显降低,差异具有显著性意义(Ppar-4的表达。

关键词：远志总皂苷神经干细胞 Caspase-3 par-4 β-淀粉样蛋白

阿魏酸钠对SNP诱导的凋亡海马神经元NF-κB、par-4基因表达的影响

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中国老年学杂志 2008年第14期28卷 1361-1364页

作者：张海风李月百安玉会邢路伟王俊萍单杰郑州大学基础医学院生物化学教研室河南郑州450001 郑州大学基础医学院实验教学中心河南郑州450001

目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-κBP65、par-4基因表达的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/L的SF预处理后,用5... 详细信息

目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-κBP65、par-4基因表达的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/L的SF预处理后,用50μmol/L的SNP处理24h,采用MTT法检测细胞存活率,Hochest33258荧光染色检测凋亡,Westernblot及RT-PCR检测NF-κBP65、par-4基因表达。结果不同剂量SF(10～160μmol/L)预处理6h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;降低NF-κBP65、par-4mRNA及蛋白的表达。结论SF抑制NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡,其机制可能与降低促凋亡基因NF-κBP65、par-4表达有关。

关键词：阿魏酸钠硝普钠海马神经元凋亡 NF-KB P65 par-4