IL-4和IL-13对支气管上皮细胞上CXC趋化因子受体CXCR4表达的影响

作     者：滕捷明 

作者单位：华中科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：刘瑾

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题：IL-4 IL-13 CXCR4 SDF-1α 支气管上皮细胞 哮喘 趋化因子 Th2细胞因子 

摘      要：研究背景： CXCR4存在于机体多种细胞表面，是趋化因子SDF-1α的特异性受体，在细胞的增殖和迁移中起着重要作用。有研究证实CXCR4及其配体SDF-1α参与了哮喘的气道炎症和气道高反应，在哮喘中发挥重要作用。Th2细胞因子IL-4和IL-13在哮喘的发病机制过程中扮演了重要角色，嗜酸性粒细胞表面CXCR4的表达在IL-4和IL-13的影响下有所改变。而哮喘中支气管上皮细胞是否表达CXCR4以及其表达是否受Th2细胞因子IL-4和IL-13的影响，目前尚未有研究报道。 目的： 探讨支气管上皮细胞在Th2细胞因子环境下是否表达CXCR4以及其表达是否受IL-4和IL-13的影响。 方法： 本实验通过用六孔板培养人支气管上皮细胞系，饥饿16h，然后用IL-4（20ng/ml）和IL-13（20ng/ml）分别及联合刺激支气管上皮细胞24h，形成Th2细胞因子环境，以体外模拟哮喘环境。通过提取蛋白，电泳，把丙烯酰胺凝胶中的蛋白转移到PVDF膜上，封闭1h，CXCR4单克隆抗体抗体孵育过夜，洗涤后加入二抗孵育1h，洗涤，ECL显色、曝光。 结果： 正常组HBEsCXCR4蛋白表达灰度比值为（0.54±0.07），而IL-4刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值为（0.91±0.07），明显高于正常组（P0.05），具有统计学差异。IL-13刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值为（1.11±0.11），与正常组比较，也明显增高（P0.05），差异具有统计学意义。IL-4+IL-13联合刺激组CXCR4蛋白表达灰度比值（1.19±0.18），明显高于正常组（P0.05），具有统计学差异。 结论： 该实验结果表明哮喘环境中支气管上皮细胞表面CXCR4蛋白表达上调，Th2细胞因子IL-4和IL-13均可使支气管上皮细胞表面CXCR4表达增高，说明其表达受到Th2细胞因子的调控。