慢肾康宁在UUO大鼠肾间质纤维化Wnt/β-catenin信号通路中的影响

作     者：颜显欣 

作者单位：暨南大学 

学位级别：硕士

导师姓名：孙升云

授予年度：2014年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：慢肾康宁 肾间质纤维化 Wnt4 β-catenin Ⅲ型胶原蛋白 

摘      要：目的：观察慢肾康宁在UUO大鼠肾间质纤维化Wnt/β-catenin信号通路中的作用及其机制。 方法：60只Wistar雄性大鼠适应性喂养1周后，根据体重随机分为正常组、假手术组、模型组、缬沙坦对照组、慢肾康宁高、低剂量组，每组10只。戊巴比妥钠麻醉以后，模型组和各治疗组在无菌条件下使左肾和输尿管充分暴露，用4-0号丝线结扎左输尿管的二端，并在二个线结之间剪断以防逆行尿路感染，然后关闭腹腔，而假手术组在分离输尿管后不结扎，直接关闭腹腔，其余步骤相同。术后腹腔注射青霉素（10万单位/只）用于预防感染，连续三天。术前1天开始灌胃，缬沙坦组予8mg/(kg-1.d-1)剂量灌胃，中药组分别予30g/(kg-1.d-1)、15g/(kg-1.d-1)的剂量灌胃，各组连续灌胃12天，其余各组均以等量的生理盐水灌胃。术后第12天处死各组大鼠，留取肾脏组织。用HE和Masson染色观察肾组织的病理改变，免疫组化检测E-cadeherin、β-catenin的蛋白表达，Real-timePCR检测Wnt4、β-catenin、ColⅢ mRNA表达。 结果：缬沙坦和慢肾康宁均能减轻UUO大鼠肾间质纤维化，HE和Masson染色显示，正常组和假手术组无异常。与模型组比较，慢肾康宁组和缬沙坦组的左侧肾脏的病理损伤得到明显的改善，肾小管萎缩、塌陷、或扩张的情况好转，炎细胞浸润较少，管腔内细胞管型或蛋白管型少见，肾间质纤维化面积缩小。Real-time PCR显示，与模型组比较，各治疗组的Wnt4、β-catenin、ColⅢmRNA表达水平均显著下降（P0.01)。免疫组化显示，与模型组比较，各治疗组β-catenin蛋白表达显著下降（P0.01)，而E-cadeherin蛋白表达则明显升高（P0.05)。 结论：UUO大鼠肾间质纤维化模型中Wnt/β-catenin信号通路被激活;慢肾康宁能抑制UUO大鼠肾间质纤维化模型中Wnt/β-catenin信号通路，下调Wnt4、β-catenin的表达，并且上调E-cadherin的表达;慢肾康宁能减轻肾间质纤维化，下调ColⅢ的表达，这一过程可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路实现的。