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ⅩⅦ型胶原蛋白对雄激素性脱发模型小鼠毛发生长的作用及机制研究

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中华整形外科杂志 2024年第1期40卷 56-68页

作者：程含皛戚吉妮许言文钱锡飞张菊芳西湖大学医学院附属杭州市第一人民医院医疗美容科杭州310006 浙江中医药大学第五临床医学院湖州市中心医院整形外科湖州313000 浙江中医药大学第四临床医学院杭州310053

目的探讨ⅩⅦ型胶原蛋白(COL17)对雄激素性脱发(AGA)模型小鼠毛发生长的作用及机制。方法将48只C57BL/6J小鼠建立AGA模型(脱去小鼠背部毛发并外涂二氢睾酮溶液), 采用随机数表法分为6组, 每组8只。阴性对照组, 脱毛区注射生理盐水(单点... 详细信息

目的探讨ⅩⅦ型胶原蛋白(COL17)对雄激素性脱发(AGA)模型小鼠毛发生长的作用及机制。方法将48只C57BL/6J小鼠建立AGA模型(脱去小鼠背部毛发并外涂二氢睾酮溶液), 采用随机数表法分为6组, 每组8只。阴性对照组, 脱毛区注射生理盐水(单点注射0.05 ml, 共5个点);阳性对照组, 脱毛区外用5%米诺地尔酊, 1 ml/d;COL17低、中、高浓度组, 在脱毛区分别注射0.5、1.0、2.0 mg/ml的COL17(单点注射0.05 ml, 共5个点);ⅲ型胶原蛋白(COL3)、COL17(COL3+COL17)联合高浓度组, 在脱毛区注射2.0 mg/ml的COL3和COL17(单点注射0.05 ml, 共5个点)。共给药21 d, 期间观察记录各组小鼠毛发生长情况;21 d后, 取小鼠脱毛区皮肤及皮下组织制作病理切片行HE染色, 观察毛囊数量及形态变化;取小鼠脱毛区新鲜皮肤组织行总RNA测序分析, 对差异共表达基因进行基因本体论(GO)功能注释、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析和基因集富集分析(GSEA)。结果给药21 d后, 与阴性对照组相比, 阳性对照组、COL17高浓度组、COL3+COL17联合高浓度组小鼠背部脱毛面积明显缩小, HE染色显示其毛囊数量也明显增多。Pearson相关性分析、主成分分析及各组间聚类热图显示, COL17高浓度组与阳性对照组基因相关性较高(R2=0.95, P=0.024), 基因表达较为接近, 2组有3 882个差异基因(1 705个上调, 2 177个下调), 而COL3+COL17联合高浓度组与阳性对照组基因相关性最高(R2=0.96, P=0.001), 基因表达最接近, 2组有1 289个差异基因(385个上调, 904个下调);KEGG分析显示, 与阴性对照组相比, 阳性对照组、COL17高浓度组及COL3+COL17联合高浓度组小鼠均上调了与毛发生长相关的Wnt信号通路、细胞黏附分子及hedgehog信号通路;GO富集分析提示COL17高浓度组及COL3+COL17联合高浓度组中皮肤发育、毛发周期循环相关基因上调;GSEA富集分析发现, COL17高浓度组成纤维细胞增殖、白介素1分泌相关基因表达上调, 而COL3+COL17联合高浓度组成纤维细胞迁移、凋亡细胞清除及加速活性氧的代谢相关基因表达上调。结论局部注射2.0 mg/ml的COL17对AGA模型小鼠毛发生长具有一定促进作用, 且联合注射2.0 mg/ml的COL3后效果更显著, 激活Wnt信号通路可能是COL17促毛发生长的主要机制之一。

关键词：毛发雄激素性脱发 ⅩⅦ型胶原蛋白 ⅲ型胶原蛋白毛发再生

ⅲ型胶原蛋白在大鼠实验性囊性动脉瘤中的表达

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中国神经精神疾病杂志 2004年第6期30卷 450-451页

作者：刘兵浦佩玉高永中天津医科大学总医院神经外科天津300052

目的　探讨ⅲ型胶原蛋白在大鼠实验性囊性动脉瘤生长塑形过程中的作用。方法　通过显微手术方法破坏大鼠颈动脉分叉部位的内膜和内弹力层诱导囊性动脉瘤 ,在结扎及未结扎对侧颈动脉的情况下 ,观察 4～ 5个月 ,在长、宽、高三个径线上测... 详细信息

目的　探讨ⅲ型胶原蛋白在大鼠实验性囊性动脉瘤生长塑形过程中的作用。方法　通过显微手术方法破坏大鼠颈动脉分叉部位的内膜和内弹力层诱导囊性动脉瘤 ,在结扎及未结扎对侧颈动脉的情况下 ,观察 4～ 5个月 ,在长、宽、高三个径线上测量动脉瘤的大小。通过免疫组化方法 ,研究ⅲ型胶原蛋白在正常动脉及动脉瘤壁上的表达。结果　破坏大鼠颈动脉分叉部位的内膜和内弹力层可诱导出囊性动脉瘤 ,在长期血流应力作用下 ,动脉瘤逐渐增大生长塑形 ,并且结扎对侧颈总动脉增加同侧血流冲击 ,可使动脉瘤生长更加明显。在正常动脉壁中膜平滑肌细胞周围有ⅲ型胶原蛋白的明显表达 ,而在动脉瘤壁上其表达减少 ,并且随着动脉瘤生长塑形其表达进一步减少。结论　囊性动脉瘤在长期血流应力作用下 ,有ⅲ型胶原蛋白的降解 ,使动脉壁力学性能下降 ,无法抗衡血流应力作用而逐渐生长塑形。

关键词： ⅲ型胶原蛋白囊性动脉瘤血管塑形大鼠

血清中ⅲ型胶原蛋白水平对HIV感染者肝纤维化及其肝功能障碍的预测价值

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海军医学杂志 2023年第10期44卷 1043-1046页

作者：林兴明王希会临沂市中心医院检验科山东临沂276400 临沂市中心医院输血科山东临沂276400

目的探究血清中ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)对人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者肝纤维化及其肝功能障碍的预测价值。方法选取2017年5月至2022年12月收治于临沂市中心医院的121例HIV感染者为研究对象。于患者初次就诊及6个月随访时进行肝穿刺活检。... 详细信息

目的探究血清中ⅲ型胶原蛋白(COLⅢ)对人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者肝纤维化及其肝功能障碍的预测价值。方法选取2017年5月至2022年12月收治于临沂市中心医院的121例HIV感染者为研究对象。于患者初次就诊及6个月随访时进行肝穿刺活检。收集患者血清样本并检测COLⅢ及肝纤维化标志物Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(ⅣC)、透明质酸酶(HA)、层粘连蛋白(LN)的表达水平;检测患者丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆红素(SB)及前白蛋白(PA)的水平。通过受试者操作特征(ROC)曲线评价各检测指标预测肝纤维化及肝功能障碍的效能,并用多元Logistic回归法分析相关性。结果与肝纤维化S0期的HIV感染者相比,S1~S4期HIV感染者血清COLⅢ水平逐渐升高(Pⅲ型胶原蛋白的水平能够有效预测HIV感染者肝纤维化及肝功能障碍程度,可作为此类患者发生肝纤维化及肝功能障碍的潜在生物学标志物,具有一定的临床应用价值。

关键词： ⅲ型胶原蛋白 HIV 肝纤维化肝功能障碍

重组人源ⅲ型胶原蛋白在整形美容外科的应用前景

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中华医学美学美容杂志 2023年第4期29卷 322-324页

作者：苏星星贾垚张宝林山西医科大学第一医院整形外科太原030000

ⅲ型胶原蛋白是一种重要的结构蛋白,广泛分布于皮肤、血管壁、大部分组织的网状纤维中;因其生物及物理性质方面的优点,已广泛用于生物医学组织工程和临床。临床应用的ⅲ型胶原蛋白大多是动物源性胶原蛋白,因其不良反应和传播疾病的风险... 详细信息

ⅲ型胶原蛋白是一种重要的结构蛋白,广泛分布于皮肤、血管壁、大部分组织的网状纤维中;因其生物及物理性质方面的优点,已广泛用于生物医学组织工程和临床。临床应用的ⅲ型胶原蛋白大多是动物源性胶原蛋白,因其不良反应和传播疾病的风险,存在应用局限性。通过基因组织工程合成的重组人源ⅲ型胶原蛋白较好地解决了该问题,同时为临床应用ⅲ型胶原蛋白安全性和推广性提供了保障,为疾病的治疗提供更多的思路。

关键词：重组人源ⅲ型胶原蛋白 ⅲ型胶原蛋白整形美容组织再生创面修复

ⅲ型胶原蛋白对大鼠阴道萎缩的作用及机制研究

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Ⅲ型胶原蛋白对大鼠阴道萎缩的作用及机制研究

作者：游爽重庆医科大学

学位级别：硕士

随着全球老龄化,联合国提出将健康老龄化作为全球解决老龄化问题的奋斗目标,绝经后女性的健康管理将会是今后的关注问题之一。阴道萎缩(VA)是一种常见于绝经后女性的疾病,由于全身雌激素水平降低,阴道组织的退化的一种常见疾病。主要表... 详细信息

随着全球老龄化,联合国提出将健康老龄化作为全球解决老龄化问题的奋斗目标,绝经后女性的健康管理将会是今后的关注问题之一。阴道萎缩(VA)是一种常见于绝经后女性的疾病,由于全身雌激素水平降低,阴道组织的退化的一种常见疾病。主要表现为阴道干涩、瘙痒及性交疼痛,严重影响绝经后女性的生活质量。随着绝经后女性的人数不断增加,到2030年全球绝经后女性数量将增长到大约12亿,我国将达2.8亿,大约有超过40%的绝经后女性会出现阴道萎缩相关症状,其中约只有20%的绝经后女性愿意寻求帮助。目前的主要治疗方式为局部雌激素的补充或非激素类制剂应用以缓解症状,但许多女性因为担心使用雌激素所带来的副反应而不愿意接受雌激素治疗。目前,NAMS将非激素润滑剂推选为一线治疗药物,起到阴道保湿润滑的作用。非激素类药物种类较多,主要有水溶剂型、油基剂型、硅脂剂型、透明质酸等。阴道萎缩与阴道组织中细胞外基质(ECM)含量大量减少密切相关,胶原蛋白作为ECM的主要成分之一,在组织和器官的形成中起着重要的作用,并参与细胞功能的表达、信号传递等。胶原蛋白在生物医学应用中广泛应用的原因是其可以通过其自身聚集和交联形成具有一定强度和稳定性的纤维,同时具有出色的生物相容性和安全性。目前,已经发现28种类型的胶原蛋白,其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型蛋白在人体内含量最丰富,约占总胶原蛋白的80%0%。其中,阴道组织含有大量ⅲ型胶原蛋白。随着雌激素水平下降,阴道组织中胶原蛋白含量降解增加,生成增加。本课题旨在讨论ⅲ型胶原蛋白治疗大鼠的阴道萎缩的疗效及可能涉及的相关机制,为阴道萎缩的临床治疗提供理论依据。第一部分建立大鼠阴道萎缩模型目的:通过建立大鼠阴道萎缩模型,为后续治疗提供模型基础。方法:(1)通过去势法建立大鼠阴道萎缩模型,选择6-8周正常雌性SD大鼠10只,将10只大鼠随机分为2组:(1)假手术组(n=5):麻醉消毒后,开腹暴露30min,关腹;(2)模型组(n=5):麻醉消毒后,开腹以无齿镊暴露双侧卵巢,分别结扎双侧子宫动脉后,切除双侧卵巢,还纳双侧子宫,缝合切口。(2)去势前后称重,H&E、Masson染色观察阴道上皮和阴道组织中胶原蛋白的变化。结果:经去势法构建的阴道萎缩大鼠模型,体重增加,阴道上皮变薄,结缔组织排列紊乱。结论:阴道萎缩大鼠模型建立。第二部分ⅲ型胶原蛋白对大鼠阴道萎缩的作用及机制目的:探讨ⅲ型胶原蛋白治疗阴道萎缩大鼠的疗效,为临床治疗提供理论基础。方法:(1)选择6-8周雌性SD大鼠45只,随机分为5组:(1)假手术组(n=10);(2)模型组(n=10):只造模,不做任何治疗处理;(3)胶原蛋白组(n=10):造模28天后,每日阴道给予ⅲ型胶原蛋白0.5ml,连续给予14天;(4)雌激素组(n=10):造模28天后,每日阴道给予雌激素0.5ml,连续给予14天;(5)卡波姆组(n=5):造模28天后,每日阴道给予卡波姆0.5ml,连续给予14天;(2)生物素标记胶原蛋白在阴道组织中的示踪定位;(3)H&E染色观察阴道上皮厚度;Masson染色观察阴道组织中胶原蛋白排列情况;测定阴道p H值和微生态变化;(4)免疫组化、q PCR测定COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、TIMP-1、MMP-1、VEGF、Ki-67、IL-6因子的表达水平;Western blot测定阴道组织中AQP-2因子的表达水平;(5)电镜观察阴道组织微结构的改变;(6)H&E染色观察子宫内膜厚度变化;(7)诱导细胞衰老,观察细胞的增殖和凋亡情况。结果:(1)免疫荧光结果表明:经生物素标记的胶原蛋白在阴道上皮及肌层可见。(2)H&E染色结果表明经雌激素和胶原蛋白治疗后的阴道上皮厚度增厚,厚于模型组,接近假手术组。Masson染色结果表明模型组和卡波姆组结缔组织排列稀疏,经雌激素和胶原蛋白治疗后的阴道组织胶原排列较紧密,接近假手术组。(3)免疫组化和q PCR结果表明,经胶原蛋白和雌激素治疗后的阴道组织中COL-I、COL-Ⅲ、TIMP-1、VEGF、Ki-67表达高于模型组,接近假手术组;模型组阴道组织中MMP-1、IL-6表达高于胶原蛋白组和雌激素组及假手术组。Western blot结果表明,经胶原蛋白和雌激素治疗后的阴道组织中AQP-2蛋白表达水平高于模型组和卡波姆组,接近假手术组。(4)电镜结果表明:去势后,阴道上皮皱壁消失,微绒毛消失,细胞间间距变大;经ⅲ型胶原蛋白治疗后,阴道上皮出现微绒毛,细胞之间的间距缩小,与假手术组相似。(5)H&E染色观察大鼠子宫内膜结果表明:经胶原蛋白治疗后的子宫内膜厚度与模型组接近,经雌激素治疗后的子宫内膜厚度增厚,与假手术组接近。(6)流式和CCK-8结果显示:ⅲ型胶原蛋白能够促进D-gal诱导的衰老细胞的增殖,抑制凋亡。结论:胶原蛋白能够定植于阴道上皮及肌层中;能

关键词：去势法阴道萎缩动物模型细胞外基质 ⅲ型胶原蛋白 VK2/e6e7细胞

复方中药对腹水综合征肉鸡肝组织α-SMA、Ⅰ型和ⅲ型胶原蛋白含量的作用

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畜牧兽医学报 2016年第11期47卷 2310-2317页

作者：韩烨晨张娟王俊武员世宇吴海萍温爽赵冬冬王卓苏晓菲朱昱波程佳孙耀贵王文魁李宏全段智变山西农业大学动物科技学院太谷030801 山西省畜牧兽医学校太原030024 河南科技学院动物科技学院新乡453003

本试验旨在研究腹水综合征（AS）肉鸡肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I型胶原和III型胶原蛋白变化及复方中药的防治作用。将309羽7日龄罗斯肉鸡随机分为6组,空白组正常饲养,其余5组饲养环境为9～11℃、高能饲料和高钠饮水,模型组... 详细信息

本试验旨在研究腹水综合征（AS）肉鸡肝组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、I型胶原和III型胶原蛋白变化及复方中药的防治作用。将309羽7日龄罗斯肉鸡随机分为6组,空白组正常饲养,其余5组饲养环境为9～11℃、高能饲料和高钠饮水,模型组不给予任何药物,中药组（高、中、低剂量组）分别给予2、1、0.5g·（kg·d）-1复方中药,L-Arg组饲料中添加1%L-Arg。结果表明：15、25、35和45日龄,与空白组相比,模型组AS发病率、腹水心脏指数、心脏指数、肺脏指数、肝脏指数、肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量显著增加（P〈0.01或P〈0.05）,脾脏指数显著降低（P〈0.01或P〈0.05）;与模型组相比,各剂量中药组和L-Arg组均能改善上述指标（P〈0.01或P〈0.05）。肉鸡腹水综合征肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量显著上升,参与AS病理发生发展;气血双补、行气利水的复方中药能有效防治AS,其机制与复方中药能显著降低AS肝组织α-SMA、I型胶原和III型胶原蛋白含量相关。

关键词：复方中药肉鸡腹水综合征 α-SMA Ⅰ型胶原蛋白 ⅲ型胶原蛋白

瘦素及Ⅰ和ⅲ型胶原蛋白在肝纤维化大鼠肝组织中的变化

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基础医学与临床 2012年第10期32卷 1224-1225页

作者：朱净潘亮许晶陆静娴黄华陆翠华南通大学附属医院消化内科江苏南通226001

瘦素（Leptin）是一种由肥胖基因编码的分泌型蛋白质,其与肝病的关系受到关注[1]。本实验研究了大鼠肝纤维化发生发展中Leptin及Ⅰ和ⅲ型胶原蛋白的变化。1材料方法1.1试剂：RT-PCR两步法试剂盒（上海捷瑞）,引物（上海生工）。兔抗大鼠... 详细信息

瘦素（Leptin）是一种由肥胖基因编码的分泌型蛋白质,其与肝病的关系受到关注[1]。本实验研究了大鼠肝纤维化发生发展中Leptin及Ⅰ和ⅲ型胶原蛋白的变化。1材料方法1.1试剂：RT-PCR两步法试剂盒（上海捷瑞）,引物（上海生工）。兔抗大鼠Leptin与Ⅰ、Ⅲ型胶原抗体（武汉博士德）。1.2动物处理：清洁级60只雄性SD大鼠（150±20 g,南通大学实验动物中心提供，合格证号：2022650），分为对照组[皮下注射橄榄汕溶液（3mlMkg）]和模型组[给予60％CCI4（v／V）（精制橄榄油配置）3mL／kg，每周2次，共6周]。

关键词：肝纤维化大鼠 ⅲ型胶原蛋白瘦素肝组织 Leptin 两步法试剂盒实验动物中心分泌型蛋白质

血清透明质酸、层粘连蛋白、ⅲ型胶原蛋白测定对特发性肺纤维化的诊断意义

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中国实用内科杂志 2003年第2期23卷 100-101页

作者：夏熙郑郑州大学第二附属医院呼吸内科 450003

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis ,IPF )是以弥漫弥性肺泡炎和肺泡结构紊乱最终导致肺纤维化为特征的间质性肺疾病，目前病因尚不清楚，主要表现是逐渐加重的呼吸困难，伴有刺激性干咳，病性一般持续进展，最终因呼吸衰... 详细信息

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis ,IPF )是以弥漫弥性肺泡炎和肺泡结构紊乱最终导致肺纤维化为特征的间质性肺疾病，目前病因尚不清楚，主要表现是逐渐加重的呼吸困难，伴有刺激性干咳，病性一般持续进展，最终因呼吸衰竭而死亡。近年来，该病的发病率有增高趋势，然而在IPF诊断方面纤维化标志物的研究十分少见，本文通过测定41例IPF病人血清中透明质酸(hyalurinic,acid,HA)、层粘连蛋白（lainia,LN）、ⅲ型胶原蛋白（ type Ⅲcollagen,Ⅲ-C）的含量，探讨其对肺纤维化的诊断意义。

关键词：血清透明质酸层粘连蛋白 ⅲ型胶原蛋白肺纤维化诊断

结缔组织生长因子通过上调肾间质成纤维细胞组织型转谷氨酰胺酶和ⅲ型胶原蛋白促进肾间质纤维化

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上海医学 2017年第3期40卷 173-178页

作者：刘森炎钱一欣卞蓉蓉郁胜强上海长征医院肾内科上海200003

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)对肾间质成纤维细胞上组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和ⅲ型胶原蛋白的影响,并探讨其相关的调控机制。方法以大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F细胞)为研究对象,给予CTGF刺激(不同剂量或不同时间),检测tTG的蛋白相... 详细信息

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)对肾间质成纤维细胞上组织型转谷氨酰胺酶(tTG)和ⅲ型胶原蛋白的影响,并探讨其相关的调控机制。方法以大鼠肾间质成纤维细胞(NRK-49F细胞)为研究对象,给予CTGF刺激(不同剂量或不同时间),检测tTG的蛋白相对表达量和mRNA水平。观察CTGF对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2和磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的激活作用和不同信号通路阻断对CTGF调节tTG和ⅲ型胶原蛋白作用的影响。结果以25、50、100、200 ng/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞24 h后的tTG蛋白相对表达量逐渐递增(P蛋白相对表达量逐渐递增(P蛋白相对表达量均显著高于对照组(P值均蛋白相对表达量显著高于对照组(P蛋白相对表达量与对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。使用LY294002阻断P13K/Akt通路后,CTGF对tTG蛋白表达的诱导作用被抑制。单独以100 ng/mL的CTGF,以及100 ng/mL的CTGF和20μmol/L的PD98059刺激NRK-49F细胞24 h后的tTG蛋白相对表达量均显著高于对照组(P值均蛋白相对表达量与对照组的差异无统计学意义(P>0.05)。使用PD98059阻断ERK1/2 MAPK通路后,CTGF对tTG蛋白表达的诱导作用并未受到影响。单独以100 ng/mL的CTGF刺激NRK-49F细胞24 h后的细胞内ⅲ型胶原蛋白和分泌的ⅲ型胶原蛋白的相对表达量均显著高于对照组(P值均ⅲ型胶原蛋白和分泌的ⅲ型胶原蛋白的相对表达量均显著低于单独以100 ng/mL的CTGF刺激24 h后(P值均ⅲ型胶原蛋白和分泌的ⅲ型胶原蛋白的相对表达量与对照组的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。使用LY294002阻断PI3K/Akt通路后,CIGF对ⅲ型胶原蛋白表达的诱导作用也被抑制,但LY294002本身并不影响tTG的表达。结论 CTGF可以通过PI3K/Akt途径上调肾间质成纤维细胞中tTG和ⅲ型胶原蛋白相对表达量,在肾间质纤维化中起重要作用。

关键词：慢性肾脏病结缔组织生长因子组织型转谷氨酰胺酶 ⅲ型胶原蛋白