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MafA和P16在2型糖尿病和糖耐量受损β细胞中差异性表达的研究

MafA和P16在2型糖尿病和糖耐量受损β细胞中差异性表达的研究

作     者:晏华 

作者单位:福建医科大学 

学位级别:硕士

导师姓名:黄惠彬;陈刚

授予年度:2016年

学科分类:1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含:心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

主      题:T2DM IGT MafA P16 

摘      要:目的:研究Maf A和P16在T2DM和IGTβ细胞中的表达是否存在差异。方法:1.建立动物模型将72只雄性ICR小鼠随机分为3组:ND组、IGT组和T2DM组。ND组以普通饲料饲养,IGT组以高脂饲料饲养。对ND组和IGT组小鼠进行OGTT,葡萄糖剂量为2g/kg,测量0min、15min、30min、60min和120min时的血糖值,绘制糖耐量曲线。T2DM组小鼠先以高脂饲料饲养4周,然后分两次腹腔小剂量注射STZ,首次注射STZ剂量为70 mg/kg,第二次给药为50 mg/kg。以随机血糖值16.7mmol/L,并出现“三多一少(多食、多饮、多尿,体重降低)的症状作为诊断T2DM小鼠的标准。2.免疫组化双染分离三组小鼠胰腺,制备胰腺切片。检测三组小鼠β细胞中Maf A和P16的表达,是通过分别进行抗insulin+抗Maf A和抗insulin+抗P16免疫双染。Insulin由DAB显色剂标记,显微镜下为棕黄色。Maf A和P16由AP-Red显色剂标记,镜下为红色。显微镜下计数三组小鼠β细胞总数以及Maf A和P16免疫阳性细胞数。应用统计学软件分析Maf A和P16在T2DM小鼠、IGT小鼠和ND小鼠β细胞中的表达率。结果:1.动物模型OGTT:IGT组小鼠在30min、60min和120min时的血糖值明显高于ND组,其差异有统计学意义(P0.05),这表明IGT组小鼠发生糖耐量受损。T2DM组:21只小鼠随机血糖值高于16.7mmol/L,并出现体重降低、多食、多饮和多尿的症状。2.免疫组化双染ND组、IGT组和T2DM组小鼠Maf A的表达率分别为26.51%4.15%,25.23%9.75%,3.94%.22%,P16的表达率分别为3.52%.84%,3.61%.01%,9.03%.71%。T2DM组β细胞中Maf A表达率低于IGT组和ND组,其差异有统计学意义(P0.05)。T2DM组β细胞中P16表达率高于IGT组和ND组,差异具有统计学意义(P0.05);IGT组与ND组β细胞中Maf A表达率的差异不具有统计学意义(P=0.063),P16表达率的差异不具有统计学意义(P=0.294)。结论:Maf A和P16在T2DM小鼠和IGT小鼠β细胞中的表达存在差异。T2DM小鼠β细胞中Maf A的表达率明显低于IGT小鼠,P16的表达率明显高于IGT小鼠。

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