吸烟对口腔黏膜上皮细胞Nod1信号通路蛋白及防御能力的影响

作     者：叶沛 

作者单位：南京大学 

学位级别：硕士

导师姓名：王文梅

授予年度：2013年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主      题：口腔鳞癌(OSCC) Nod1通路 吸烟 Caspase-12 人β-防御素(hBD) 口腔黏膜 上皮细胞 白斑 免疫防御 

摘      要：第一部分吸烟对口腔鳞癌中Nodl信号通路关键蛋白表达的影响[目的]口腔鳞状细胞癌(OSCC)是最常见的口腔恶性肿瘤,吸烟与OSCC的发生密切相关,但吸烟影响OSCC的固有免疫机制尚不清楚。Nodl信号通路是固有免疫重要组成部分,介导了口腔黏膜上皮细胞抵抗不良刺激的防御反应,其重要蛋白包括Nod1、Rip2、NF-κB。Caspase-12是Nod1信号通路的一个重要调控因子,有研究表明吸烟与Caspase-12相关。本文通过检测口腔鳞癌中吸烟人群及非吸烟人群的Caspase-12及Nod1信号通路蛋白的表达差异,验证吸烟对口腔黏膜Nodl信号通路的影响。[方法]采用免疫印迹法检测25例OSCC组织包括吸烟组(11例)与非吸烟组(14例)中Nod1、Rip2、NF-κB、Caspase-12蛋白表达。[结果]吸烟组相对于非吸烟组,Rip2、Caspase-12表达增高,Nod1、NF-κB表达下降,差异均具有统计意义。[结论]由结果推测,吸烟可引起Caspase-12升高、Nod1降低,进而改变Nodl通路蛋白的表达,削弱固有免疫,在OSCC发生发展过程中扮演了重要作用。第二部分吸烟对口腔黏膜上皮细胞人p-防御素分泌的影响[目的]人防御素(human defensins)是一类内源性抗微生物肽,具有强烈的广谱抗微生物活性,在固有免疫防御中起重要作用,其中在口腔上皮组织中主要表达人β-防御素(hBD)。口腔白斑(oral leukoplakia, OLK)是口腔黏膜病中较常见的癌前病变,吸烟是白斑发生发展的重要因素。本文着重探讨吸烟对口腔免疫防御,主要是对hBD表达的影响。[方法]采用商业化可购的直接烟暴露装置,构建体外leukl细胞吸烟模型,细胞吸烟时处于气液交换环境,将其分为吸烟组(吸入香烟烟雾5min、10min、20min、40min)和对照组(吸入含5%CO2空气10min),采用酶联免疫吸附法检测hBD1、hBD2、hBD3的浓度。[结果]hBD1在吸烟组表达明显低于对照组(P=0.004),hBD2在吸烟组表达高于对照组(P=0.012),而两组中hBD3分泌无显著的统计学差异。[结论]吸烟可使口腔黏膜hBD发生改变,进而影响口腔黏膜免疫。