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肾小管上皮细胞来源外泌体在慢性肾脏病中的研究进展

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中华肾脏病杂志 2024年第4期40卷 319-324页

作者：李晨王惠明武汉大学人民医院肾内科武汉430060

肾小管上皮细胞(tubular epithelial cells,TECs)作为肾实质的主要组成细胞,在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)发生发展过程中发挥多种调节作用。外泌体是由细胞自然分泌的双层膜囊泡,包含蛋白质、核酸和脂质等多种生物活性物质... 详细信息

肾小管上皮细胞(tubular epithelial cells,TECs)作为肾实质的主要组成细胞,在慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)发生发展过程中发挥多种调节作用。外泌体是由细胞自然分泌的双层膜囊泡,包含蛋白质、核酸和脂质等多种生物活性物质,介导细胞间的信息交流。该文综述了TECs来源外泌体的来源和特征、TECs来源外泌体在CKD肾间质纤维化中的作用以及TECs来源外泌体在CKD诊断中的作用,以期为CKD的预防和治疗提供新的思路。

关键词：肾小管上皮细胞外泌体肾间质纤维化慢性肾脏病

藏红花素调控miR-877-5p对氯吡格雷诱导胃黏膜上皮细胞损伤的影响

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中国新药与临床杂志 2024年

作者：杨凌霞王伟刘萍向丹荆门市中医医院消化内科

目的探讨藏红花素对氯吡格雷诱导的胃黏膜上皮细胞损伤的作用及分子机制。方法将人胃黏膜上皮细胞GES-1分为对照组，模型组(0.5mmol·L-1氯吡格雷)和藏红花素低、中、高浓度(0.1、1、10nmol·L-1)组，另外分为anti-miR-NC组、miR-877... 详细信息

目的探讨藏红花素对氯吡格雷诱导的胃黏膜上皮细胞损伤的作用及分子机制。方法将人胃黏膜上皮细胞GES-1分为对照组，模型组(0.5mmol·L-1氯吡格雷)和藏红花素低、中、高浓度(0.1、1、10nmol·L-1)组，另外分为anti-miR-NC组、miR-877-5p抑制剂组、藏红花素(10nmol·L-1)+miR-NC组和藏红花素(10nmol·L-1)+miR-877-5pmimic组。MTT、克隆形成实验检测细胞存活率和克隆形成数，流式细胞术检测细胞凋亡，qRT-PCR检测miR-877-5p表达水平，Westernblot法检测闭合蛋白(occludin)、闭锁小带蛋白(ZO-1)、p-p38蛋白表达。结果与对照组相比，模型组细胞存活率、克隆形成数下降，凋亡率、miR-877-5p、p-p38表达升高，occludin和ZO-1表达降低(P细胞存活率、克隆形成数增加，凋亡率、miR-877-5p、p-p38表达降低，Occludin和ZO-1表达升高(P细胞存活率、克隆形成数及occludin、ZO-1表达增加，凋亡率、miR-877-5p、p-p38表达降低(P上皮细胞存活率、克隆形成数及occludin、ZO-1表达下降，凋亡率、miR-877-5p、p-p38表达升高(P上皮细胞凋亡，促进细胞增殖。

关键词：藏红花素 miR-877-5p 氯吡格雷胃黏膜上皮细胞细胞增殖细胞凋亡

LncRNA MALAT1靶向调控miR-155抑制炎症性肠病肠道上皮细胞损伤

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生物技术 2024年第2期34卷 193-197,252页

作者：郭峰健诸葛萦王俊珊同济大学附属上海市第十人民医院崇明分院消化内科上海202157 上海交通大学附属第一人民医院心内科上海200085 同济大学附属上海市第十人民医院消化内科上海200072

[目的]探究LncRNA MALAT1与miR-155在炎症性肠病肠道损伤中的作用。[方法]用实时荧光定量PCR分析YAMC细胞的MALAT1与miR-155水平。将YAMC细胞分为4组:si NC组、si MALAT1组、miR NC组和miR-155 mimic组。采用荧光素酶报告基因实验分析MA... 详细信息

[目的]探究LncRNA MALAT1与miR-155在炎症性肠病肠道损伤中的作用。[方法]用实时荧光定量PCR分析YAMC细胞的MALAT1与miR-155水平。将YAMC细胞分为4组:si NC组、si MALAT1组、miR NC组和miR-155 mimic组。采用荧光素酶报告基因实验分析MALAT1与miR-155的作用关系。采用流式细胞术分析细胞凋亡率。采用细胞克隆形成实验分析细胞生长能力。采用酶联免疫吸附剂测定炎症因子水平。[结果] TNF-α处理YAMC细胞后,MALAT1表达水平降低(0.98±0.02 vs 0.23±0.01,P细胞形成集落数量显著降低(68.28±8.02 vs 38.53±7.01,P细胞形成集落数量显著降低(73.56±10.32 vs 30.13±6.21,P细胞凋亡率显著增加(20.18±1.02 vs 33.61±6.21,P细胞凋亡率显著增加(22.37±3.61 vs 60.31±10.61,P细胞炎症因子水平显著增加(P细胞炎症因子水平显著增加(P上皮细胞生长,并抑制肠道上皮细胞凋亡,减少炎症因子释放,这一作用可能与MALAT1靶向抑制miR-155表达有关。

关键词： LncRNA MALAT1 miR-155 炎症性肠病肠道损伤上皮细胞凋亡

肾小管上皮细胞脂肪酸代谢与脂质肾毒性的研究进展

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重庆医学 2024年

作者：陈寅清韩世盛王怡上海中医药大学上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院

“脂质肾毒性”假说将脂质代谢紊乱引入肾脏病的研究领域。脂质的重要组分脂肪酸在病理状态下可异位沉积于肾脏各类细胞，参与急性肾损伤和慢性肾脏病发生和进展。近期的研究揭示了肾小管上皮细胞（Tubular epithelial cell，TEC）脂肪... 详细信息

“脂质肾毒性”假说将脂质代谢紊乱引入肾脏病的研究领域。脂质的重要组分脂肪酸在病理状态下可异位沉积于肾脏各类细胞，参与急性肾损伤和慢性肾脏病发生和进展。近期的研究揭示了肾小管上皮细胞（Tubular epithelial cell，TEC）脂肪酸异常代谢的机制及其功能改变和肾损伤的紧密关联。本文通过总结TEC脂肪酸代谢与急性肾损伤及慢性肾脏病的关系，阐述脂肪酸代谢紊乱导致TEC损伤的具体机制，并探讨基于调节脂肪酸代谢紊乱改善肾脏损伤的治疗策略。

关键词：肾小管上皮细胞脂肪酸脂质肾毒性

小鼠角膜上皮细胞永生化细胞系的建立及表型鉴定

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精准医学杂志 2024年第2期39卷 134-138,143页

作者：白莹王一卉葛欢欢卞雯晗陈鹏青岛大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系山东青岛266071

目的探讨小鼠角膜上皮细胞永生化细胞系的建立方法,并鉴定其表型的稳定性。方法提取小鼠角膜上皮原代细胞,以猴空泡病毒40大T抗原(SV40-LT)慢病毒感染小鼠角膜上皮原代细胞建立永生化细胞系。通过HE染色与免疫荧光染色对角膜上皮组织表... 详细信息

目的探讨小鼠角膜上皮细胞永生化细胞系的建立方法,并鉴定其表型的稳定性。方法提取小鼠角膜上皮原代细胞,以猴空泡病毒40大T抗原(SV40-LT)慢病毒感染小鼠角膜上皮原代细胞建立永生化细胞系。通过HE染色与免疫荧光染色对角膜上皮组织表型和标记物(K12、Pax6、Ki-67)进行鉴定。提取原代角膜上皮细胞并对其角膜上皮细胞分层蛋白K14进行鉴定,观察细胞明场视野评估细胞形态学特征。对转染后的P1和P8代细胞的部分标志物(K12、Pax6、Ki-67、ABCG2、K14)进行鉴定。采用结晶紫染色法观察转染后的P1和P8代细胞克隆的形成能力。结果小鼠角膜上皮组织中K12、Pax6、Ki-67染色阳性;P1、P8代小鼠角膜上皮细胞中K12、Pax6、Ki-67、K14和ABCG2染色阳性,上述标志物阳性率比较,差异均无显著性(P>0.05),P1与P8代小鼠角膜上皮细胞克隆能力无明显差异(P>0.05)。结论使用SV40-LT慢病毒转染小鼠角膜上皮,成功建立永生化小鼠角膜上皮细胞系,表型稳定且稳定增殖。

关键词：细胞系上皮细胞角膜转染遗传标记小鼠,近交C57BL

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女性尿路感染患者致病性大肠杆菌对阴道上皮细胞侵袭及作用机制的研究

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中国妇幼保健 2024年第7期39卷 1314-1318页

作者：章存瑞李珺方圆浙江中医药大学滨江学院附属富阳第一医院(杭州市富阳区第一人民医院)检验科浙江杭州311400 浙江中医药大学滨江学院附属富阳第一医院(杭州市富阳区第一人民医院)妇科

目的分析女性尿路感染患者致病性大肠杆菌(UPEC)对阴道上皮细胞侵袭及作用机制。方法选取2020年4月—2022年3月于浙江中医药大学滨江学院附属富阳第一医院就诊的女性尿路感染患者130例,另选取100例无感染患者作为对照,观察患者阴道大肠... 详细信息

目的分析女性尿路感染患者致病性大肠杆菌(UPEC)对阴道上皮细胞侵袭及作用机制。方法选取2020年4月—2022年3月于浙江中医药大学滨江学院附属富阳第一医院就诊的女性尿路感染患者130例,另选取100例无感染患者作为对照,观察患者阴道大肠杆菌细菌负担。取患者阴道上皮细胞,使用透射电子显微镜(TEM)观察大肠杆菌对阴道上皮细胞侵袭情况,使用免疫荧光显微镜观察患者阴道大肠杆菌形态等,分析致病性大肠杆菌对阴道上皮细胞侵袭及作用机制。结果以患者尿道大肠杆菌负担为参考,患者阴道细菌负担为(64.13±5.49)%;以患者阴道大肠杆菌总量为参考,其细菌黏附率为(61.27±4.95)、侵袭率为(30.13±2.65)%;感染组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)相对表达量(2.24±0.58)、(4.78±1.72)及(2.95±1.74)显著高于对照组(1.83±0.41)、(4.15±1.51)及(2.16±1.66)蛋白相对表达量,差异均有统计学意义(t=5.275,P细胞内,大肠杆菌周围的膜内陷。用与四甲基罗丹明缀合的鬼笔环肽染色,结果显示UPEC黏附导致显著的肌动蛋白捆绑,特别是在细菌附近的表面。此外,阴道上皮细胞(VEC)内的细菌被肌动蛋白包围。结论尿路感染患者致病性大肠杆菌会黏附并侵袭患者阴道上皮细胞,在尿路感染后其可从尿路横穿到阴道,它可能通过参与细胞外和细胞内环境而持续存在,其作用机制可能与影响患者PI3K/Akt/mTOR蛋白通路表达及1型菌毛介导拉链机制有关。

关键词：女性尿路感染大肠杆菌阴道上皮细胞侵袭作用机制

基于高加索人单细胞转录组的炎症性树突状表皮细胞的免疫代谢研究

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中华皮肤科杂志 2024年第4期57卷 343-349页

作者：赵迎高翠娥隋昕宋志强陆军军医大学西南医院皮肤科重庆400038

目的比较特应性皮炎患者与健康对照皮肤样本的单细胞转录组测序数据,探讨特应性皮炎皮损中炎症性树突状表皮细胞(IDEC)的免疫代谢特征。方法对既往发表的8例特应性皮炎患者和7例健康对照的单细胞测序数据进行深入挖掘,利用标记基因筛选... 详细信息

目的比较特应性皮炎患者与健康对照皮肤样本的单细胞转录组测序数据,探讨特应性皮炎皮损中炎症性树突状表皮细胞(IDEC)的免疫代谢特征。方法对既往发表的8例特应性皮炎患者和7例健康对照的单细胞测序数据进行深入挖掘,利用标记基因筛选出IDEC,获取两组IDEC的差异表达基因,并对差异表达基因进行京都基因组百科全书富集分析,使用Seurat中的“AddModuleScore”功能对两组IDEC的炎症通路和代谢通路进行评分,Mann-Whitney秩和检验进行统计分析;通过上述评分以及R语言中的“cor”和“cor.test”函数来评估IDEC的代谢通路与炎症通路之间的相关性。结果特应性皮炎患者皮损中大量浸润的IDEC高表达Th2趋化因子(CCL17)、抗原提呈相关基因(CD1B)、内皮生长相关基因(TYMP、AREG)、炎症相关基因(S100A8、S100A10、LGALS1)、基质纤维化相关基因(MMP12、ADAM19)、代谢相关基因(乳酸脱氢酶、脂肪酶A、谷氨酰胺合成酶)、危险信号传导相关基因(HSPA1B、HSP90AA1、HSPB1、HSPH1)。特应性皮炎患者IDEC的葡萄糖能量代谢、糖酵解代谢、核苷酸代谢、谷氨酸和谷氨酰胺代谢、氨基酸代谢活性显著上调,并且与Th2炎症水平呈正相关;氧化磷酸化和脂代谢活性显著下调,其中脂代谢活性与Th2炎症水平呈负相关。谷氨酰胺代谢和葡萄糖能量代谢活性与Th22炎症水平呈正相关;Th1炎症水平和Th17炎症水平与磷酸戊糖代谢、核苷酸代谢、糖酵解代谢和氨基酸代谢等活性呈负相关。结论特应性皮炎患者皮损中IDEC的炎症和代谢相关基因调节异常,多条代谢通路显著上调,其中糖酵解代谢活性与Th2炎症水平相关性最强。

关键词：皮炎,特应性树突细胞上皮细胞转录组炎症性树突状表皮细胞单细胞转录组测序免疫代谢

肠道非免疫细胞及其在炎症性肠病中的作用研究进展

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解放军医学杂志 2024年第5期49卷 594-601页

作者：王泽瑞焦艳梅令狐恩强解放军总医院第一医学中心消化内科医学部北京100853 解放军总医院第五医学中心感染病医学部北京100039

炎症性肠病(IBD)是免疫性疾病,虽然免疫细胞及相关的免疫学反应在IBD的发病过程中起主导作用,但是非免疫细胞,如肠道上皮细胞、间质细胞、内皮细胞等也参与了这一过程。近年来研究表明,肠道非免疫细胞在维持肠道上皮稳态、基质重塑、免... 详细信息

炎症性肠病(IBD)是免疫性疾病,虽然免疫细胞及相关的免疫学反应在IBD的发病过程中起主导作用,但是非免疫细胞,如肠道上皮细胞、间质细胞、内皮细胞等也参与了这一过程。近年来研究表明,肠道非免疫细胞在维持肠道上皮稳态、基质重塑、免疫反应及炎症过程中发挥着重要作用。有关肠道非免疫细胞的构成、基因表达特点及细胞功能,以及它们在IBD发生发展过程中的作用成为研究热点,尤其单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术初步阐明了肠道细胞不同亚群的基因表达特征及细胞功能,以及这些变化与IBD发生发展的关系。本文针对肠道非免疫细胞在IBD中作用的相关进展进行综述。

关键词：炎症性肠病溃疡性结肠炎克罗恩病单细胞RNA测序上皮细胞间充质细胞

喉癌组织的细胞异质性及其上皮细胞演化轨迹分析

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中华耳鼻咽喉头颈外科杂志 2022年第2期57卷 168-177页

作者：顾姗姗沈志森邓红霞裘世杰叶栋宁波市医疗中心李惠利医院耳鼻咽喉头颈外科宁波315040

目的分析喉癌及转移淋巴结的细胞亚群分类及功能,探索上皮细胞向肿瘤细胞演化的轨迹。方法对2019年10月22日至12月16日宁波市医疗中心李惠利医院收治的5例喉癌组织、配对的转移淋巴结及3例癌旁正常组织进行单细胞转录组测序,患者均为男... 详细信息

目的分析喉癌及转移淋巴结的细胞亚群分类及功能,探索上皮细胞向肿瘤细胞演化的轨迹。方法对2019年10月22日至12月16日宁波市医疗中心李惠利医院收治的5例喉癌组织、配对的转移淋巴结及3例癌旁正常组织进行单细胞转录组测序,患者均为男性,年龄53~70岁,使用Seurat软件分析上述组织的细胞亚群,功能富集分析探讨各类细胞亚群的生物学功能。运用拷贝数变异(copy number variation,CNV)情况区分上皮细胞恶性与否,通过拟时序分析揭示正常上皮细胞和肿瘤细胞的演变轨迹,并识别癌变的过渡态细胞。经Seurat软件FindAllMarker函数分析得到过渡态细胞中高表达的基因,并用免疫组化进行验证。结果通过多重质控,共获得66969个高质量单细胞,分为9个主要细胞簇:上皮细胞、T细胞、B细胞、成纤维细胞、内皮细胞、髓系细胞、肥大细胞、浆细胞样树突状细胞和神经细胞,前5类细胞簇分别有8、6、4、3和2类亚群。4个上皮细胞亚群(C0、C1、C2、C5)来源于肿瘤组织和转移淋巴结,具有较高的CNV水平和肿瘤细胞含量。拟时序分析发现上皮细胞演变轨迹为正常上皮细胞亚群C4向早期癌变细胞群C0转化,C0继续分化为3个主要恶性肿瘤细胞亚群C1、C3和C5。上皮细胞C0可能代表癌变的过渡态细胞群,功能富集于上皮间质转化、血管生成等生物学过程,其高表达萝卜硫素(sulforaphane,SFN)可能与肿瘤发生发展相关。免疫组化验证发现SFN在肿瘤组织和转移淋巴结中高表达,而在癌旁组织中低表达。结论本研究利用单细胞测序技术阐述了喉癌组织及转移淋巴结中细胞和功能的多样性,同时C0在肿瘤细胞演化中起到关键作用。

关键词：喉癌单细胞测序肿瘤异质性上皮细胞