河南省部分地区鸡源志贺氏菌的分离鉴定、耐药性及PCR检测

作     者：庞歌 

作者单位：河南农业大学 

学位级别：硕士

导师姓名：许兰菊;朱金凤

授予年度：2010年

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

主      题：河南省 鸡源志贺氏菌 分离鉴定 耐药性实验 PCR检测 

摘      要：为了对河南省部分地区鸡源志贺氏菌性腹泻进行准确诊断,并为有效防治该病提供可靠依据。本试验对来自河南省郑州、商丘、周口、驻马店等18个地区98个鸡场的114只疑似为鸡源志贺氏菌性腹泻病鸡的156份病料进行了病原菌分离鉴定和耐药性试验研究。通过细菌的分离培养、形态染色、生化试验、血清学鉴定、PCR检测、致病性试验,结果从分离出的273株细菌中鉴定出34株志贺氏菌。通过药敏试验发现34个分离株对14种药物产生了不同程度的耐药性。 1.细菌分离培养、形态染色、生化试验： 分离培养、染色特性符合志贺氏菌的特点且生化试验标准的为34株,分离率为11.89%(34/286)。 2.致病性试验结果显示实验组小鸡都被感染了所攻的细菌,感染发病率均达到80%以上,死亡率在0-100%之间。进而表明了34个志贺氏菌分离菌株对雏鸡均具有致病作用。 3.血清学鉴定：经志贺氏菌多价阳性血清平板凝集试验均为阳性,更进一步确定了所分离菌株均为鸡源志贺氏菌。 4.药敏试验：采用Kirby-Bauer法对研究分离鉴定的34株鸡源志贺氏菌分离株进行14种抗菌药物(头孢唑啉、罗红霉素、庆大霉素、环丙沙星等)的耐药性检测,结果显示：所有分离的34株志贺氏菌分离株对罗红霉素产生了严重的耐药性,耐药菌株占分离株总数的100%(34/34),其次为复方新诺明和诺氟沙星其耐药率达到97.1%(33/34);环丙沙星耐药率为94.1%(32/34);氯霉素耐药率为88.2%(30/34);34个分离株对其他药物均呈不同程度耐药性,耐药菌株占分离株总数的23.6%(8/34)-88.2%(30/34)。试验结果表明：不同地区的分离菌株对各种药物的耐药性不同,同一地区的分离菌株对各种药物的耐药性也存在显著差异。 5.采用本实验室根据志贺氏菌ipaH基因建立的PCR方法对分离得到的34株志贺氏菌进行检测,结果34株志贺氏菌均可扩增出预期大小的目的条带,且为志贺氏菌ipaH基因阳性。