脂氧素对小鼠异位移植心存活的影响

作     者：柯有力 

作者单位：华中科技大学 

学位级别：硕士

导师姓名：肖诗亮

授予年度：2007年

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

主      题：心脏移植 脂氧素 iNOS 凋亡 移植物存活 IL-12 小鼠 

摘      要：目的 观察脂氧素(5(S),6(R)-Lipoxin A4, LXA4)对同种异体小鼠移植心脏急性排斥期心肌细胞凋亡和移植心存活时间的影响,探讨其相应机制。 方法 采用Heron法建立C57BL/6小鼠为供体、BALB/C小鼠为受体的小鼠颈部异位心脏移植模型。将移植后小鼠随机分为两组:实验对照组(n=20)和用药实验组(n=20)。分别予以腹腔注射生理盐水(0.2ml/只·d)、脂氧素溶液(LXA4=0.4ug/只·d)。于术后第一天开始用药,连续用药7天。通过触诊法观察各组移植心功能情况,并于术后第5天、第7天和移植心停跳时收集供心标本,记录移植心存活时间,通过光镜、免疫组化SABC法、TUNEL法行原位凋亡检测、ELASA法和RT-PCR法观察移植心排斥反应程度和细胞凋亡情况、检测相关细胞因子IL-12。 结果 1.第5天对照实验组、用药实验组间心肌细胞凋亡指数分别为13.40%±1.82%、5.86%±0.62%,组间有显著差异(P0.01);第7天实验对照组组、用药实验组心肌细胞凋亡指数分别为16.12%±1.26%、7.23%±0.56%,二组间数据有统计学差异(P0.01);且组内凋亡指数比较有统计学差异(P0.01)。 ***染色可见用药实验组间心肌细胞水肿、破坏、心肌组织炎性细胞浸润明显轻于对照组。 ***免疫组化检测第7天移植心标本可见两组表达部位存在明显差异,用药实验组主要表达在血管内皮细胞,对照实验组主要表达在心肌细胞。 ***法检测第7天对照组和用药组小鼠血清中IL-12含量,结果分别为(65.22±1.39)pg/ml、(35.60±1.28)pg/ml,两组存在明显差异(p0.01)。5. RT-PCR检测两组移植心标本第7天iNOSmRNA表达,结果显示对照实验组和用药实验组间目的基因表达有显著差异(P0.05)。 6.对照实验组组、用药实验组移植心存活时间(Median(Q25→Q75))分别为7.0(6.0→8.875)d、17.5(15.0→19.25)d,经统计学分析,两组组间存在明显统计学差异(P0.01)。 结论:脂氧素对急性排斥期小鼠移植心有明显的保护作用,通过抑制IL-12的分泌显著延长小鼠移植心的存活时间,减轻移植心的排斥反应程度。