干扰ALAS2表达通过下调K562细胞线粒体自噬受体BNIP3L影响红系分化

作     者：胡舒婷 李欣瑜 陈晗 许吕宏 方建培 HU Shu-Ting;LI Xin-Yu;CHEN Han;XU Lyu-Hong;FANG Jian-Pei

作者机构：中山大学孙逸仙纪念医院儿科广东省恶性肿瘤表观遗传和基因调控重点实验室广东广州510120 

出 版 物：《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)

年 卷 期：2020年第28卷第5期

页      面：1710-1717页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81370603) 广东省自然科学资金项目(2018A030313526)。 

主　　题：亚铁血红素合成酶ALAS2 BNIP3L 红系分化 活性氧 转录因子 K562细胞 

摘      要：目的:探讨下调亚铁血红素合成酶(ALAS2)对线粒体自噬受体BNIP3L的作用及对K562细胞红系分化的影响。方法:通过慢病毒转染干扰ALAS2的表达,实时荧光定量PCR鉴定转染效率。采用流式细胞术检测K562细胞凋亡、细胞分化、线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平,氯化血红素诱导K562细胞红系分化;蛋白免疫印迹法检测BNIP3L的表达。免疫共沉淀检测ALAS2与BNIP3L蛋白的相互作用。结果:与病毒空载对照组比较,ALAS2干扰组的BNIP3L mRNA和蛋白表达下降(P0.01),转录因子GATA1、Nrf2表达下调,活性氧水平降低(P0.05)。病毒空载对照组线粒体膜电位低于ALAS2干扰组(P0.05),2组的细胞凋亡率无明显差异。氯化血红素诱导细胞分化96 h,ALAS2干扰组BNIP3L表达增加且高于病毒空载对照组,病毒空载对照组和ALAS2干扰组的CD71^highCD235a^high+CD71^lowCD235a^high细胞比例分别为53.5%和92.9%。ALAS2与BNIP3L蛋白无直接相互作用。结论:细胞内亚铁血红素水平影响BNIP3L表达,这可能与活性氧及转录因子的调节有关。BNIP3L低表达能减少细胞凋亡,而高表达则有利于红系分化。