家蚕30kD特异性变应原的分析、纯化与质谱鉴定

作     者：刘志刚 张杰 林格 LIU Zhi-Gang;ZHANG Jie;LIN Ge

作者机构：深圳大学过敏反应与免疫学研究所广东深圳518060 

出 版 物：《昆虫学报》 (Acta Entomologica Sinica)

年 卷 期：2007年第50卷第2期

页      面：101-105页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：国家重点基础研究发展规划"973"项目(2005CB121000) 广东省科技重点计划项目(2003A3080502) 深圳市科技计划重点项目(200326) 

主　　题：家蚕 过敏原 SDS-PAGE Western blotting 离子交换层析 质谱分析 

摘      要：以Coca’s提取液分别提取到不同时期家蚕Bombyx mori的粗浸液，利用SDS-PAGE和Western blotting鉴定其特异性变应原，然后用DEAE-52离子交换层析及切胶纯化出30kD的特异性变应原，再经MALDI—TOF在线联机分析，所得质谱数据进入网站搜索分析。结果显示：1～5龄家蚕均有20条左右蛋白带，其中5龄家蚕有23条蛋白带，主带有11条（82、79、60、51、46、38、32、30、28、24和18kD）。选用家蚕过敏患者阳性血清进行免疫印迹，1-4龄家蚕均显示出82和79kD的特异性变应原；但只有5龄家蚕的30kD蛋白为特异性变应原，通过离子交换层析和经切胶纯化出30kD蛋白，再经MALDI—TOF—MS鉴定该蛋白为外膜蛋白。提示家蚕不同时期抗原成分有所变化，5龄家蚕新出现的30kD蛋白为特异性变应原。