miR-497-5p靶向调控CCNE1基因抑制胰腺癌细胞增殖

作     者：姜达伟 许浏 王伟林 JIANG Dawei;XU Liu;WANG Weilin

作者机构：浙江大学医学院附属第二医院肝胆胰外科杭州310009 嘉兴学院附属医院肝胆胰外科嘉兴314000 

出 版 物：《肿瘤防治研究》 (Cancer Research on Prevention and Treatment)

年 卷 期：2020年第47卷第8期

页      面：600-606页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：浙江省医药卫生科技计划项目(2019KY691)。 

主　　题：miR-497-5p 胰腺癌 预后 增殖 CCNE1 

摘      要：目的明确miR-497-5p在胰腺癌(PaCa)中的表达及临床意义,并探究其对PaCa细胞增殖的影响及机制。方法实时荧光定量PCR实验检测miR-497-5p的表达,卡方检验和Kaplan-Meier生存法分析miR-497-5p的表达与临床病理特征及预后的关系;CCK-8实验和流式细胞术检测过表达miR-497-5p对Capan-2和PANC-1细胞增殖和周期的影响,Spearman相关性检验分析miR-497-5p表达与G1/S特异性细胞周期蛋白E1(cyclin E1,CCNE1)mRNA表达的关系;双荧光素酶报告基因实验和蛋白质印迹法验证miR-497-5p对CCNE1表达的调控作用。结果miR-497-5p在癌组织中的表达显著低于癌旁正常组织(P0.001),T3+T4期患者癌组织中miR-497-5p的表达显著低于T1+T2期癌组织(P0.001);低表达miR-497-5p与较高的T分期相关(P=0.003);低表达miR-497-5p的患者5年总体生存率显著低于高表达者(P=0.036)。与对照组相比,miR-497-5p过表达组细胞增殖显著降低,G0/G1期比例增加,S期比例减少。CCNE1 mRNA在癌组织的表达显著高于癌旁正常组织(P0.001),且与miR-497-5p表达呈负相关(P0.001)。miR-497-5p可直接与CCNE1 mRNA 3’-UTR互补结合从而抑制CCNE1蛋白的表达。结论miR-497-5p在PaCa中低表达,且与较高的T分期及不良预后相关;过表达miR-497-5p通过靶向调控CCNE1基因诱导细胞周期阻滞进而抑制PaCa细胞增殖。