miR-148a-5p参与了高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠的肝细胞凋亡

作     者：马芳 张辉 李桂忠 马胜超 沈江涌 孙磊 郝银菊 马生贤 姜怡邓 Ma Fang;Zhang Hui;Li Guizhong;Ma Shengchao;Shen Jiangyong;Sun Lei;Hao Yinju;Ma Shengxian;Jiang Yideng

作者机构：宁夏医科大学临床医学院宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学基础医学院宁夏回族自治区银川市750004 国家卫生健康委代谢性心血管疾病研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏血管损伤与修复研究重点实验室宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学总医院烧伤整形外科宁夏回族自治区银川市750004 宁夏医科大学药学院宁夏回族自治区银川市750004 

出 版 物：《中国组织工程研究》 (Chinese Journal of Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2020年第24卷第35期

页      面：5632-5637页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 0710[理学-生物学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 0403[教育学-体育学] 1002[医学-临床医学] 08[工学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 0703[理学-化学] 100215[医学-康复医学与理疗学] 0836[工学-生物工程] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81670416),项目负责人:姜怡邓 国家自然科学基金(81660088),项目参与人:张辉 宁夏自然科学基金(2018AAC03265),项目负责人:郝银菊 宁夏医科大学2018年“大学生创新创业计划项目”(201810751007),项目负责人:马生贤。 

主　　题：miR-148a-5p Bcl-2 高蛋氨酸饮食 肝细胞 凋亡 动物 

摘      要：背景:高蛋氨酸饮食可以导致ApoE^-/-小鼠发生肝损伤,微小RNA(miRNA)参与细胞存活、分化和细胞凋亡等各种细胞过程,具有重要意义。目的:探讨miR-148a-5p在高蛋氨酸饮食诱导ApoE^-/-小鼠肝细胞凋亡中的作用。方法:12只ApoE^-/-小鼠随机分为2组,每组6只,ApoE^-/-对照组为普通饮食,ApoE^-/-高蛋氨酸组为高蛋氨酸饮食。苏木精-伊红染色观察2组肝组织形态学变化;TUNEL染色观察肝细胞的凋亡情况;Western blot测定Bax、Bcl-2的表达改变;荧光定量PCR检测miR-148a-5p的表达;运用Target Scan靶基因预测软件预测miR-148a-5p的靶基因;双荧光素酶活性实验明确其靶向关系。结果与结论:①与对照组相比,ApoE^-/-高蛋氨酸组肝脏组织肝小叶结构发生明显紊乱,部分细胞呈胞浆疏松化变性,肝细胞凋亡增加,Bax的表达明显上升且Bcl-2的表达显著下降(P0.01);②荧光定量PCR结果显示,ApoE^-/-高蛋氨酸组miR-148a-5p的表达增加(P0.05);③靶基因预测软件提示,Bcl-2为miR-148a-5p的潜在靶基因;④双荧光素酶活性实验确定了miR-148a-5p与Bcl-2的靶向关系(P0.05);⑤肝细胞中过表达miR-148a-5p后Bax的表达显著上升且Bcl-2的表达明显下降(P0.01);⑥提示在高蛋氨酸饮食诱导的ApoE^-/-小鼠肝细胞中,miR-148a-5p通过负调控Bcl-2促进肝细胞凋亡,这可能是造成肝损伤的机制之一。